| ชื่อเรื่อง | : | การพัฒนาชุดตรวจไวรัสโรคตัวแดงดวงขาว (WSSV) ชนิด Sandwich ELISA แบบตลับและชนิดแถบสี (Strip test) |
| นักวิจัย | : | วีระวรรณ สิทธิกรกุล , Weerawan Sithigorngul |
| คำค้น | : | Animal biotechnology and related animal science , Biological sciences , BT-B-01-SG-17-4709 , Diagnostic reagents and test kits , ELISA , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Marine and freshwater biology , Monoclonal antibodies , White Spot Syndrome Virus , กุ้ง , ชุดตรวจวินิจฉัยโรคสำเร็จรูป , ศูนย์พันธุวิศวกรรมและเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ , สาขาเกษตรศาสตร์และชีววิทยา , โมโนโคลนอลแอนติบอดีย์ , ไวรัสตัวแดงดวงขาว |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2548 |
| อ้างอิง | : | http://www.nstda.or.th/thairesearch/node/1918 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | การพัฒนาชุดตรวจไวรัสตัวแดงดวงขาวโดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดีและโพลิโคลน อลแอนติ บอดีในรูป sandwich ELISA รูปแบบต่างๆ ทำโดยผลิตโพลิโคลนอลแอนติบอดีในกระต่าย โดยฉีดด้วย recombinant VP28 (rVP28) และผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดี W28 และ W29 โดยเลี้ยงในอาหารที่ปราศจากซีรั่ม หลังจากทำแอนติบอดีทั้ง 3 ชนิดให้บริสุทธิ์โดยใช้ Protein A column ตรวจสอบประสิทธิภาพของการจับไวรัสโดยวิธี indirect sandwich ELISA โดยใช้ rabbit anti rVP28 polyclonal antibody เป็น capture antibody ทดสอบกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่างๆ พบว่า โมโนโคลนอลแอนติบอดี W28 และ W29 จับที่ epitope ต่างกันและมีแรงจับดีกว่าโมโนโคลนอลแอนติบอดีชนิดอื่น ในการพัฒนาชุดตรวจแบบ strip test พบว่าใช้ rabbit anti rVP28 polyclonal antibody ผสมกับโมโนโคลนอลแอนติบอดี W28 เป็น capture antibody และโมโนโคลนอลแอนติบอดี W29 เชื่อมต่อกับ colloidal gold ขนาด 10 nm ให้ผลการตรวจไวและชัดเจนที่สุด เมื่อทดลองเก็บชุดตรวจโดยอบที่อุณหภูมิ 60 oC เป็นเวลา 20 วัน คุณภาพของชุดตรวจไม่แตกต่างจากชุดตรวจปกติ แต่ที่ 30 วันพบว่าชุดตรวจมีประสิทธิภาพลดลงแสดงว่าชุดตรวจมีความคงตัวในอุณหภูมิห้อง ประมาณ 2 ปี สำหรับการพัฒนาโดยการใช้ indirect sandwich ELISA แบบตลับโดยใช้ rabbit anti rVP28 polyclonal antibody เป็น captured antibody และ goat anti mouse IgG horseradish เป็น reporter antibody ให้ผลการตรวจความไวต่ำกว่า strip test อาจเนื่องจากสารต่างๆ ไหลผ่านเมมเบรนเร็วเกินกว่า captured antibody จะจับได้ก่อให้เกิดติดสีพื้นมากเนื่องจากแอนติบอดีค้างในส่วนต่างๆ ของเมมเบรนและกระบวนการสิ้นเปลืองและใช้เวลามากกว่า strip test จึงไม่เหมาะสมที่จะใช้ทดแทน sandwich ELISA ที่ทำใน 96 well plate ได้ ซึ่ง strip test เป็นวิธีที่สะดวกสามารถใช้โดยเกษตรกรในภาคสนามได้เป็นอย่างดี |
| บรรณานุกรม | : |
วีระวรรณ สิทธิกรกุล , Weerawan Sithigorngul . (2548). การพัฒนาชุดตรวจไวรัสโรคตัวแดงดวงขาว (WSSV) ชนิด Sandwich ELISA แบบตลับและชนิดแถบสี (Strip test).
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ. วีระวรรณ สิทธิกรกุล , Weerawan Sithigorngul . 2548. "การพัฒนาชุดตรวจไวรัสโรคตัวแดงดวงขาว (WSSV) ชนิด Sandwich ELISA แบบตลับและชนิดแถบสี (Strip test)".
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ. วีระวรรณ สิทธิกรกุล , Weerawan Sithigorngul . "การพัฒนาชุดตรวจไวรัสโรคตัวแดงดวงขาว (WSSV) ชนิด Sandwich ELISA แบบตลับและชนิดแถบสี (Strip test)."
ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ, 2548. Print. วีระวรรณ สิทธิกรกุล , Weerawan Sithigorngul . การพัฒนาชุดตรวจไวรัสโรคตัวแดงดวงขาว (WSSV) ชนิด Sandwich ELISA แบบตลับและชนิดแถบสี (Strip test). ปทุมธานี : สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ; 2548.
|
