| ชื่อเรื่อง | : | การศึกษาขั้นต้นของการวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง methyl parathion |
| นักวิจัย | : | เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , บุญศรี จงเสรีจิตต์ , Jesdawan Wichitwechkarn , Boonsri Jongsereejit |
| คำค้น | : | Biochemistry , Biological sciences , Biology and biochemistry , BT-B-06-2D-16-Z01 , Methylparathion , Pseudomonas sp. , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ , สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา , เมททิลพาราไทออน , เมททิลพาราไทออนไฮโดรเลส , เมทิลพาราไธออน |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2543 |
| อ้างอิง | : | http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/22882 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ปัจจุบัน มีการค้นพบเชื้อจุลินทรีย์ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลงในกลุ่ม organo-phosphate มากมาย รวมทั้ง methyl parathion ซึ่งเป็นที่นิยมใช้กันอย่างแพร่หลายทั้งในประเทศไทยและต่างประเทศ และมีรายงานการตกค้างในสิ่งแวดล้อม อย่างไรก็ตาม มีเชื้อที่ย่อยสลายยาฆ่าแมลงในกลุ่ม organo phos phate เพียงไม่กี่ชนิดที่ได้รับการศึกษาต่อในระดับอณูชีววิทยา โดยมีการ identify และ characterize ยีนอยู่เพียงไม่กี่ยีน และยังไม่มีการ identify, characterize, และ clone ยีนที่เกี่ยวข้องกับการย่อยสลาย methyl parathion เลย สำหรับเชื้อ Pseudomonas sp. ตัวหนึ่งที่แยกได้ในประเทศไทย ซึ่งพบว่าสามารถใช้ methyl parathion เป็นแหล่งคาร์บอนเพียงแหล่งเดียว โดยย่อยสลายได้ p-nitrophenol และสามารถย่อยสลาย p-nitrophenol ต่อได้นั้น จากการศึกษาขั้นต้นพบว่า methyl parathion hydrolase gene ของเชื้อตัวนี้แตกต่างจากยีนที่เกี่ยวข้องกับการย่อยสลายยาฆ่าแมลงกลุ่ม organophosphate บางตัวที่เคยมีการรายงานมา นอกจากนี้ยังพบว่าเอนไซม์ methyl parathion hydrolase ของเชื้อเป็น membrane bound protein และมีการแสดงออกของยีนแบบ inducible จากการแยกบริสุทธิ์เอนไซม์ methyl parathion hydrolase ของเชื้อจนมีความบริสุทธิ์เกือบสมบูรณ์ พบว่ามีค่า specific activity สูงถึง 430 unit/mg protein เอนไซม์นี้มีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 35 กิโลดาลตัน ถูกยับยั้งกิจกรรมประมาณ 50% ด้วย DTT และประมาณ 10% ด้วย EDTA และ CuCl2 มีค่า pI ใน denatured form ประมาณ 8.5 และสามารถวิเคราะห์หาลำดับกรดอะมิโนที่ปลายด้านอะมิโนของมันได้ถึง 40 residue ซึ่งพบว่ามีความแตกต่างอย่างสิ้นเชิงจากของเอนไซม์ parathion hydrolase ตัวอื่นที่ได้เคยมีการรายงานไว้ และแตกต่างจากลำดับกรด อะมิโนของโปรตีนต่างๆ ที่อยู่ในฐานข้อมูล จึงสมควรที่จะได้มีการศึกษาเชื้อตัวนี้ในระดับของยีนต่อ โดยผู้วิจัยจะทำการ identify หา methyl parathion hydrolase gene จาก genomic library ของเชื้อ โดยใช้ probe ที่สังเคราะห์จากข้อมูลของลำดับกรดอะมิโนที่ปลายด้านอะมิโนของเอนไซม์ จากนั้นทำการหาลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนและทำ gene walking เพื่อหาลำดับ นิวคลีโอไทด์ในส่วน upstream และ downstream ของยีนด้วย ทำการ characterize ยีน และนำข้อมูลที่ได้ไปเปรียบเทียบกับลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีนอื่นๆ ในฐานข้อมูลเพื่อหา homologous gene ซึ่งจะเป็นการหา natural substrate ของเอนไซม์ด้วย จากนั้นนำยีนนี้ไป clone ใน expression vector ที่เหมาะสมแล้วทำการ express ยีน พร้อมทั้งเปรียบเทียบ activity และ คุณสมบัติที่สำคัญของ recombinant enzyme ที่ได้กับ native enzyme เนื่องจากเชื้อตัวนี้เป็นเชื้อที่ native ต่อประเทศไทยและสามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลงตัวอื่นในกลุ่ม organo phosphate ได้ด้วย การศึกษาในระดับยีนดังกล่าวนี้จะเป็นพื้นฐานความรู้ที่เป็นประโยชน์อย่าง ยิ่งในการพัฒนาเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการนำมาใช้กำจัดยาฆ่าแมลงกลุ่ม organophosphate ที่ตกค้างอยู่ใน สิ่งแวดล้อมต่อไปในอนาคต |
| บรรณานุกรม | : |
เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , บุญศรี จงเสรีจิตต์ , Jesdawan Wichitwechkarn , Boonsri Jongsereejit . (2543). การศึกษาขั้นต้นของการวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง methyl parathion.
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ. เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , บุญศรี จงเสรีจิตต์ , Jesdawan Wichitwechkarn , Boonsri Jongsereejit . 2543. "การศึกษาขั้นต้นของการวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง methyl parathion".
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ. เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , บุญศรี จงเสรีจิตต์ , Jesdawan Wichitwechkarn , Boonsri Jongsereejit . "การศึกษาขั้นต้นของการวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง methyl parathion."
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2543. Print. เจษฎาวรรณ วิจิตรเวชการ , บุญศรี จงเสรีจิตต์ , Jesdawan Wichitwechkarn , Boonsri Jongsereejit . การศึกษาขั้นต้นของการวิเคราะห์ในระดับยีนของเชื้อ Pseudomonas sp. ที่สามารถย่อยสลายยาฆ่าแมลง methyl parathion. ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2543.
|
