| ชื่อเรื่อง | : | การคัดเลือกและผลิตจุลินทรีย์น้ำเค็ม Schizochytrium sp. เพื่อใช้เป็นแหล่ง DHA สำหรับการเพาะเลี้ยงลูกกุ้ง |
| นักวิจัย | : | วิเชียร ยงมานิตชัย |
| คำค้น | : | การเพาะเลี้ยงลูกกุ้ง , จุลินทรีย์น้ำเค็ม |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2552 |
| อ้างอิง | : | http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=RDG4920049 , http://research.trf.or.th/node/2745 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | การคัดแยก Schizochytrium sp. จากตัวอย่างที่เก็บจากป่าชายเลน 2 ครั้ง สามารถ รวบรวมได้ทั้งหมด 580 ไอโซเลท ประกอบด้วย 174 ไอโซเลท แยกจากป่าชายเลนฝั่งอ่าวไทย และ 406 ไอโซเลท แยกจากตัวอย่างที่เก็บจากป่าชายเลน จังหวัดชายฝั่งทะเลอันดามัน จาก การคัดเลือกในรอบแรกพบว่ามี 36 ไอโซเลท ได้แก่ PTI1-13, PTI1-15, PTI1-27, PTI2-08, PTI2-13, PTI2-16, PTI2-20, PTI2-33, PTI-3-04, PTI3-26, PTI3-27, PTI3-29, PTI3-33, PTI3-36, TM1-14, TM1-15, TM2-31, TM3-30, TM4-16, KKN-5, BPU-3, ASR-1, BPS-5, BPS-7, PPJ-5, PPJ-10, BTB-4, BTB-7, BTB-10, BTB-11, BTB-17, BTB-20, BTB-25, PBR-3, MCCP-23 และ MCCP-26 ที่มีปริมาณ DHA สูงกว่า 25% ของกรดไขมันทั้งหมด และ เมื่อนำทั้ง 36 ไอโซเลท ไปทำการคัดเลือกกรอบสองและสาม พบว่าไอโซเลท BTB-10 ปริมาณ ของ DHA ในเซลล์สูงที่สุด ที่ 30.7% ของกรดไขมันทั้งหมด จึงได้คัดเลือกสายพันธุ์นี้ไว้ศึกษาหา สภาวะที่เหมาะสมในการเพาะเลี้ยงต่อไป การศึกษาองค์ประกอบอาหารที่เหมาะสมต่อการเจริญและการสร้างกรดไขมัน DHA ของ BTB-10 พบว่าปริมาณและแหล่งคาร์บอนที่เหมาะสมได้แก่น้ำตาลกลูโคสที่ความเข้มข้น 4% สำหรับแหล่งไนโตรเจนประกอบด้วยยีสต์สกัด 0.5% เป็ปโตน 0.5% และmonosodium glutamate 0.67% ระดับความเค็มเท่ากับน้ำทะเลที่ 30 ppt และอุณหภูมิที่เหมาะสมอยู่ที่ 30 องศาเซลเซียส โดยในสภาวะนี้เมื่อทำการเพาะเลี้ยงในฟลาสก์จะได้มวลเซลล์ประมาณ 15 กรัม ต่อลิตร และ DHA ประมาณ 5-6 กรัมต่อลิตร คิดเป็นสัดส่วนของ DHA ประมาณ 35-40% ของกรดไขมันทั้งหมด อย่างไรก็ตามเมื่อนำสภาวะนี้ไปใช้กับถังหมักขนาด 100 ลิตร พบว่า ปริมาณเซลล์ที่ได้สูงขึ้นเล็กน้อยที่ 19 กรัมต่อลิตร แต่ปริมาณ DHA ที่สะสมกลับลดลง ค่อนข้างมากอยู่ที่ประมาณ 3.6 กรัมต่อลิตร การทดลอง Schizochytrium sp. BTB-10 ไปใช้ในการอนุบาลลูกกุ้งขาวแวนนาไม (Litopenaeus vannamei, Boone) ตั้งแต่ระยะซูเอี้ย 1 ถึงระยะซูเอี้ย 3 โดยการทดแทนและ เสริมคีโตเซอรอส (Chaetoceros sp.) ต่างกัน 3 ระดับคือ คีโตเซอรอสและจุลินทรีย์น้ำเค็ม อัตราส่วน 50 Schizochytrium sp. BTB-10 และคีโตเซอรอส 100% เสริมด้วย Schizochytrium sp. BTB-10 25% (ชุดการทดลองที่ 1, 2 และ 3 ตามลำดับ) เปรียบเทียบกับกลุ่มที่ให้คีโตเซอรอส 100% (วิธีปกติ) และอนุบาลด้วยอาร์ทีเมียตั้งแต่ระยะไมซีส 1 ถึงระยะโพสต์ลาวา 15 พบว่าที่ระยะไมซิส 1 ชุดการทดลองที่อนุบาลด้วยคีโตเซอรอส 100% เสริมด้วย Schizochytrium sp. BTB-10 25% มีอัตรารอดสูงที่สุดที่ 89.81?0.69%ซึ่งสูงกว่าชุดควบคุม อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) และที่ระยะโพสต์ลาวา 1 ชุดการทดลองที่ให้คีโตเซอรอส 50% และ Schizochytrium sp. BTB-10 50% มีอัตรารอดสูงสุดคือ 67.31?1.10 % ซึ่งสูงกว่าชุด ควบคุมอย่งมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) แต่ที่ระยะโพสต์ลาวา 15 ไม่พบความแตกต่างทาง สถิติของอัตรารอด (P>0.05) การเปรียบเทียบอัตราการเจริญเติบโตพบว่าไม่มีความแตกต่าง ทางสถิติระหว่างทุกชุดทดลองและชุดควบคุมในด้านความยาวของลูกกุ้งในระยะโพสต์ลาวา 1 7 และ 15 และระยะของลูกกุ้งระยะโพสต์ลาวา 15 (P>0.05) การทดสอบความทนทานต่อ ความเครียดโดยการแช่ฟอร์มาลิน 200 ppm นาน 24 ชั่วโมง พบว่าชุดการทดลองที่ได้รับคีโต เซอรอส 100% เสริม Schizochytrium sp. BTB-10 25% มีอัตราการตายสะสมต่ำที่สุดคือ 63.22?15.16% ซึ่งต่ำกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) การลดความเค็มจาก 30 ppt เหลือ 5ppt พบว่าชุดการทดลองที่ให้คีโตเซอรอส 75% และ Schizochytrium sp. BTB- 10 25% มีอัตราการตายสะสมต่ำที่สุดคือ 24.33?5.86% และต่ำกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมี นัยสำคัญทางสถิติ (P<0.05) ความต้านทานต่อเชื้อ Vibrio harveyi ไม่พบความแตกต่างของ อัตราการตายสะสมตลอดช่วงการทดลอง (P>0.05) การทดลองนี้แสดงถึงศักยภาพของการใช้ จุลินทรีย์น้ำเค็ม Schizochytrium sp. ในการอนุบาลลูกกุ้งทะเลในลักษณะการทดแทนบางส่วน หรือการเสริมการใช้คีโตเซอรอส การทดลองอนุบาลลูกกุ้งด้วยการเสริม Schizochytrium sp. BTB-10 ในฟาร์มของ เอกชนพบว่าความหนาแน่นของลูกกุ้งในบ่อเพาะฟักมีความสำคัญ การปล่อยลูกกุ้งในอัตรา 1,500,000 ตัวต่อบ่อขนาด 5 ตัน มีผลต่ออัตราการรอดเพิ่มขึ้นอย่างชัดเจนจาก 26% เป็น 71% ซึ่งสอดคล้องกับผลการทดลองในระดับห้องปฏิบัติการ ความยาวของลูกกุ้งมีความแตกต่าง อย่างเห็นได้ชัดในทุกระยะ post larva รวมทั้งเวลาที่ใช้ในการพัฒนาระยะของลูกกุ้งก็สั้นลง จึง อาจสรุปได้ว่าการเสริมอาหารให้ลูกกุ้งด้วย Schizochytrium sp. BTB-10 ทำให้อัตราการรอด ของลูกกุ้งเพิ่มขึ้นเกือบ 3 เท่า ลูกกุ้งมีขนาดใหญ่ขึ้นช่วยลดการแตกขนาดของลูกกุ้ง ส่งผลให้ การพัฒนาระยะของลูกกุ้งสมบูรณ์และเร็วขึ้น จากการสังเกตพบว่าลูกกุ้งในบ่อทดลองกินอาหาร เพิ่มมากขึ้น จังจะเห็นได้จากขนาดของกุ้ง การเจริญเติบโตดีขึ้น และสุขภาพโดยรวมของกุ้ง แข็งแรงมากขึ้น Isolation of marine microalgae, Schizochytrium sp., from samples collected yielded the total of 580 isolates, including 174 isolates from samples collected from mangrove forests in the Gulf of Thailand and 406 isolates from samples obtained from mangrove forests in Andaman Sea. Primary screening of the isolates for strain that could produce DHA 25% or more of total fatty acids resulted in 36 isolates that met the criterion. They were PTI1-13, PTI1-15, PTI1-27, PTI2-08, PTI2-13, PTI2-16, PTI2-20, PTI2-33, PTI-3-04, PTI3-26, PTI3-27, PTI3-29, PTI3-33, PTI3-36, TM1-14, TM1-15, TM2-31, TM3-30, TM4-16, KKN-5, BPU-3, ASR-1, BPS-5, BPS-7, PPJ-5, PPJ-10, BTB- 4, BTB-7, BTB-10, BTB-11, BTB-17, BTB-20, BTB-25, PBR-3, MCCP-23 % MCCP-26. Secondary and tertiary screening of the 36 isolates revealed that BTB-10 accumulated largest amounts of DHA in their cells at the level of 30.7 % of total fatty acids, respectively. Therefore, this strain was selected for further studies on optimization of culture conditions. Optimization of medium composition for growth and DHA production by Schizochytrium sp. BTB-10 revealed that glucose concentration at 4% was the most favorable carbon source while 0.5% yeast extract, 0.5% peptone and 0.67% monosodium glutamate was the optimal combined nitrogen source. Salinity at 30 ppt and temperature at 30 C provided good growth. Cultivation in 500 ml Erlenmeyer flasks under these conditions yielded 15 g/L of biomass and 5 -6 g/L of DHA which constituted about 35 – 40% of total fatty acids. However, when these conditions were applied in 100 liter fermentor cell mass increased slightly to 19 g/L but DHA content was considerably lower to 3.6 g/L. Application of the microalga Schizochytrium sp. BTB-10 during zoea stage 1 to stage 3 of Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei Boone) as a partial replacement and supplementation of Chaetoceros sp., i.e., Treatment 1 - 50% Chaetoceros sp. + 50% Schizochytrium sp. BTB-10, Treatment 2 - 75% Chaetoceros + 25% Schizochytrium sp. BTB-10 and Treatment 3 - 100% Chaetoceros sp. + 25% Schizochytrium sp. BTB-10 compared with control (only Chaetoceros) was studied. The survival rate of mysis 1 was highest in Treatment 3 at 89.81?0.69% which was significantly different from control (P<0.05). For postlarva 1 (PL1), the highest survival rate was found in Treatment 1 at 67.31?1.10% which was significantly different from the control (P<0.05). However, no significant difference of survival rates were found at PL15 stage (P<0.05). For the growth rate, there was no significant difference amongst the length of PL1, PL7 and PL15 and weight of PL15 (P<0.05). Study on stress tolerance of PL15 by immersion in 200 ppm formalin for 24 hrs indicated significant difference of mortality rate (P<0.05) in which treatment 3 showed the lowest mortality rate at 63.22?15.16%. Salinity change from 30 to 5 ppt also caused significant difference of mortality rate (P<0.05) which Treatment 2 had the lowest value at 24.33?5.86%. However, disease resistance against pathogenic bacteria, Vibrio harveyi, were not significantly different (P<0.05). This study clearly indicates the benefits of microalgae Schizochytrium sp. BTB-10 as a potential feed for the nursing of marine shrimp larva. Experiment trial of supplementary feeding of Schizochytrium sp. BTB-10 in a private hatchery showed that larval density was vital to the success of shrimp development. At lower density of 1,500,000 larva/ 5 tons pond, the survival rate was increased abruptly from 26% to 71% which was coincided with laboratory experiment. The length of larva also obviously improved in every post larval stage. Time requires for each development stage was also shorten noticeably. In conclusion, supplementary feed of Schizochytrium sp. BTB-10 in nursing white pacific shrimp larvae improved survival rates almost three times as compared to control. Size of post larva were significantly longer resulted in shorten time for development stages. By observation shrimp larvae received Schizochytrium sp. BTB-10 consumed more feed as clearly seen from increase in body length, better growth and better health conditions. |
| บรรณานุกรม | : |
วิเชียร ยงมานิตชัย . (2552). การคัดเลือกและผลิตจุลินทรีย์น้ำเค็ม Schizochytrium sp. เพื่อใช้เป็นแหล่ง DHA สำหรับการเพาะเลี้ยงลูกกุ้ง.
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. วิเชียร ยงมานิตชัย . 2552. "การคัดเลือกและผลิตจุลินทรีย์น้ำเค็ม Schizochytrium sp. เพื่อใช้เป็นแหล่ง DHA สำหรับการเพาะเลี้ยงลูกกุ้ง".
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. วิเชียร ยงมานิตชัย . "การคัดเลือกและผลิตจุลินทรีย์น้ำเค็ม Schizochytrium sp. เพื่อใช้เป็นแหล่ง DHA สำหรับการเพาะเลี้ยงลูกกุ้ง."
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2552. Print. วิเชียร ยงมานิตชัย . การคัดเลือกและผลิตจุลินทรีย์น้ำเค็ม Schizochytrium sp. เพื่อใช้เป็นแหล่ง DHA สำหรับการเพาะเลี้ยงลูกกุ้ง. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2552.
|
