ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

Shrimp hepatopancreatic parvovirus detection by combining loop-mediated isothermal amplification with a lateral flow dipstick

หน่วยงาน สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : Shrimp hepatopancreatic parvovirus detection by combining loop-mediated isothermal amplification with a lateral flow dipstick
นักวิจัย : Tongchai Nimitphaka , Wansika Kiatpathomchai , Timothy W. Flegel , ธงชัย นิมิตภาคย์ , วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย
คำค้น : HPV , LAMP , Molecular biology , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ
หน่วยงาน : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2551
อ้างอิง : http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/17617
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

Present methods such as traditional PCR. PCR-ELlSA, real-time PCR and histopathology for detection of shrimp hepatopancreatic parvovirus (PmDNV) entail various disadvantages including high cost, long assay time or use of toxic substances. Loop-mediated isothermal amplification (I.JMP) of target nucleotide sequences under inexpensive isothermal conditions combined with amplicon detection by chromato¬graphic lateral flow dipsticks (LFD) allowed simpler detection within 75 min. Biotinylated UMP amplicons from the targeted portion of the PmDNA capsid protein gene were produced under isothermal conditions at 63"C for 1 h and then hybridized at 63°C for 5 min with an FITC-Iabeled probe (optimized at 20pmol) that was specific for the LAMP amplicons (i.e., outside the primer region). The FITC-Iabeled, biotinylated LAMP product picked up gold-labeled. anti-FiTC near the LFD origin and the whole. triple-labeled com¬plex was captured by an immobilized biotin-binding protein to yield a red nano-gold stripe at the LFD test line. With a DNA template derived from PmDNV-infected shrimp, the I.JMP-LFD detection limit was 1 ng whi~ that for one-step PCR-electrophoresis was 10 ng. Comparative sensitivity for one nested¬PCR-electrophoresis method was 1 ng but for another 0.1 ng. The LAMP-LFD method gave negative test results with DNA extracts from normal shrimp and from shrimp infected with other DNA viruses includ¬ing monodon baculovirus (MBV), white spot syndrome virus (WSSV) and infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus (IHHNV).

บรรณานุกรม :
Tongchai Nimitphaka , Wansika Kiatpathomchai , Timothy W. Flegel , ธงชัย นิมิตภาคย์ , วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย . (2551). Shrimp hepatopancreatic parvovirus detection by combining loop-mediated isothermal amplification with a lateral flow dipstick.
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
Tongchai Nimitphaka , Wansika Kiatpathomchai , Timothy W. Flegel , ธงชัย นิมิตภาคย์ , วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย . 2551. "Shrimp hepatopancreatic parvovirus detection by combining loop-mediated isothermal amplification with a lateral flow dipstick".
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ.
Tongchai Nimitphaka , Wansika Kiatpathomchai , Timothy W. Flegel , ธงชัย นิมิตภาคย์ , วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย . "Shrimp hepatopancreatic parvovirus detection by combining loop-mediated isothermal amplification with a lateral flow dipstick."
    ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2551. Print.
Tongchai Nimitphaka , Wansika Kiatpathomchai , Timothy W. Flegel , ธงชัย นิมิตภาคย์ , วรรณสิกา เกียรติปฐมชัย . Shrimp hepatopancreatic parvovirus detection by combining loop-mediated isothermal amplification with a lateral flow dipstick. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2551.