CD147 มีบทบาทเกี่ยวข้องกับกระบวนการเปลี่ยนแปลงทางด้านสรีรและพยาธิสภาพของเซลล์ กระบวนการส่งสัญญาณเข้าสู่เซลล์ และยังมีบทบาทที่สำคัญเกี่ยวข้องกับการลุกลามและแพร่กระจายของเซลล์มะเร็ง ดังนั้นการลดการแสดงออกของโมเลกุล CD147 อาจมีประโยชน์ต่อการยับยั้งความก้าวหน้าในการเจริญของเซลล์มะเร็ง ในการศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อสร้างและศึกษาคุณสมบัติของ scFv-M6-1B9 แอนติบอดีต่อ CD147 โดยใช้เฟจดิสเพลย์เทคโนโลยีมาประยุกต์ใช้ในการสร้างแอนติบอดีต่อ CD147 จากนั้นได้ทำการสร้าง scFv-M6-1B9 แอนติบอดีต่อ CD147 ให้มีการแสดงออกและยังคงทำหน้าที่อยู่ภายในระบบของเอนโดพลาสมิกเรติคูลั่มโดยใช้ระบบการนำส่งยีน ด้วยอะดิโนไวรัส และได้ประเมินคุณสมบัติทางชีวภาพ หน้าที่ และผลของ scFv-M6-1B9 ต่อการแสดงออกของ CD147 จากการศึกษาพบว่ารีคอมบิแนนท์ Fab- และ scFv- M6-1B9 แอนติบอดีต่อCD147 สามารถจับได้อย่างจำเพาะกับรีคอมบิแนนท์ CD147-BCCP ด้วยวิธี indirect ELISA และเมื่อทำการศึกษาหน้าที่ของ scFv M6-1B9 แอนติบอดีที่อยู่ในรูปสารละลายที่ผลิตจากแบคทีเรีย E. coli HB2151 พบว่ามีความสามารถในการจับกับ CD147 ที่แสดงออกบนผิวเซลล์ U937 และยับยั้งการแบ่งตัวของเม็ดเลือดขาวชนิดทีเซลล์เมื่อถูกกระตุ้นร่วมกับ OKT3 แอนติบอดี นอกจากนั้นแล้ว scFv M6-1B9 แอนติบอดีที่ได้จากการแตกเซลล์ 293A ที่ถูก transduced ด้วยอะดิโนไวรัสที่กำหนดการสร้าง scFv M6-1B9 แอนติบอดีสามารถจับกับ CD147 ได้ทั้งในรูปแบบที่พบตามธรรมชาติและรูปแบบรีคอมบิแนนท์ที่สร้างขึ้น ซึ่งบ่งชี้ถึงความมีประสิทธิภาพและความจำเพาะอย่างสูงในการจับกับแอนติเจน ที่สำคัญอย่างยิ่งคือ scFv M6-1B9 อินทราบอดีได้แสดงให้เห็นถึงความมีคุณสมบัติทางชีวภาพที่ดี โดยสามารถลดการแสดงออกของ CD147 ที่ผิวของเซลล์ 293A, Jurkat และ HeLa ได้ จากการศึกษาในครั้งนี้แสดงให้เห็นว่า scFv M6-1B9 มีศักยภาพที่ดีในการจับกับ CD147 ทั้งภายในและภายนอกเซลล์ ซึ่งจะช่วยทำให้เข้าใจบทบาทและหน้าที่ของ CD147 มากขึ้นและอาจใช้ในการพัฒนาวิธีการรักษามะเร็งชนิดแพร่กระจายรูปแบบใหม่ได้ในอนาคต CD147 involves in signal transduction pathways and also plays a crucial role in the invasive and metastatic activity of malignant tumor cells. Diminished expression of this molecule has been shown to be beneficial in suppression of tumor progression. In this study, we aimed to generate and characterize a recombinant antibody fragment, scFv, which reacted specifically to CD147. Phage display technology was introduced to generate the functional antibody fragment to CD147, and we subsequently constructed a CD147-specific scFv that was expressed intracellularly and retained in the endoplasmic reticulum by adenoviral gene transfer. The biological properties, function and the effect of generated scFv on CD147 expression were investigated. The result showed that recombinant antibody fragments, Fab and scFv, of the murine monoclonal antibody (clone M6-1B9) reacted specifically to CD147 by indirect ELISA using a recombinant CD147-BCCP as a target. We further studied the function of soluble scFv-M6-1B9 produced from E. coli HB2151. The results demonstrated that it was able to bind with CD147 surface molecule of U937 and inhibited OKT3-induced T cell proliferation. Furthermore, soluble lysate of scFv-M6-1B9 from 293A cells, transduced with a scFv-M6-1B9 expressing adenovirus vector, recognized both recombinant and native CD147. These results indicate that scFv-M6-1B9 binds with high efficiency and specificity. Importantly, scFv-M6-1B9 intrabody reduced the expression of CD147 on the cell surface of 293A, Jurkat and HeLa cells, suggesting that scFv-M6-1B9 is biologically active intrabody. In conclusion, our present study demonstrated that scFv-M6-1B9 has a great potential to target both the intracellular and the extracellular CD147. This study represents a step toward understanding the role of the CD147 cell surface protein and may aid in efforts to develop a novel treatment for a variety of metastatic tumors in the near future.