การผลิตเอนไซม์แอลคาไลน์โปรตีนเอสโดยเชื้อ Bacillus subtilisTISTR 25 โดยการคัดเลือกสูตรอาหารที่เหมาะสมในการใช้เป็นสูตรอาหารพื้นฐานของแหล่งต้นตอคาร์บอน และไนโตรเจน ผลการทดลองพบว่า สูตรอาหารที่เหมาะสมและให้แอคติวิตีของเอนไซม์สูงสุดประกอบด้วย KH(,2)PO(,4) 0.1%,MgSO(4) 0.05%, CaC1(,2) 0.001%, แป้งข้าวเหนียว 0.25% w/v และวัตถุดิบผสมระหว่างกากถั่วเหลืองกับกากเมล็ดทานตะวันในอัตราส่วน 1:1 ในปริมาณรวม 2.0% w/v ซึ่งได้ผ่านการย่อยสลายด้วยกรดซัลฟุริก 1 นอร์มอลสภาวะการเลี้ยงเชื้อที่อุณหภูมิ 37 ซ. ความเร็วรอบในการเขย่าให้อากาศ250 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 48 ชั่วโมง และตรวจหาแอคติวิตีของเอนไซม์ที่pH 10.5 ซึ่งเป็นสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการทำงานสูงสุดของเอนไซม์ เมื่อทำการตกตะกอนน้ำใสที่ใช้เลี้ยงเชื้อด้วยเกลือแอมโมเนียมซัลเฟต 70% และอบแห้งที่ 45 เป็นเวลา 8-12 ชั่วโมง จะได้ตะกอนเอนไซม์ในสภาวะผงเมื่อนำผงเอนไซม์ไปทดสอบการเก็บรักษาที่อุณหภูมิระหว่าง -20 องศาเซลเซียสถึง 60 องศาเซลเซียส พบว่าที่ อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส ถึง30 องศาเซลเซียส สามารถเก็บรักษาเอนไซม์ไว้ได้อย่างน้อย 120 วัน โดยไม่สูญเสียแอคติวิตีของเอนไซม์เลยแต่เมื่อเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 45 องศา-เซลเซียส และ 60 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 120 วัน จะมีแอคติวิตีเหลืออยู่85.2 และ 52.5% ตามลำดับ