ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การส่งถ่าย DNA ของ Mucor rouxii ATCC 24905

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การส่งถ่าย DNA ของ Mucor rouxii ATCC 24905
นักวิจัย : สุกัญญา จีนเหนาะ
คำค้น : ~iMucor rouxii~i , ระบบการส่งถ่ายยีน , Hygromycin B , Artificial Chromosomal Plasmid Dominant Selectable Marker , ~iMUCOR ROUXII~i , TRANSFORMATION , HYGROMYCIN B , ARTIFICIAL CHROMOSOMAL PLASMID , DOMINANT SELECTABLE MARKER
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2545
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=2007
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

วิทยานิพนธ์นี้เป็นการศึกษาพัฒนาระบบการส่งถ่ายยีนเข้าสู่ ~iMucor rouxii~i ATCC 24905 เพื่อใช้เป็นเครื่องมือในการศึกษาอณูพันธุศาสตร์และ การปรับปรุงสายพันธุ์ของ ~iMucor~i ในการศึกษานี้ได้ทำการส่งถ่ายพลาสมิด ที่มียีนต้านยา hygromycin B เข้าสู่เซล ~iM. rouxii~i โดยใช้วิธี polyethylene glycol treatment (PEG) และวิธี electroporation พลาสมิดที่ใช้มี 2 ชนิดคือ 1) artificial chromosomal plasmid (pHL.DD) ซึ่งมี telomere sequence ของ ~iHistoplasma capsulatum สำหรับเพิ่มความเสถียรของพลาสมิด และ 2) integrative plasmids ของ (pD4 และ pMG181) ซึ่งมี repetitive ribosomal DNA seguence ช่วยทำให้พลาสมิดสามารถแทรกเข้าไปในโครโซมของ ~iMucor~i ได้ จากการคัดเลือก transformant บนอาหาร YPG ที่มียา hygromycin B ที่ความเข้มข้น 200 (+,m)g.ml(-1) พบว่าความถี่ของ transformant ที่ได้รับจากทั้งสองวิธี ไม่แตกต่างกัน คือมีอัตรา 3-12 transformants ต่อ 10(7) ~iM. rouxii~i เซลต่อ 5 (+,m)g DNA และเมื่อนำ transformant ที่ได้ไปตรวจสอบหายีนที่ดื้อต่อยา hygromycin B (hph gene) พบว่าสามารถตรวจพบ hph gene ใน transformant ที่ได้รับพลาสมิดทั้งสองชนิดด้วยวิธี PCR แต่ไม่สามารถตรวจพบได้ด้วยวิธี Southern blot ทั้งนี้อาจเนื่องจาก transformant ที่ได้มีจำนวนชุดของพลาสมิดต่ำมาก จากการตรวจสอบความเสถียรของ transformant โดยทำการเลี้ยงบนอาหารที่มียาและไม่มียา hygromycin B พบว่า transformant ที่ได้รับพลาสมิด pD4 และ pMG181 สามารถสามารถเจริญในอาหารที่ มียาและไม่มียาได้เมื่อทำการ subculture ไป 3 ครั้ง ในขณะที่ transformant ที่ได้รับพลาสมิด pHL.DD มีความเสถียรน้อยกว่า คือสูญเสียคุณสมบัติในการ ดื้อยา hygromycin B หลังจากทำการ subculture ไปเพียงครั้งเดียว แสดงว่า transformant ที่ได้ยังมีความเสถียรไม่มากพอ แม้ว่าในการทดลองนี้ ยังไม่สามารถพัฒนาระบบการส่งถ่ายยีนที่มีความเสถียรสูงสำหรับ ~iM. rouxii~i ได้ แต่ความรู้เกี่ยวกับการส่งถ่ายยีน รวมทั้ง integrative plasmid สำหรับ ~iMucor~i ที่ได้รับในการทดลองนี้ สามารถนำไปใช้ในการพัฒนาหรือปรับปรุงระบบ การส่งถ่ายยีนเข้าสู่ ~iMucor~i ให้มีความเสถียรมากขึ้นต่อไป

บรรณานุกรม :
สุกัญญา จีนเหนาะ . (2545). การส่งถ่าย DNA ของ Mucor rouxii ATCC 24905.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุกัญญา จีนเหนาะ . 2545. "การส่งถ่าย DNA ของ Mucor rouxii ATCC 24905".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
สุกัญญา จีนเหนาะ . "การส่งถ่าย DNA ของ Mucor rouxii ATCC 24905."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2545. Print.
สุกัญญา จีนเหนาะ . การส่งถ่าย DNA ของ Mucor rouxii ATCC 24905. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2545.