กลไกการออกฤทธิ์ของโปรตีนสารพิษจากแบคทีเรีย ~iBacillus thuringiensis (BT)~i นั้นเชื่อว่าเกี่ยวข้องกับการเกิดรูรั่วที่ผนังเซลล์บุผิว กระเพาะอาหารส่วนกลางในแมลงที่กินสารพิษนี้เข้าไป ซึ่งสอดคล้องกับข้อมูลจาก โครงสร้าง 3 มิติของโปรตีนสารพิษ Cry1Aa และ Cry3A ที่ได้แสดงให้เห็นถึงส่วน ของโครงสร้างที่ประกอบด้วยเกลียวอัลฟาที่เป็น amphipathic จำนวน 7 เส้น ซึ่งใน จำนวนนี้มีเกลียวอัลฟา 5 เส้นที่คาดว่าสามารถสอดแทรกเข้าไปในผนังเนื้อเยื่อเพื่อทำให้ เกิดรูรั่วได้ การวิจัยนี้ได้ศึกษาเกลียวอัลฟาที่คาดว่ามีความสัมพันธ์กับการเกิดรูรั่วของโปรตีน สารพิษ Cry4B ที่มีฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำยุงจากแบคทีเรีย ~iBt~i subsp. ~iisraelensis~i โดยได้ เปลี่ยนแปลงกรดอะมิโนในบริเวณกึ่งกลางเกลียวอัลฟาที่ 5,6 และ 7 เป็นกรดอะมิโน proline โดยอาศัยวิธีการเปลี่ยนแปลงยีนเฉพาะที่ด้วยเทคนิคปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส (PCR) ซึ่งได้สร้างโปรตีนกลายพันธุ์ที่ถูกออกแบบตามแบบจำลองโครงสร้าง 3 มิติของ โปรตีนสารพิษ Cry4B หมด 6 ชนิดอันได้แก่ A182P และ L186P ซึ่งได้เปลี่ยนจาก alanine ที่ตำแหน่ง 182 และ leucine ที่ตำแหน่ง 186 ในเกลียวอัลฟาที่ 5 ไปเป็น proline, Y220P และ I221P ซึ่งได้เปลี่ยนจาก tyrosine ที่ตำแหน่ง 220 และ isoleucine ที่ตำแหน่ง 221 ในเกลียวอัลฟาที่ 6 ไปเป็น proline, T254P และ V257P ซึ่งได้เปลี่ยนจาก thrconine ที่ตำแหน่ง 254 และ valine ที่ตำแหน่ง 257 ในเกลียวอัลฟาที่ 7 ไปเป็น proline ตามลำดับ เมื่อได้แสดงออกในแบคทีเรีย ~iEscherichia coli~i พบว่าโปรตีน กลายพันธุ์ทั้ง 6 ชนิดถูกสร้างในรูปของก้อนผลึกโปรตีนภายในเซลล์เหมือนกับโปรตีนต้นแบบ (wild type) แต่ไม่สามารถถูกละลายได้ในสารละลายคาร์บอเนต pH 9.0 และไม่สามารถ ให้ชิ้นส่วนโปรตีนที่คงทนเมื่อถูกละลายในสารละลายคาร์บอเนตที่เติมด้วย trypsin นอกจาก นี้เมื่อทดสอบความสามารถในการฆ่าลูกน้ำยุงลาย ~iAedes aegypti~i โดยใช้แบคทีเรีย ~iE. coli~i ที่สร้างโปรตีนกลายพันธุ์แต่ละชนิดพบว่าโปรตีนกลายพันธุ์ทั้ง 6 ชนิดนี้ ได้สูญเสียความสามารถในการฆ่าลูกน้ำยุง ผลการวิจัยนี้สามารถสรุปได้ว่ากรดอะมิโนที่ได้ ถูกเปลี่ยนแปลงในตำแหน่งดังกล่าวข้างต้นในเกลียวอัลฟาที่ 5, 6 และ 7 มีความสำคัญต่อ ความสามารถในการละลายและความคงทนต่อการตัดย่อยด้วยเอนไซม์ trypsin ซึ่งมีผลกระทบ โดยตรงต่อความเป็นพิษของโปรตีนสารพิษ Cry4B