สารพิษไมโครซิสตินเป็นสารพิษนี้สร้างโดยไซยาโนแบทีเรียสกุล Microcystis ที่พบใน แหล่งน้ำต่างๆทั่วประเทศไทย มีความเป็นพิษสูงต่อเนื้อเยื่อตับและกระตุ้นให้เกิดเนื้องอกซึ่งอาจ พัฒนาไปเป็นเซลล์มะเร็ง วิธีวิเคราะห์สารพิษนี้ส่วนใหญ่ใช้ HPLC ซึ่งมีระดับความไวไม่เพียง พอที่จะใช้ในการหาปริมาณในระดับที่เป็นอันตรายที่กำหนดโดยองค์การอนามัยโลก (1 ppb) โครงการวิจัยนี้เป็นโครงการต่อเนื่องจากโครงการพัฒนาชุดตรวจสอบ ELISA kit ต้นแบบสำหรับ การตรวจหาสารพิษไมโคตรซิสตินในน้ำ ที่ได้รับการสนับสนุนจากสำนักงานสนับสนุนกองทุนการวิจัย ระหว่างปี พ.ศ. 2545-2548 จนได้ชุดต้นแบบสำหรับตรวจหาสารพิษไมโคตรซิสตินในน้ำได้สำเร็จ โดยสามารตรวจวัดปริมาณสารพิษได้ในระดับ 0.2 ppb โดยต้องการเครื่องอ่านค่า ELISA Reader และสามารถตรวจวัดในระดับ 0.5 ppb โดยจะเห็นความแตกต่างด้วยตาเปล่า ซึ่งทั้งสองระดับนี้ต่ำ กว่าเกณฑ์มาตรฐานที่กำหนดโดยองค์การอนามัยโลกที่ระดับไม่เกิน 1 ppb วัตถุประสงค์ของ โครงการ มีดังนี้ 1. เพื่อทดสอบประสิทธิภาพ ความแม่นยำ และข้อจำกัดการใช้งานของชุดตรวจสอบ ELISA kit ในการตรวจหาสารพิษไมโครซิสติน 2. เพื่อผลิตชุดตรวจสอบ ELISA kit สำหรับตรวจหาสารพิษไมโครซิสตินเชิงพาณิชย์ ซึ่งผลจากการวิจัยสามารถผลิตชุดตรวจสอบ ELISA kit ที่สามารถนำไปใช้ในการตรวจวัด ปริมาณสารพิษไมโครซิสตินในตัวอย่างแหล่งน้ำธรรมชาติได้โดยตรง โดยประสิทธิภาพในการ ตรวจวัดมีความไวสูงกว่าวิธีการดั้งเดิมที่ใช้ HPLC เป็นวิธีมาตรฐาน เนื่องจากสามารถทำการ วิเคราะห์ตัวอย่างน้ำได้โดยตรง (ไม่จำเป็นต้องสกัดสารพิษจากตัวอย่างปริมาณมากเหมือน HPLC) จึงสามารถใช้ในการเฝ้าระวังการปนเปื้อนของสารพิษในแหล่งน้ำต่างๆ นอกจากนี้ชุดตรวจสอบนี้ยัง สามารถใช้ตรวจวัดสารพิษไมโครซิสตินได้ผลเป็นอย่างดี ในตัวอย่างน้ำที่มี pH อยู่ในช่วง 5.5-7.5 มีระดับความเข้มข้นของเกลือโซเดียมคลอไรด์ไม่เกิน 100 mM หรือ 10 ppt ระดับความเข้มข้นของ เกลือแคลเซียมไม่เกิน 100 mM ระดับความเข้มข้นของเหล็กในรูปออกซิไดซ์ไม่เกิน 10 mM และ คลอรีนและฟลูออดไรด์ในระดับปกติไม่มีผลต่อประสิทธิภาพชุดตรวจสอบ ชุดตรวจสอบ ELISA kit นี้ควรบรรจุในถุงพลาสติกภายใต้บรรยากาศไนโตรเจน แล้วเก็บ ไว้ในตู้เย็นที่ 4 องศาเซลเซียส (รวมทั้งน้ำยาอื่นๆ) จะทำให้รักษาประสิทธิภาพของชุด ตรวจสอบได้นาน 6 เดือน เมื่อนำชุดตรวจสอบนี้ไปประเมินระดับของสารพิษไมโครซิสตินในตัวอย่างน้ำจากระบบ การผลิตน้ำประปาพบว่าสามารถใช้งานได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งสามารถยืนยันผลจากการ วิเคราะห์ด้วย LC/MS Microcystin is hepatotoxic compound that leads to tumor and could develop to cancer cell. It is produced by a cyanobacteria, Microcystis., that commonly found in freshwater resources of Thailand. HPLC is the only standard method that used in analysis of this compound, but the sensitivity of the method is insufficient to detect the toxin at the level 1 of ppb which is the guideline recommended in drinking water issued by WHO. This research is the extension of the previous project, Development of ELISA KIT prototype for Rapid Detection of Microcystin inWater, funded by Thailand Research fund in 2002-2004 The kit could detect toxin at the level as low as 0.2 ppb (by ELISA Reader) or at the level of 0.5 ppb (by naked eye). Both levels were far below sfety limit recommended by World Health Organization at 1 ppb. The objectives of this project are: 1. To test the efficiency, accurary and limitation of applying the ELISA kit in detection of microcystin, 2. To produce the ELISA kit for commercial applications. Results revealed that the ELISA kit could detect microcystin in natural water samples with relatively accurate. The efficiency was much better that HPLC as far as the sensitivity was concerned due to it ability to analyze sample directly without pre- concentration as in the case of HPLC. Therefore, this kit could be use in monitoring of toxin contamination in water resources. This kit could analyze samples in the pH range of 5.5-7.5, sodium chloride concentrations less than 100 mM or 10 ppt , calcium salts concentrations less than 100 mM, iron concentration less than 10 mM and chlorine and fluoride at normal levels did not affect the efficiency of the kit. This ELISA kit should be packed under nitrogen atmosphere and stored in a refrigerator at 4 ํC. A this condition the shelf-life could be extended upto 6 months. When the ELISA kit was tested against water samples collected from tap water production systems, the results were satisfactory as confirmed by LC/MS