นำรีคอมบิแนนท์พลาสมิด pCSBC14 ซึ่งเป็น pUC18 ที่มีโครโมโซมัลดีเอ็นเอของ ~iB. subtilis~i TISTR25 ขนาด 4.0 กิโลเบส และเชื่อว่าเป็นโคลนของยีนโปรตีเอส มาย่อยด้วยเอนไซม์ ~iHindIII~i และ ~iEcoRI~i ได้ชิ้นดีเอ็นเอสอดแทรกของ pCSBC14 ขนาด 0.7, 0.9 และ 1.6 กิโลเบส นำแต่ละชิ้นมาเชื่อมกับดีเอ็นเอพาหะ M13mp18 และเคลื่อนย้ายเข้าสู่เซลล์เจ้าเรือนคือ ~iE. coli~i JM109ได้รีคอมบิแนนท์ดีเอ็นเอ 3 โคลนให้ชื่อว่า mCSBC141, mCSBC142 และ mCSBC143มีขนาดของชิ้นดีเอ็นเอสอดแทรกเท่ากับ 0.7, 0.9 และ 1.6 กิโลเบส ตามลำดับจากนั้นนำรีคอมบิแนนท์พลาสมิด pCSBC14, mCSBC141, mCSBC142 และ mCSBC143มาทำการหาลำดับเบสโดยวิธี dideoxynucleotide chaintermination ได้ลำดับนิวคลีโอไทด์มีขนาด 2,308 เบสจากปลาย 3' ของชิ้นดีเอ็นเอสอดแทรกของ pCSBC14ซึ่งแสดง open reading frame 1,803 เบสแปลรหัสเป็นกรดอะมิโนได้ 600 ตัวเมื่อนำลำดับเบสของยีนนี้ไปเปรียบเทียบกับลำดับเบสของดีเอ็นเอใน GenBankโดยใช้ BLAST พบว่ามีความเหมือนกัน 86% กับยีน L-glutamine D-fructose-6-phosphate amidotransferase ~i(gcaA)~i จากเชื้อ ~iB. subtilis~i 168เมื่อทำการหาแอคติวิตีของเอนไซม์ ~igcaA~i ใน ~iE. coli~i DH5(+,a) ที่มีพลาสมิดpCSBC14 พบว่ามีแอคติวิตีของเอนไซม์นี้อยู่ ดังนั้นจึงสรุปได้ว่ารีคอมบิแนนท์พลาสมิด pCSBC14 นี้เป็นโคลนของยีน L-glutamine D-fructose-6-phosphate amidotransferase ~i(gcaA)~i จากเชื้อ ~iB. subtilis~i TISTR25สำหรับการทำ Southern blot hybridization เพื่อติดตามยีน โปรตีเอสในจีโนมของ ~iB. subtilis~i TISTR25 ยืนยันว่ายีนของทั้งนิวทรัล และแอลคาไลน์โปรตีเอสยังคงอยู่ในจีโนมของ ~iB. subtilis~i TISTR25