ซีบีแอล-บีเป็นสมาชิกตัวหนึ่งในกลุ่มเอนไซม์อีทรียูบิควิตินไลเกส (E3 ubiquitin ligase) นอกเหนือไปจากการทำหน้าที่เป็นเอนไซม์ที่สำคัญในการย่อยสลายโปรตีนด้วยกระบวนการยูบิควิติเนชั่นแล้ว มีการศึกษาหลายชิ้นที่แสดงให้เห็นว่าเอนไซม์ในกลุ่มอีทรียูบิควิตินไลเกสมีส่วนร่วมในการควบคุมการเจริญและพัฒนาของเซลล์สร้างกระดูก อย่างไรก็ตามยังไม่เคยมีการศึกษาเกี่ยวกับบทบาทของซีบีแอ-บี (Cbl-b) ในการควบคุมการทำหน้าที่ของเซลล์สร้างกระดูกมาก่อน งานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของซีบีแอล-บีในการควบคุมการทำงานของจีนรันเอกซ์ทู (Runx2) ซึ่งเป็นจีนหลักที่ควบคุมกระบวนการเจริญและพัฒนาของกระดูก โดยทำการเพิ่มจำนวนซีบีแอล-บีและรันเอกซ์ทูในเซลล์ไลน์ของเซลล์สร้างกระดูกจากนั้นวัดระดับการทำงานของออสทิโอแคลซินโปรโมเตอร์และระดับการแสดงออกของจีนรันเอกซ์ทู จากผลของลักซิเฟอร์เรสแอสเสแสดงให้เห็นว่าเมื่อซีบีแอล-บีและรันเอกซ์ทูนั้นถูกเหนี่ยวนำเข้าเซลล์ไลน์ของเซลล์สร้างกระดูกพร้อมกัน ซีบีแอล-บีนั้นสามารถส่งเสริมการทำงานของจีนรันเอกซ์ทูในการกระตุ้นออสทิโอแคลซินโปรโมเตอร์ให้มากขึ้น นอกจากนี้การเหนี่ยวนำซีบีแอล-บีและรันเอกซ์ทูเข้าเซลล์พร้อมกันยังช่วยเพิ่มปริมาณโปรตีนของรันเอกซ์ทู แต่อย่างไรก็ตามซีบีแอล-บีไม่ได้เพิ่มการแสดงออกของรันเอกซ์ทูเมสเซนเจอร์อาร์เอ็นเอ การเพิ่มขึ้นของโปรตีนรันเอกซ์ทูโดยซีบีแอล-บีสามารถถูกยับยั้งโดยการยับยั้งการทำงานของ 26 เอส โปรติเอโซมด้วยแล็คตาซิสทิน (lactacystin) จากการวิเคราะห์โดยอิมมูโนพริซิพิเทชั่นแอสเสพบว่าซีบีแอล-บีนั้นไม่จับโดยตรงกับรันเอกซ์ทู จากผลการทดลองนี้แสดงให้เห็นว่าซีบีแอล-บีน่าจะทำการปรับเปลี่ยนรันเอกซ์ทูภายหลังจากที่รันเอกซ์ทูนั้นถูกสร้างเป็นโปรตีนแล้ว (post-translational modifications) ข้อมูลเหล่านี้แสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกว่าซีบีแอล-บีนั้นมีส่วนร่วมในการควบคุมการแสดงออกและการทำงานของจีนรันเอกซ์ทู อย่างไรก็ตามบทบาทของซีบีแอล-บีต่อการเจิรญและพัฒนาของเซลล์สร้างกระดูกยังคงต้องมีการศึกษาต่อไป Cbl-b is a member of Cbl family of E3 ubiquitin (Ub) ligase. Beside the important role in ubiquitination process, several studies demonstrated the role of some E3 Ub ligases in regulation of osteoblastic differentiation. However, the involvement of Cbl-b in regulation of osteoblastic function has not been reported yet. To elucidate the role of Cbl-b in regulation of Runx2, a master gene of osteoblastic differentiation, we overexpressed Cbl-b and Runx2 in osteoblastic cell lines and observed the osteocalcin promoter activity together with the expression of Runx2. The luciferase assay demonstrated that Cbl-b has synergistic effect with Runx2 function on osteocacin promoter activity when they are co-transfected into osteoblasts. Cbl-b, co-transfected with Runx2, also upregulated Runx2 protein levels but did not alter Runx2 mRNA expression. The up-regulation of Runx2 protein by Cbl-b was inhibited by treatment with lactacystin, a specific inhibitor of the 26S proteasome. Immuno-precipitation assay indicated that there was no direct interaction between Cbl-b and Runx2. These results indicated that Cbl-b would rather act through the post-translational modifications of Runx2 protein. These data propose, for the first time, the involvement of Cbl-b in regulation of osteoblast-related gene product, Runx2. However the possible mechanisms are yet to be evaluated.