วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2539

ได้คัดแยกแบคทีเรียสายพันธุ์ SR-1 จากตัวอย่างหนังสัตว์ที่มีการติดเชื้อ และสามารถจัดจำแนกได้ใกล้เคียงกับ Bacillus licheniformis สายพันธุ์ SR-1 สามารถสร้างสารยับยั้งการเจริญของจุลินทรีย์ ได้ทั้งแบคทีเรีย รา และยีสต์ ได้นำสายพันธุ์ SR-1 มาหาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการผลิตสารปฏิชีวนะในระดับขวดเขย่า โดยการปรับปรุงสูตรอาหารและภาวะในการเลี้ยง พบว่าสายพันธุ์ SR-1 ผลิตสารปฏิชีวนะได้สูงสุดในอาหารสูตรปรับปรุง R-1 ซึ่งมีองค์ประกอบเป็น แบคโตเปปโตน 0.5% สารสกัดจากเนื้อ 0.3% มอลโตส 1.0% สารสกัดจากยีสต์ 0.25% และแมงกานีสคลอไรด์ ความเข้มข้น 0.5 10-5 โมลาร์ โดยมีพีเอชเริ่มต้นของอาหารเป็น 7.0 เลี้ยงที่อุณหภูมิ 35°ช. บนแคร่เขย่าความเร็ว 200 รอบต่อนาที ซึ่งจะให้ค่าของสารปฏิชีวนะ 24.36 หน่วย/มก. น้ำหนักเซลแห้งในชั่วโมงที่ 60 ของการเลี้ยงเชื้อ สารปฏิชีวนะที่สร้างขึ้นจากสายพันธุ์ SR-1 เป็นผลิตภัณฑ์ที่เกิดขึ้นภายในเซล ได้ทำการสกัดแยกสารปฏิชีวนะออกจากเซลโดยการแช่แข็งร่วมกับการใช้เอ็นไซม์ไลโซไซม์ และสามารถทำสารปฏิชีวนะให้บริสุทธิ์บางส่วนโดยการไดอะไลซ์ในกลีเซอรอล ผ่านคอลัมน์เซฟ-แพก ซี18 2ครั้ง และตามด้วยคอลัมน์เซฟาเด็กซ์จี-25 ตามกระบวนการดังกล่าวทำให้สารปฏิชีวนะมีความบริสุทธิ์เพิ่มขึ้น 16 เท่า สารปฏิชีวนะกึ่งบริสุทธิ์ที่ได้สามารถยับยั้งแบคทีเรียแกรมบวก Bacillus cereus ATCC 11778 Bacillus subtilis ATCC 6633 Bacillus megaterium ATCC 14581 Staphylococcus aureus ATCC 25923 และรา Gliocladium sp. Paecilomyces variotii ได้ตรวจสอบความบริสุทธิ์ของสารปฏิชีวนะที่ได้ โดยการทำโครมาโตกราฟีแบบสมรรถนะสูง ซึ่งปรากฏยอดพีคเด่น 1 พีคที่ Retention time เป็น 2.15 นาที เมื่อได้นำมาตรวจสอบหาน้ำหนักโมเลกุลโดยการทำเจลอิเลคโตรโฟริซิส ได้ค่าน้ำหนักโมเลกุลของสารปฏิชีวนะที่ได้จากสายพันธุ์ SR-1 ประมาณ 9700 ดาลตัน และได้ตรวจสอบโครงสร้างเบื้องต้น โดยการทำอินฟาเรดสเปกตรัมจะให้แถบเด่นในช่วงการดึงของโมเลกุลเป็น 3450 1650 และ 1450 ชม. -¹ ตามลำดับ ซึ่งแสดงให้เห็นว่าสารปฏิชีวนะที่ได้จากสายพันธุ์ SR-1 เป็นสารปฏิชีวนะกลุ่มเพปไทด์ สารปฏิชีวนะที่ได้จากสายพันธุ์ SR-1 มีความเสถียรสูงสุดในช่วงพีเอช 7.0-7.5 และที่อุณหภูมิ 30°ช. ไม่สูญเสียกิจกรรมต่อเบต้าแลกแตมเมส เบต้ากลูโคซีเตส ไลโซไซม์ ปาเปน โปรติเนสเค สูญเสียกิจกรรมบางส่วนต่อเปปซิน และสูญเสียกิจกรรมทั้งหมดต่อทริปซิน