| ชื่อเรื่อง | : | การพัฒนาวัคซีนป้องกันโรคเลปโตสไปโรซีสโดยใช้เทคนิค T7 phage display |
| นักวิจัย | : | พงศ์ราม รามสูต |
| คำค้น | : | Epitope , Leptospira , Phage displat , Random peptied , การพัฒนา , วัคซีนป้องกันโรคเลปโตสไปโรซีส , เทคนิค T7 phage display |
| หน่วยงาน | : | สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2549 |
| อ้างอิง | : | http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=PDF4480033 , http://research.trf.or.th/node/3218 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | งานวิจัยนี้เป็นการหาเอพิโทปของฟาจที่จับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีโคลนแอลดี๕ และแอลเอฟ๙ ซึ่งมีความจำเพาะต่อเชื้อเลปโตสไปราที่ก่อโรคและไม่ก่อโรคตามลำดับ โดยคัดเลือกจากฟาสที่จับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีจากแรนดอมเฮบตะเปบบไตด์ฟาจไลบรารีที่ขนาบข้างด้วยซะสไตอีน แยกดีเอ็นเอของฟาจ ทำพีซีอาร์เพิ่มปริมาณดีเอ็นเอในส่วนที่มีแรนดอมเฮบตะเปบไตด์อยู่ นำผลผลิตพีซีเอาร์มาหาลำดับเปบไตด์ ซึ่งพบว่า ๔๒% ของฟาจที่จับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีโคลนแอลดี๕ มีลำดับเป็บไตด์ที่ตรงกันคือ -LTPCDN- ส่วนฟาจ (T7/LD5) ที่เหลือมีลำดับเป็บไตด์ที่แกต่างกันไป ส่ว่นฟาจที่จับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีโคลน แอลเอฟ๙ มีลำดับเป็บไตด์ที่ตรงกัน ๒ กลุ่มคือ -VLKKNPP- และ -LXKNCS- จากการเปรียบเทียบลำดับเป็บไตด์ ของฟาจที่จับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีกับฐานข้อมูลโปรตีนจากยีนแบงค์ เราพบว่าฟาจ (T7/LD5) ๕ ตัว มีลำดับเป็บไตด์ ๖ ตำแหน่งของ amino-acid ที่ตรงกันกับบางส่วนของ hypothetical protein ของเชื้อ Leptospira interrogans serovr lai strain ๕๖๖o๑ ส่วนฟาจที่จับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดี LF9 (T7/LF9) เราพบว่า ลำดับเป็บไตด์ตรงกับ putativemulti-domain beta keto-acyl synthase of Streptomyces coelicolor A3 จากการทดสอบยืนยันความจำเพาะของฟาจที่จับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดี โดยใช้วิธีอีไลซา พบว่ามีความจำเพาะสูง Random heptapeptide library displayed by bacteriophage T7 was used to characterize epitopes of the monoclonal antibodies clone LF9 and LD5 which specific to all members of the genus Leptospira, and specific only to the pathogenic species respectively. Bound phages were selected, followed by PCR and DNA-sequensing of inserted peptide sequences. Binding specificity of bound phages were confirmed by ELISA. Considering all the deduced amino acid sequences of phage reacting with the LD5 antibody, the consensus motif -LTPCDN- appeared. Interesringly, among forty-two percent of selected phage reacting with the LD5 monoclonal antibody, the consensus sequence of the displayed peptides correspinded to a segment of hypothetical protein of Leptospira interrogans serovar lai strain 56601. Considering all the deduced amino acid sequences of phage reacting with the LF9 antibody, the consensus motif -VLKKNRP- and -CLP- appeared. In phage reacting with the LF9 monoclonal antibody the deduced amino acid sequence of the displayed peptides corresponded to putative multi-domain beta keto-acyl synthase of Streptomyces coelicolor A3. The results demonstrate that T7 phage display technique has potential for display of peptides and for rapid analysis of the interaction between these peptides with monoclonal antibodies. The finding -LTPCDN- peptide can be further tested to use as candidate leptospirossis vaccine |
| บรรณานุกรม | : |
พงศ์ราม รามสูต . (2549). การพัฒนาวัคซีนป้องกันโรคเลปโตสไปโรซีสโดยใช้เทคนิค T7 phage display.
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. พงศ์ราม รามสูต . 2549. "การพัฒนาวัคซีนป้องกันโรคเลปโตสไปโรซีสโดยใช้เทคนิค T7 phage display".
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย. พงศ์ราม รามสูต . "การพัฒนาวัคซีนป้องกันโรคเลปโตสไปโรซีสโดยใช้เทคนิค T7 phage display."
กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2549. Print. พงศ์ราม รามสูต . การพัฒนาวัคซีนป้องกันโรคเลปโตสไปโรซีสโดยใช้เทคนิค T7 phage display. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2549.
|
