การศึกษาสารต้านจุลชีพของราเอ็นโดไฟต์ที่คัดเลือกมาสี่สายพันธุ์คือ Mycoleptodiscus sp., Alternaria sp., Fusarium sp. และ Emericella variecolor การเพาะเลี้ยงด้วยอาหาร yeast extract sucrose ราเอ็นโดไฟต์ Mycoleptodiscus sp., Alternaria sp., และ Fusarium sp. ผลิตสารต้านจุลชีพได้ดีที่สุด ส่วนการเพาะเลี้ยงด้วยอาหาร malt extract ราเอ็นโดไฟต์ Emericella variecolor เจริญได้ดีและผลิตสารต้านจุลชีพได้ สารต้านจุลชีพที่แยกได้จากราเอ็นโดไฟต์ Mycoleptodiscus sp. ประกอบด้วย cyclo(L-leucinyl-L-prolinyl), cyclo(L-alaninyl-L-tryptophanyl) และ (L-tryptophanyl-L-serinyl) จาก Alternaria sp. ประกอบด้วย cyclo(L-leucinyl-L-prolinyl), allantoin และ ergosterol peroxide และ จาก Fusarium sp. ประกอบด้วย bassiatin และ beauvericin การทดสอบฤทธิ์การยับยั้งจุลชีพด้วย broth dilution MIC assays และ 2-[4-iodophenyl]-3-[4-dinitrophenyl]-5-phenyltetrazolium chloride (INT) colorimetric assay พบว่า cyclo(L-Ala-L-Trp) ที่ความเข้มข้น 125 g/mL แสดงฤทธิ์การยับยั้งแบบฆ่าจุลชีพ E. coli และ P. aeroginosa และแบบหยุดการเจริญเติบโตสำหรับ C. albicans ส่วน cyclo(L-Leu-L-Pro) แสดงฤทธิ์การยับยั้งแบบฆ่าจุลชีพ B. subtilis, S. aureus, E. coli และ P. aeroginosa ที่ความเข้มข้น 50 g/mL และ แสดงฤทธิ์การยับยั้งแบบฆ่าจุลชีพและแบบหยุดการเจริญเติบโตสำหรับ C. albicans ที่ความเข้มข้น 50 g/mLและ 25 g/mL ตามลำดับ ขณะที่สารสังเคราะห์แสดงฤทธิ์การยับยั้ง C. albicans แบบหยุดการเจริญเติบโตเท่านั้น ergosterol peroxide มีฤทธิ์ยับยั้ง B. subtilis ATCC 6633, E. coli ATCC 25922 และ C. albicans ATCC 10231 ได้แบบหยุดการเจริญเติบโตที่ค่า MIC 7.82 µg/ml (23.84 µM), 31.25 µg/ml (95.27 µM), และ 62.5 µg/ml (190.55 µM) ตามลำดับ bassiatin มีฤทธิ์ยับยั้งแบบฆ่าจุลชีพ E. coli และ P. acnes ที่ค่า MBC 250 และ 500 µg/ml ตามลำดับ ขณะที่ beauvericin มีฤทธิ์ยับยั้งแบบฆ่าจุลชีพ E. coli ที่ค่า MBC 250 µg/ml การแยกสารเมแทบอไลท์ของ Emericella variecolor ไม่ได้สารต้านจุลชีพโดยการทดสอบด้วย broth dilution MIC assays ที่ความเข้มข้น 250 g/ml แต่ได้สารใหม่ สองชนิด emervaridione และ varioxiranediol และได้สารที่มีรายงานแล้วก่อนหน้าอีกสามชนิด คือ stellatic acid, ergosterol และ dihydroterrein ส่วนการเพาะเลี้ยงในอาหาร MEB ที่มีปริมาณมอลท์ต่ำ แยกได้ xanthone 4 ชนิด และ terrein จากการศึกษาสารต้านจุลชีพของราเอ็นโดไฟต์สี่สายพันธุ์ น้ำเลี้ยงและ/หรือสารสกัดหยาบน้ำเลี้ยงและเส้นใยราแสดงฤทธิ์ต้านจุลชีพที่ดีกว่าสารต้านจุลชีพเดี่ยวๆที่แยกได้ ไม่ว่าจะใช้เทคนิคทางโครมาโทกราฟีที่ตัวดูดซับเป็นชนิดซิลิกา หรือ Sephadex LH20 หรือ reverse phase ก็จะไม่สามารถแยกได้สารออกฤทธิ์ต้านจุลชีพเดี่ยวๆที่มีประสิทธิภาพสูงออกมาได้ อย่างไรก็ดีได้พบข้อสังเกตอย่างหนึ่งว่าราใดที่น้ำเลี้ยงและ/หรือสารสกัดหยาบของราแสดงฤทธิ์การต้านจุลชีพที่ดี รานั้นจะผลิตสารเมแทบอไลท์ที่เป็น nucleotide base เช่น uracil และ thymine ร่วมอยู่ด้วย และพบว่า ราชอบที่จะผลิต uracil มากกว่า thymine และ uracil ที่ผลิตขึ้นจะมีอยู่ในปริมาณมาก Antimicrobial metabolites of four selected endophytic fungi including Mycoleptodiscus sp., Alternaria sp., Fusarium sp. and Emericella variecolor were investigated. The Mycoleptodiscus sp., Alternaria sp., and Fusarium sp. cultured in yeast extract sucrose media provided antimicrobial metabolites higher than other media while Emericella variecolor cultured in MEB provided high amount of cell mass and could produce antimicrobial metabolites. Antimicrobial metabolites isolated from Mycoleptodiscus sp. were comprised of cyclo(L-leucinyl-L-prolinyl), cyclo(L-alaninyl-L-tryptophanyl) and (L-tryptophanyl-L-serinyl). Antimicrobial metabolites isolated from Alternaria sp. were comprised of cyclo(L-leucinyl-L-prolinyl), allantoin and ergosterol peroxide. Antimicrobial metabolites isolated from Fusarium sp. were comprised of bassiatin and beauvericin. Antimicrobial activity of those compounds were determined by broth dilution MIC assays and 2-[4-iodophenyl]-3-[4-dinitrophenyl]-5-phenyltetrazolium chloride (INT) colorimetric assay. The isolated cyclo(L-Ala-L-Trp) exhibited antimicrobial activity against E. coli and P. aeroginosa with minimal bactericidal concentration (MBC) value of 125 g/mL and against C. albicans with minimal inhibition concentration (MIC) value of 125 g/mL while the isolated cyclo(L-Leu-L-Pro) exhibited antimicrobial activity against Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa with MBC value of 50 g/mL and against C. albicans with MIC values of 50 and 25 g/mL, respectively. In addition antimicrobial activity of synthetic cyclo(L-Leu-L-Pro), cyclo(Ala-Tryp) and cyclo(Tryp-Ser) were also determined. It was found that the syhthetic cyclic dipeptides in D,D and L,L series exhibited only inhibitory activity against Candida albicans. Ergosterol peroxide exhibited antimicrobial activity against B. subtilis, E. coli and C. albicans with MIC values of 7.82 µg/ml (23.84 µM), 31.25 µg/ml (95.27 µM), and 62.5 µg/ml (190.55 µM), respectively. Bassiatin exhibited antimicrobial activity against E. coli และ Propionibacterium acnes with MBC value of 250 และ 500 µg/ml), respectively while beauvericin exhibited antimicrobial activity against E. coli with MBC value of 250 µg/ml. Isolation of Emericella variecolor metabolites cultured in MEB gave two new metabolites, named emervaridione and varioxiranediol, and three known compounds, stellatic acid, ergosterol and dihydroterrein while four xanthones and terrein were isolated form the culture in lower malt media. By broth dilution MIC assays at 250 g/ml all of the isolated metabolites from E. variecolor was inactive. In the course of our investigations we found that culture broth and crude extract of broth and of mycelia displayed higher antimicrobial activity than the singly isolated compound. Attempts to isolate compounds with high activity using silicagel, Sephadex LH20 or reverse phase as absorbent was unsuccessful. However, we discovered that the endophytic fungi, which their broth or crude extract displayed high antimicrobial activity, also produced nucleotide base, uracil and/or thymine, and uracil was mainly found.