2-Methyl-3-hydroxypyridine-5-carboxylic acid (MHPC) oxygenase (MHPCO) เป็นเอนไซม์ซึ่งมี FAD (Flavin adenine dinucleotide) เป็นโคเอนไซม์ ทำหน้าที่เติมหมู่ ออกซิเจนให้แก่ aromatic substrate (MHPC) ในปฏิกิริยาการสลายของวิตมินบี 6 ของ แบคทีเรีย ~iPseudomonas~i MA-1 การศึกษากลไกปฏิกิริยาของเอนไซม์สามารถทำได้โดย เปลี่ยนโครงสร้างทางเคมีของโคเอนไซม์ FAD ซึ่งเป็นส่วนสำคัญในการเร่งปฏิกิริยาเคมีของ เอนไซม์ เพื่อเพิ่มและลดความสามารถในการดึงอิเลคตรอนโดยมีสมมติฐานว่า ปฏิกิริยาในการ เติมหมู่ออกซิเจนของเอนไซม์เกี่ยวข้องกับความสามารถในการให้และรับอิเลคตรอน การเปลี่ยน โครงสร้างทางเคมีของโคเอนไซม์ด้วยการเปลี่ยนหมู่เคมีตำแหน่งคาร์บอนที่ 8 ของ FAD โดย แทนที่ด้วย C1- และ CN- ซึ่งมีคุณสมบัติที่สามารถดึงอิเลคตรอนสูง ส่วน NH(,2)- และ CH(,3)-O- จะมีคุณสมบัติที่สามารถดึงอิเลคตรอนต่ำ ในการศึกษาโคเอนไซม์ธรรมชาติออกจะ ถูกดึงออกและแทนที่ด้วยโคเอนไซม์ซึ่งเปลี่ยนหมู่เคมีตำแหน่งคาร์บอนที่ 8 ของ FAD จาก การศึกษาพบว่าเมื่อเอนไซม์ถูกแทนที่ด้วยโคเอนไซม์ซึ่งเปลี่ยนหมู่เคมี ยังคงไว้ซึ่งสมบัติ ทางกายภาพและทางเคมีได้ใกล้เคียงกับเอนไซม์ธรรมชาติและสามารถนำมาศึกษากลไกปฏิกิริยา เคมีได้ รวมทั้งความสามารถในการให้และรับอิเลคตรอนยังเป็นไปตามคุณสมบัติของหมู่เคมี ที่ถูกเปลี่ยนตำแหน่งคาร์บอนที่ 8 ของ FAD ซึ่งวัดได้จากค่าศักย์ไฟฟ้าเคมีและพบว่า ปฏิกิริยาเติมหมู่ออกซิเจนถูกเร่งเมื่อเอนไซม์ถูกแทนที่ด้วยโคเอนไซม์ที่เปลี่ยนหมู่เคมี ไปเป็น C1- และ CN- ซึ่งมีคุณสมบัติที่สามารถในการดึงอิเลคตรอนสูงและถูกหน่วงเมื่อ เอนไซม์ถูกแทนที่ด้วยโคเอนไซม์ที่เปลี่ยนหมู่เคมีไปเป็น NH(,2)- และ CH(,3)-O- ซึ่งมี คุณสมบัติที่สามารถในการดึงอิเลคตรอนต่ำ ผลเหล่านี้เมื่อนำมาวิเคราะห์ร่วมในสมการของ Hammett ที่แสดงความสัมพันธ์ระหว่างค่าคงที่อัตราเร็วปฏิกิริยากับความสามารถในการรับ อิเลคตรอน แสดงให้เห็นว่าอัตราเร็วปฏิกิริยาที่เพิ่มขึ้นแปรผันตามความสามารถในการรับ อิเลคตรอนที่เพิ่มขึ้นและสอดคล้องกับกลไกปฏิกิริยาเคมีแบบ Electrophilic aromatic substitution