วัตถุประสงค์: เพื่อศึกษา 1) ระดับ Circulating tumor cells ระดับซีรั่ม MMP7 และ MMP9 สามารถใช้วินิจฉัยแยกโรคมะเร็งทางเดิน น้ำดี จากผู้ป่วยโรคทางเดินน้ำดีอุดตันที่ไม่ใช่มะเร็ง 2) Tumor marker ที่วัดจากเลือดผู้ป่วย ที่ดีที่สุดจากการศึกษาใน ข้อ 1 จะสามารถใช้วินิจฉัยแยกโรคมะเร็ง ทางเดินน้ำดี ในการศึกษาแบบไปข้างหน้า ในผู้ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดีอีกกลุ่ม 3) ระดับ CTCs สามารถใช้ทำนายอัตราการรอดชีวิตในผู้ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดีระยะลุกลามเพื่อเลือก การรักษาที่เหมาะสม วิธีทดลอง:! 1) วัดระดับ circulating tumor cells (CTCs) (โดยการวัดระดับ hTERT และ CK19 mRNA ในเม็ดเลือดขาว ชนิดเซลล์เดี่ยว) ซีรัม matrix metalloproteinase (MMP)-7 MMP-9 CEA และ CA19-9 ในเลือดผู้ป่วย โรคมะเร็งทางเดินน้ำดี และ ผู้ป่วยโรคทางเดินน้ำดีที่ไม่ใช่มะเร็ง วิเคราะห์ค่า ความแม่นยำในการวินิจฉัย 2) วัดระดับ Tumor markers ที่คัดเลือกได้จากการทดลองที่ 1 ในเลือดผู้ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดี และ ผู้ ป่วยโรคทางเดินน้ำดีที่ไม่ใช่มะเร็ง ทุกรายแบบไปข้างหน้า โดยผู้ป่วยในการศึกษานี้ไม่เกี่ยวกับการศึกษา ที่ 1 และนำผลที่ได้มาวิเคราะห์ค่า ความแม่นยำในการวินิจฉัย ความไว และความจำเพาะ 3) วัดระดับ circulating tumor cells (CTCs) ซีรัม matrix metalloproteinase (MMP)-7 และ CA19-9 ใน เลือดผู้ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดีระยะลุกลามที่จำเป็นต้องได้รับการรักษาด้วยการใส่ท่อน้ำดีเทียม นำ ค่าที่ได้มาวิเคราะห์หาปัจจัยทำนายการรอดชีวิต (prognostic values) ในผู้ป่วยกลุ่มนี้ ผลการทดลอง: 1) จากการวัดระดับ circulating tumor cells (CTCs) ซีรัม matrix metalloproteinase (MMP)-7 MMP-9 CEA และ CA19-9 พบว่ามีเพียง MMP7 เท่านั้นที่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ เมื่อเทียบระหว่างผู้ ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดี และ ผู้ป่วยโรคทางเดินน้ำดีที่ไม่ใช่มะเร็ง 2) ผู้วิจัยคัดเลือก MMP7 มาตรวจในผู้ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดี และ ผู้ป่วยโรคทางเดินน้ำดีที่ไม่ใช่มะเร็ง ทุกรายแบบไปข้างหน้า พบว่ามีความไว 75% และ ความจำเพาะ 78% (ค่า cut-off = 5.5 ng/ml) 3) ผู้ป่วยที่มีค่า CK19 mRNA ในเลือดเป็นบวก มีการรอดชีวิตต่ำกว่า ผู้ป่วยที่มีค่า CK19 mRNA ในเลือด เป็นลบ อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (p = 0.009) การวิเคราะห์แบบ multivariable analysis พบว่า CK19 mRNA ในเลือดเป็นบวก อายุผู้ป่วย และระดับบิลิรูบิน เป็นปัจจัยที่สัมพันธ์กับการรอดชีวิตของผู้ป่วย สรุปและวิจารณ์ผลการทดลอง: ระดับซีรัม MMP7 น่าจะเป็น tumor marker ที่ดีสำหรับผู้ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดี ในขณะที่ ระดับ CK19 mRNA สามารถใช้ทำนายการรอดชีวิตของผู้ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดีระยะลุกลามที่จำเป็นต้องได้รับการ รักษาด้วยการใส่ท่อน้ำดีเทียมได้ ควรมีการศึกษาชนิดไปข้างหน้าเพื่อทดสอบว่า ระดับ MMP7 และ CK19 mRNA มีผลต่อการช่วยตัดสินใจในการรักษาผู้ป่วยโรคมะเร็งทางเดินน้ำดีหรือไม่ Objectives 1) To determine whether the circulating tumor cells (CTCs), serum levels of matrix metalloproteinase (MMP)-7 and MMP-9 can discriminate cholangiocarcinoma patients from benign biliary tract disease patients, 2) To determine whether the best selected marker from objective 1 has the potential to diagnosis cholangiocarcinoma in an independent prospective-consecutive study and 3) To determine the role of CTCs in prediction of the overall survival of patients with advanced malignant biliary tract obstruction. Methods 1) We measured the level of CTCs (by examining two markers, cytokeratin (CK) 19 and human telomerase reverse transcriptase (hTERT) mRNA from peripheral blood-mononuclear cells (PBMC)), carcinoembryonic antigen (CEA), carbohydrate antigen 19-9 (CA19-9), MMP-7 and MMP-9 in the blood samples of 44 cholangiocarcinoma and 36 benign biliary tract diseases patients. 2) A total of 187 patients with obstructive jaundice were consecutively enrolled. After the diagnostic status of these patients was ascertained, their levels of selected marker were assayed. 3) We investigated the prognostic value of CTCs, in 40 patients diagnosed with advanced malignant biliary tract diseases. Results 1) Among the blood levels of CTCs, CEA, CA19-9, MMP-7 and MMP-9, only the serum MMP-7 levels were significantly higher in the patients with cholangiocarcinoma compared to benign biliary tract disease patients (p < 0.001). 2) The independent prospective study showed that the sensitivity and specificity of serum MMP7 for diagnosis cholangiocarcinoma was 75% and 78%, respectively, while the sensitivity and specificity of serum CA19-9 (cut-off value of 100 U/mL) was 68% and 87%, respectively. 3) Positive CK19 mRNA expression was significantly associated with worse overall survival (P =0.009). Multivariable analysis determined that positive CK19 mRNA expression, patient’s age and serum bilirubin was each independently associated with overall survival. Conclusion Serum MMP-7 appears to be a valuable diagnostic marker in the discrimination of cholangiocarcinoma from benign biliary tract disease. Positive CK19 mRNA levels in peripheral blood appear to provide a valuable marker to predict the overall survival of patients with advanced malignant biliary tract obstruction.