| ชื่อเรื่อง | : | ผลของความเครียดจากเกลือต่อการขนส่งโคลีนเข้าสู่ไซยาโนแบคทีเรียทนเค็ม ~iAphanothece halophytica~i |
| นักวิจัย | : | สุรศักดิ์ ละลอกน้ำ |
| คำค้น | : | ~iAphanothece halophytica~i , CHOLINE , NITRATE , UPTAKE , BETAINE TRANSPORTERSURASAK LALOKNAM |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2548 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082548000677 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | สาหร่ายสีเขียวแกมน้ำเงินทนเค็ม ~iAphanothece halophytica~i เจริญภายใต้ภาวะที่มีความเครียดของเกลือโซเดียมคลอไรด์ 0.5 - 3.0 โมลาร์ พีเอช 6.5 - 10.5 พบว่าเซลล์เจริญได้ดีที่ความเข้มข้นของเกลือโซเดียมคลอไรด์ 0.5 โมลาร์ และ พีเอช 9.5 ตามลำดับศึกษาความสัมพันธ์ของการเจริญของเซลล์ ขนาดของเซลล์ สารประกอบภายในเซลล์ องค์ประกอบของกรดอะมิโน และ รูปแบบของโปรตีนภายใต้ภาวะที่มีความเครียดของเกลือ พบว่า การเจริญของเซลล์ลดลงเมื่อความเข้มข้นของเกลือโซเดียมคลอไรด์เพิ่มขึ้น ภายใต้ภาวะที่มีความเครียดของเกลือ พบว่า เซลล์มีขนาดเพิ่มขึ้น มีการสะสมไกลซีนบีเทนเพิ่มขึ้น และ อิออนโซเดียมโปแตสเซียม แอมโมเนียม และ ไนเตรต มีการเปลี่ยนแปลงอย่างไม่เด่นชัด เมื่อเปรียบเทียบกับภาวะที่ไม่มีความเครียดจากเกลือ กลูตามีนเป็นกรดอะมิโนที่พบมากที่สุดทั้งสองภาวะและ พบกรดอะมิโนกลูตามีน แอสปาเตต โปรชีน และ กลูตาเมต เพิ่มขึ้นภายใต้ภาวะที่มีความเครียดของเกลือ ภาวะที่มีความเครียดของเกลือชักนำให้เกิดแถบโปรตีนเพิ่มขึ้นในแฟรกชั่น ไซโตปลาสซึมเพอริปลาสซึม และ เมมเบรน เมื่อทำการวิเคราะห์ด้วย โซเดียมโคเดซิลซัลเฟตพอลิอะคริลิไมค์เจล อิเล็กโตรพอลิซีส แถบโปรตีนที่มีความเข้มสูงสุดของแฟรกชั่นไซโตปลาสซึม เพอริปลาสซึม และเมมเบรน มีมวลโมเลกุล 32.0, 35.5, และ 41.5 กิโลดาลตันตามลำดับ แฟรกชันเมมเบรนมีสมบัติเป็นโปรตีนที่จับกับโคลีนได้และถูกยับยั้งสมบัติโปรตีนที่จับโคลีนกับเมมเบรนได้ด้วย ไกลซีนบีเทน ไกลซีนบีเทนอัลดีไฮด์ และคาร์นิทีน ตามลำดับเมื่อทำการศึกษาโดยเทคนิค พอลิอะคริลิไมค์เจล อิเล็กโตรพอลิซิส แบบไม่เสียสภาพ ตามด้วยออโตเรดิโอกราฟ การตกตะกอนโปรตีนที่มีสารรังสี และ เซอร์เฟสพลาสมอนเรโซแนนซ์ ทำการศึกษาจลนพลศาสตร์การนำเข้าโคลีนเข้าสู่เซลล์ และ เมมเบรน เวซิเคิล ของ~iA. halophytica~i ที่ภาวะปกติ และภาวะที่มีความเครียดของเกลือ 1.0 โมลาร์ และ2.0 โมลาร์ มีค่า K(,m) = 246.78, 262.19, และ 299.51 ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ และอัตราเร็วสูงสุด V(,max) เป็น 12.12, 24.10, และ 10.71 nmol/min/mg protein, ตามลำดับการนำโคลีนเข้าสู่เมมเบรน เวซิเคิล พบว่าที่ภาวะปกติโซเดียมคลอไรด์ความเข้มข้น 0.5 โมลาร์และภาวะที่มีความเครียดของเกลือโซเดียมคลอไรด์ 2.0 โมลาร์ มีค่า K(,m) = 82.00 and88.11 ไมโครโมลาร์ ตามลำดับ และอัตราเร็วสูงสุด V(,max) เป็น 4.55 และ 1.82 nmol/min/mgprotein ตามลำดับ ที่ภาวะที่มีความเครียดของเกลือ ไกลซีนบีเทน และ ไกลซีนบีเทนอัลดีไฮด์ยับยั้งการนำเข้าโคชีนได้อย่างสมบูรณ์ เมื่อทำการศึกษาพลังงานที่จำเป็นในการนำโคลีนเข้าสู่เซลล์ และ เมมเบรนเวซิเคิลของสาหร่ายสีเขียวแกมน้ำเงินทนเค็ม ~iA. halophytica~i พบว่าผลการทดลองที่ทำทั้งสองมีความคล้ายกัน การนำเข้าโคลีนยับยั้งได้อย่างสมบูรณ์ด้วย คาร์บอนิล ไซยาไนด์ เอ็มคลอโรฟีนิล ไฮดราโซน และ 2, 4 ไดไนโตรฟีนอล อธิบายได้ว่าการนำเข้าโคลีนขับเคลื่อนโดยโปรตอนโมทีฟฟอร์ซ การศึกษาด้วยการสร้างความต่างศักย์ของความเป็นกรด-ด่าง ระหว่างเมมเบรน ((+,D)pH) พบว่าเพิ่มการนำเข้าโคลีน เมื่อทำการลดความต่างศักย์ของความเป็นกรด-ด่าง ระหว่างเมมเบรน ((+,D)pH) พบว่าการนำเข้าโคลีนลดลง และเมื่อพีเอชภายนอกเพิ่มขึ้นการนำเข้าโคลีนก็เพิ่มขึ้นเช่นกัน เมื่อทำการเพิ่มศักย์ของเมมเบรนอันเนื่องมาจากประจุ((+,D)(+,y)) ไม่มีผลต่อการนำเข้าโคลีน เมื่อทำการศึกษาการลดความต่างศักย์ของเมมเบรนอันเนื่องมาจากประจุ ((+,D)(+,y)) ด้วยการใช้วาลิโนไมซิน ไม่มีผลต่อการนำเข้าโคลีนเช่นกันแต่เป็นส่วนหนึ่งที่ให้พลังงานในการนำเข้าโคลีน การนำเข้าโคลีนถูกยับยั้งอย่างสมบูรณ์ด้วย ไนเจอริซิน (ตัวยับยั้งความต่างศักย์ของเมมเบรนอันเนื่องมาจากโปรตอน)อธิบายได้ว่าการนำเข้าโคลีนขึ้นอยู่กับความต่างศักย์ของเมมเบรนอันเนื่องมาจากโปรตอนอย่างไรก็ตาม ความต่างศักย์อันเนื่องมาจากโซเดียมอิออนมีบทบาทในการนำเข้าโคลีน เพราะว่าโมเนนซิน และ อะมิโลไรด์ (ตัวยับยั้งความต่างศักย์อันเนื่องมาจากโซเดียมอิออน) ยับยั้งการนำเข้าโคลีน และทำการศึกษาการนำไนเตรตเข้าสู่เซลล์ สาหร่ายสีเขียวแกมน้ำเงินทนเค็ม~iA. halophytica~i พบว่าผลการทดลองเหมือนกับการนำโคลีนเข้าสู่เซลล์ ทำการศึกษาสมบัติของยีนบีเทนทรานส์พอร์เตอร์ของ ~iA. halophytica~i เนื่องจากไม่สามารถทำการแยกยีนที่เกี่ยวข้องกับการขนส่งโคลีนได้ พบว่ายีนบีเทนทรานส์พอร์เตอร์ของ ~iA. halophytica~i มีความเหมือนสูงกับ OpuD ของ ~iBacillus subtilis~i และมีความเหมือนน้อยกับ บีเทน/โปรชีนทรานส์พอร์เตอร์ที่พบในพืช จากนั้นทำการโคลนยีนของบีเทนทรานส์พอร์เตอร์เข้าสู่ ~iEscherichia coli~i MKH13 ที่ไม่มียีนของระบบการขนส่ง โคลีนบีเทน และ โปรตีน พบว่าสามารถทำให้ MKH13 ที่มียีนบีเทนทรานส์พอร์เตอร์เจริญได้ในความเข้มข้นของเกลือสูงกว่าภาวะปกติและมีความจำเพาะต่อ บีเทน และไม่นำเข้าโปรลีน พบว่าโคลีน จีเอบีเอ บีเทนอัลดีไฮด์ ซาร์โคซีน ไดเมทิลไกลซีน และ กรดอะมิโน ไม่มีผลต่อการนำเข้าบีเทน โซเดียมอิออนเร่งการนำเข้าบีเทนโดยไม่เกี่ยวข้องกับโปแตสเซียมอิออน พีเอชที่เหมาะสมในการนำเข้าบีเทนคือ พีเอช 9 จากนั้นทำการโคลนเข้าสู่สาหร่ายสีเขียแกมน้ำเงินน้ำจืด ~iSyneccococcus~i พบว่าสามารถทำให้สาหร่ายสีเขียวแกมน้ำเงินน้ำจืด เจริญเติบโตได้ในน้ำเค็ม และกลไกทางจลนพลศาสตร์ของการนำ บีเทนเข้าสู่เซลล์ ~iSyneccococcus~iที่มียีนบีเทน ทรานส์พอร์เตอร์คล้ายกับการนำบีเทนเข้าสู่เซลล์ ~iA. halophytica~iจากการค้นพบนี้แสดงว่า ~iA. halophytica~i มีโซเดียมอิออน-บีเทน ซิมพอร์เตอร์ ที่ทนต่อภาวะเครียดของเกลือ และพีเอชที่เป็นด่าง |
| บรรณานุกรม | : |
สุรศักดิ์ ละลอกน้ำ . (2548). ผลของความเครียดจากเกลือต่อการขนส่งโคลีนเข้าสู่ไซยาโนแบคทีเรียทนเค็ม ~iAphanothece halophytica~i.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. สุรศักดิ์ ละลอกน้ำ . 2548. "ผลของความเครียดจากเกลือต่อการขนส่งโคลีนเข้าสู่ไซยาโนแบคทีเรียทนเค็ม ~iAphanothece halophytica~i".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. สุรศักดิ์ ละลอกน้ำ . "ผลของความเครียดจากเกลือต่อการขนส่งโคลีนเข้าสู่ไซยาโนแบคทีเรียทนเค็ม ~iAphanothece halophytica~i."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2548. Print. สุรศักดิ์ ละลอกน้ำ . ผลของความเครียดจากเกลือต่อการขนส่งโคลีนเข้าสู่ไซยาโนแบคทีเรียทนเค็ม ~iAphanothece halophytica~i. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2548.
|
