การสร้างชุดทดสอบสำหรับตรวจสปีชีย์ของ Mycobacterium ด้วย reverse hybridization Probe assay โดยเทคนิค reverse hybridization เป็นวิธีที่สามารถนำมาใช้ในการตรวจหาและแยกสปีชีส์ของมัยโคแบคทีเรียได้ใน การทดสอบครั้งเดียว นำ multiple probes ที่จำเพาะต่อgenus Mycobacteriumและมัยโคแบคทีเรียสปีชีส์อื่นที่มีความสำคัญทางคลินิคมาตรึงบน แผ่นเมมเบรนซึ่งออกแบบprobe โดยอาศัยลำดับเบสของ 16S rRNA gene ตัวอย่างที่นำมาทดสอบได้ถูกเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอก่อนด้วย multiplex PCR หรือใช้ทดสอบโดยตรงโดยไม่ถูกเพิ่มจำนวนก่อน เทคนิค multiplex PCR ที่อาศัยการเพิ่มจำนวน 16S rRNA gene และ MPB 70 gene สามารถจำแนก M. tuberculosis complex , M. avium, M. intracellulare และ genus Mycobacterium ในการทดสอบ 1 ครั้ง ความไวของวิธี Multiplex PCRในการตรวจหา DNA ของ genus Mycobacterium, M. tuberculosis complex, M. avium และ M. intracellulare คือ 10 pg , 10 pg, 10 pg และ 1 ng ตามลำดับ Multiplex PCR ไม่สามารถเพิ่มปริมาณ DNA ของแบคทีเรียอื่นๆ ยกเว้น Nocardia และ Rhodococcus การทดสอบใน clinical isolates ของมัยโคแบคทีเรีย 85 ตัวอย่าง hemoculture ที่ให้ผล AFB positive 50 ตัวอย่างและสิ่งส่งตรวจของผู้ป่วยที่ให้ผล AFB positive จำนวน 50 ตัวอย่าง พบว่า multiplex PCR ให้ผลสอดคล้องกับการวิธีการที่ทดสอบเป็นประจำ โดยสามารถจำแนกสปีชีส์ของเชื้อ M. tuberculosis complex, M. avium และ M. intracellulare ได้จากมัยโคแบคทีเรียอื่น Reverse dot blot hybridization ที่พัฒนาขึ้น เพื่อตรวจหาและจำแนกสปีชีส์ของเชื้อมัยโคแบคทีเรียจาก amplified product ของ multiplex PCR สามารถจำแนกสปีชีส์เพิ่มขึ้น คือ M. chelonae หรือ M. abscessus, M. flavescens, M. fortuitum, M. gordonae, M. kansasii หรือ M. gastri หรือ M. scrofulaceum หรือ M. simiae และ M. xenopi ความไวของวิธี reverse dot blot hybridization เหมือนกับ multiplex PCR Species-specific probes มีความจำเพาะยกเว้น M. intracellulare (MInt) probe อย่างไรก็ตาม amplified product ของ M. intracellulare ไม่จับกับ probes อื่นๆ ยกเว้น probe MInt การศึกษาครั้งนี้พบว่า เทคนิค multiplex PCR-reverse hybridization สำหรับตรวจหาและจำแนก สปีชีส์ของเชื้อมัยโคแบคทีเรียเป็นวิธีการที่มีความรวดเร็ว แม่นยำ ประหยัด และมีศักยภาพเป็นชุดการทดสอบสำหรับใช้ในงานประจำของห้องปฏิบัติการได้