ในงานวิจัยนี้มีจุดประสงค์หลักเพื่อพัฒนาระบบสารละลายน้ำสองวัฏภาคที่มีองค์ประกอบของโพลี-เอททิลีนไกลคอล (PEG) กับโพแทสเซียมฟอสเฟตสำหรับการสกัดแอลคาไลน์โพรทีเอสโดยศึกษาภาวะที่เหมาะสมในการเกิดการแยกวัฏภาคและการสกัดแอลคาไลน์โพรทีเอสด้วยระบบสารละลายน้ำสองวัฎภาคดังกล่าว ทำการศึกษาการแยกอแลคาไลน์โพรทีเอสจาก Bacillus subtilisNS 99 ในระบบสารละลายน้ำ สองวัฏภาคของ PEG ที่มีน้ำหนักโมเลกุลเท่ากับ1000 กับโพแทสเซียมฟอสเฟต (K2HPO4 และ KH2PO4 ) ที่อุณหภูมิห้อง (30(2 องศาเซลเซียส) และความดันบรรยากาศ ซึ่งในวัฏภาคบนจะมี PEG อยู่ในปริมาณมาก ส่วนในวัฏภาคล่างจะมีฟอสเฟตอยู่มาก โดยศึกษาอิทธิพลจากปัจจัยต่าง ๆ เช่น ค่าความเป็นกรด-ด่างของระบบ (pH), ความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์และความยาของเส้นผูกที่มีต่อลักษณะของแผนภาพวัฏภาคและค่าสัมประสิทธิ์การแยก (K) ในช่วงความเข้มข้นเริ่มต้นของ PEG 1000 เท่ากับ 5-70 %(w/w),ที่ pH 4 ค่าคือ 7.5, 8.5, 9.5 และ 10.5 และความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ที่ 0, 4, 7 และ 10%(w/w) พบว่า pH มีผลน้อยมา กหรือไม่มีผลต่อการแยกวัฏภาค ในขณะที่การเพิ่มความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์จะไปลดความเข้มข้น ของPEG1000 และ/หรือ โพแทสเซียมฟอสเฟตที่ต้องการใช้ในการเกิดการแยกวัฎภาคส่วนค่า K ของแอลคาไลน์โพรทีเอสพบว่าจะเพิ่มขึ้นเมื่อเพิ่ม pH แต่จะลดลงเมื่อเพิ่มความยาวของเส้นผูกและความเข้มข้นข อง โซเดียมคลอไรด์ ภาวะที่เหมาะสมที่สุดต่อการสกัดแอลคาไลน์โพรทีเอสในช่วงที่ทำการทดลองนี้คือ ระบบที่ ประกอบด้วย PEG1000 18.00 %(w/w)), โพแทสเซียมฟอสเฟต 13.01 %(w/w)และโซเดียมคลอไรด์ 0%(W/w) ที่ pH 9.5, อุณหภูมิห้อง (30 ( 2 องศาเซลเซียส)และความดันบรรยากาศ ซึ่งให้ค่า K เท่ากับ 20.0 และให้ค่าเปอร์เซ็นต์ผลได้เท่ากับ 95.1.