| ชื่อเรื่อง | : | ลักษณะสมบัติเชิงหน้าที่ของยีนกลุ่ม OsCML จากข้าว Oryza sativa L. |
| นักวิจัย | : | ธีรพงษ์ บัวบูชา |
| คำค้น | : | calcium signaling , calmodulin , CaM , CML , rice , ข้าว , คัลมอดุลิน , สัญญาณแคลเซียม |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2555 |
| อ้างอิง | : | http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=RSA5280015 , http://research.trf.or.th/node/6878 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | Calmodulin (CaM) transduces the increase in cytosolic Ca2+ concentrations by binding to and altering the activities of target proteins, and thereby affecting the physiological responses to the vast array of stimuli. Here, we examined the purified recombinant proteins encoded by three Cam and eight Cam-like (CML) genes from rice. All recombinant proteins exhibited an electrophoretic mobility shift when incubated with Ca2+. By examining their conformational changes upon Ca2+-binding by CD spectroscopy and fluorescence spectroscopy using ANS, OsCMLs were found exhibiting a spectrum of both structural and functional characteristics that ranged from typical to atypical of CaMs. Expression patterns of nine OsCML genes were examined by real-time PCR in rice Oryza sativa L. cv. KDML105. Under salt stress (150 mM) and osmotic stress (20% PEG), expression of OsCML4 and OsCML8 was significantly increased after 3 hours until at least 24 hours after treatment. On the other hand, expression of OsCML5 and OsCML11 was up-regulated as early as 1 hour and 3 hours after both stresses, respectively, before rapidly returning to their normal levels. In addition, expression of OsCML1 was shown to increase only at 1 hour after salt stress, but not after osmotic stress. These results suggest that products of these genes may function in Ca2+-mediated response to these stresses. Finally, binding proteins of OsCaM1, OsCML3 and OsCML3d were identified by cDNA expression library screening. Nine distinct positive cDNA clones were each obtained from OsCaM1 and OsCML3d, and two from OsCML3. Altogether, the screening identified four previously known CaM-binding proteins from other plants including a cyclic nucleotide-gated ion channel, a glutamate decarboxylase, a CaM-binding transcription activator, and a kinesin motor domain-containing protein. However, 13 putative novel CaM/CML-binding proteins, whose functions are involved in diverse cellular processes, were revealed. Taken together, these results suggest that genetic polymorphism has promoted the functional diversity of the OsCML family, whose members possess modes of actions probably different from, though maybe overlapping with, those of OsCaMs. These data will help facilitate further investigations into molecular functions and physiological significance of OsCML proteins in mediating stress response and tolerance to diverse environmental stresses of rice plants. คัลมอดุลิน (Calmodulin, CaM) เป็นโปรตีนส่งผ่านสัญญาณแคลเซียมที่ทำงานโดยจับและควบคุมโปรตีนเป้าหมายในการตอบสนองทางสรีรวิทยาต่อสิ่งกระตุ้นที่หลากหลายของพืช ในงานวิจัยนี้ผู้วิจัยได้ศึกษาโปรตีนรีคอมบิแนนท์ที่ทำให้บริสุทธิ์ของยีน Cam สามยีนและยีน Cam-like (CML) แปดยีนจากข้าว พบว่าโปรตีนทั้งหมดแสดงสมบัติ electrophoretic mobility shift ในภาวะที่มีแคลเซียม ในตรวจวัดการเปลี่ยนโครงรูปเมื่อจับแคลเซียมโดยวิธี CD spectroscopy และ fluorescence spectroscopy ของ ANS พบว่าโปรตีน OsCML แสดงลักษณะในเชิงโครงสร้างและหน้าที่ที่มีความหลายหลายทั้งในลักษณะที่เหมือนและที่แตกต่างจาก CaM การศึกษารูปแบบการแสดงออกของยีน OsCML เก้ายีนโดยวิธี real-time PCR ในข้าวพันธุ์ขาวดอกมะลิ 105 พบว่าภายใต้ภาวะความเครียดจากความเค็ม (150 mM NaCl) และความเครียดออสโมติก (20% PEG) การแสดงออกของยีน OsCML4 และ OsCML8 มีระดับสูงขึ้นอย่างชัดเจนตั้งแต่ 3 ชั่วโมงจนถึงอย่างน้อย 24 ชั่วโมงหลังจากได้รับความเครียด ขณะที่การแสดงออกของยีน OsCML5 และ OsCML11 ถูกกระตุ้นอย่างรวดเร็วที่ 1 และ 3 ชั่วโมงตามลำดับภายหลังจากได้รับความเครียดทั้งสองชนิด นอกจากนี้ยังพบการแสดงออกของยีน OsCML1 เพิ่มขึ้นที่ 1 ชั่วโมงหลังได้รับความเครียดจากความเค็มแต่ไม่เพิ่มขั้นเมื่อได้รับความเครียดออกโมติก ผลการทดลองนี้แสดงให้เห็นว่าผลิตภัณฑ์ของยีนเหล่านี้น่าจะมีหน้าที่สำคัญในการตอบสนองที่อาศัยแคลเซียมต่อความเครียดดังกล่าว นอกจากนี้ผู้วิจัยยังได้ค้นหา binding-protein ของ OsCaM1, OsCML3 และ OsCML3d โดยวิธี cDNA expression library screening พบโคลน cDNA ที่แตกต่างกันสำหรับโปรตีน OsCaM1 และ OsCML3d อย่างละเก้าชนิด และสำหรับโปรตีน OsCML3 อีกสองชนิด โดยพบว่ายีนเหล่านี้สร้างโปรตีนซึ่งเป็น CaM-binding protein ที่รู้จักมาก่อนสี่ชนิดคือ cyclic nucleotide-gated ion channel, glutamate decarboxylase, CaM-binding transcription activator และ kinesin motor domain-containing protein และยังพบ CaM/CML-binding protein ชนิดใหม่ซึ่งยังไม่เคยมีการค้นพบมาก่อนอีก 13 ชนิด จากผลการทดลองทั้งหมดแสดงให้เห็นว่า genetic polymorphism ช่วยส่งเสริมการเกิดความหลากหลายในหน้าที่ของกลุ่มโปรตีน OsCML ซึ่งมีสมาชิกที่น่าจะมีกลไกการทำงานที่ทั้งเหมือนและแตกต่างจากโปรตีน OsCaM ข้อมูลทั้งหมดเหล่านี้จะช่วยให้ทำให้การศึกษาหน้าที่ในระดับโมเลกุลและความสำคัญในเชิงสรีรวิทยาของโปรตีน OsCML ในการส่งผ่านสัญญาณควบคุมการตอบสนองต่อความเครียดจากสิ่งแวดล้อมและควบคุมความทนต่อความเครียดจากสิ่งแวดล้อมที่หลากหลายในข้าวได้ดียิ่งขึ้น |
| บรรณานุกรม | : |
ธีรพงษ์ บัวบูชา . (2555). ลักษณะสมบัติเชิงหน้าที่ของยีนกลุ่ม OsCML จากข้าว Oryza sativa L..
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. ธีรพงษ์ บัวบูชา . 2555. "ลักษณะสมบัติเชิงหน้าที่ของยีนกลุ่ม OsCML จากข้าว Oryza sativa L.".
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. ธีรพงษ์ บัวบูชา . "ลักษณะสมบัติเชิงหน้าที่ของยีนกลุ่ม OsCML จากข้าว Oryza sativa L.."
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2555. Print. ธีรพงษ์ บัวบูชา . ลักษณะสมบัติเชิงหน้าที่ของยีนกลุ่ม OsCML จากข้าว Oryza sativa L.. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2555.
|
