รศึกษาก่อนหน้านีพ้ บว่า RpoSมีบทบาทในการควบคุมเอนไซม์ Catalase โดยผ่านการควบคุม OxyR เพื่อต้องการศึกษาระบบการควบคุมภาวะความเครียดจากเอนไซม์ระบบอื่นๆ โดยใช้วิธีการศึกษาโปรตีนองค์รวมเมื่อใช้เชือ้ แบคทีเรียปกติที่ได้รับสารไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เทียบกับที่ไม่ได้รับ สารดังกล่าว รวมทัง้ เทียบกับเชือ้ ที่ผ่าเหล่ายีน rpoS ที่ได้รับและไม่ได้รับสารไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ จากการ วิเคราะห์ที่ใช้เกณฑ์ที่เข้มขันเพื่อเทียบหาความแตกต่างของโปรตีนในโปรตีนองค์รวม พบโปรตีน 13 ชนิดที่เกี่ยวข้อง กับการตอบสนองต่อสารไฮโดรเจนเปอ์ออกไซด์ ในจานวนนี ้ มีโปรตีน 8 ชนิดที่คาดว่าอยู่ภายใต้การควบคุมด้วย RpoS โดยใช้หลักการและผลการศึกษาก่อนหน้านีใ้ นการคาดการณ์โปรโมเตอร์ ในจานวนโปรตีน 8 ชนิดนี ้ คณะผู้วิจัยพบว่าโปรตีน ScoA ซงึ่ เป็นหน่วยย่อยหนงึ่ ของเอนไซม์ SCOT ยังไม่มีการถูกระบุหรือรายงานมาก่อนว่า เป็นเอนไซม์ที่ควบคุมโดย RpoS แบบทางลบเมื่อได้รับสารไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ คณะวิจัยจึงเทียบหาข้อมูลจาก การใช้การคาดการณ์และชีวสารสนเทศ พบว่าเอนไซม์ SCOT ประกอบด้วยหน่วยย่อย 2 หน่วย scoA และ scoB ที่อยู่ภายใต้การควบคุมแบบโอพรอน จึงทาการพิสูจน์ด้วย semi-qRT-PCR พบว่ายีนทัง้ 2 นีเ้ป็นโอพรอน และอยู่ ภายใต้การควบคุมด้วย RpoS รวมทัง้ระดับการแสดงออกของยีนเป็นอาร์เอ็นเอลดลงเมื่อได้รับสารไฮโดรเจนเปอร์ ออกไซด์ จากผลการศึกษานีท้ าให้ค้นพบเอนไซม์ SCOT ซงึ่ เกิดจาก 2 หน่วยย่อย scoA-scoB ที่เกี่ยวข้องต่อการ ได้รับความเครียดของเชือ้ จากสารไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ในแบคทีเรียเป็นครัง้ แรก อีกทัง้ คณะวิจัยได้ตรวจหาการ สร้างสารไนตริกออกไซด์ของเซลล์เจ้าบ้านคนชนิดเซลล์เลีย้ งซงึ่ โดยปกติจะมีการเหนี่ยวนาให้สร้างเอนไซม์ไนตรกอ อกไซด์ซินเตส (iNOS) เพื่อให้ได้ผลผลิตไนตริกออกไซด์ที่จะทาลายการบุกรุกของแบคทีเรีย จากการศึกษาพบว่า เมื่อเซลล์เจ้าบ้านคนทัง้ ชนิด phagocytic และ non-phagocytic ได้รับเชือ้ ดังกล่าวความสามารถในการสร้าง iNOS ของเซลล์เจ้าบ้านลดลง ในขณะที่เมื่อนาแบคทีเรียที่ผ่าเหล่ายีน rpoS มาทดสอบพบว่าเซลล์เจ้าบ้านสามารถสร้าง iNOS ได้มากกว่า ผลจากการศึกษานีแ้ สดงให้เห็นและได้คาตอบเช่นเดียวกับการทดสอบในเซลล์เจ้าบ้านหนูชนิด เซลล์เลีย้ ง Burkholderia pseudomallei, a pathogenic gram-negative bacteria, causes the severe human disease melioidosis. This organism can survive in eukaryotic host cells by escaping reactive oxygen species (ROS) such as hydrogen peroxide, nitric oxide, etc., via the regulation of stress responsive sigma factors, including RpoS. In B. pseudomallei, RpoS has been reported to play a role in the oxidative stress response through OxyR and catalase activities. In this study, we have further characterized the oxidative stress responsive system via RpoS regulation and its target proteins using comparative proteomic analysis and direct assay of inducible nitric oxide synthase (iNOS). The proteomic profiles of wild type B. pseudomallei, untreated and treated with hydrogen peroxide, as well as the rpoS mutant strain were compared. Using stringent criteria, we identified with high confidence 13 oxidative responsive proteins, with eight of these found to be regulated by RpoS. We observed that ScoA, a subunit of the SCOT enzyme not previously shown to be involved directly in the oxidative stress response, is significantly down-regulated after hydrogen peroxide treatment. We also confirmed using RT-PCR that ScoA and ScoB, predicted computationally to organize into the same operon, are indeed co-transcribed as a single mRNA. Our study is the first to elucidate RpoS regulation of SCOT activity in response to oxidative stress in B. pseudomallei. In addition, iNOS was detected that it was reduced in the infected human host cell, both phagocytic and non-phagocytic cells. Our results indicating that this pathogenic bacterium produces a product that is able to inhibit the host’s iNOS resulting in reduction of nitric oxide production under RpoS regulation. This study is confirmed the previous report that B. pseudomallei could inhibit the mouse’s iNOS via bacterial RpoS regulation.