วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2544

การแยกสารคล้ายแพนครีเอทิคโพลีเปปไทด์ (PP-like substance) จากก้านตาของกุ้งกุลาดำจำนวน 7,500 ก้านตาโดยการสกัดด้วยสารละลายเมทานอล-กรดอะซิติก-น้ำ (90 : 1 : 9) นำไปแยกผ่าน C18 Sep-Pak cartridge และนำไปทำให้บริสุทธิ์ต่อด้วย RP-HPLC 5-6 ขั้นตอน โดยใช้คอลัมน์ C18, C8 และ Cyano ระบบตัวทำละลาย 3 ระบบคือ acetonitrile / trifluoroacetic acid, acetonitrile / heptafluorobutyric acid และ acetonitrile / triethylamine การติดตามสารคล้าย PP ในระหว่างการทำให้บริสุทธิ์ใช้วิธี Dot-enzyme linked immunosorbant assay (Dot-ELISA) โดยใช้ rabbit anti-human pancreatic polypeptide C-terminal hexapeptide (PP6) antiserum จากแฟรกชั่นที่ 19, 23, 24, 26 และ 27 ของ RP-HPLC ในขั้นตอนที่ 1 ได้สารคล้าย PP ที่คาดว่ามีความบริสุทธิ์มากพอที่จะนำไปหาลำดับของกรดอะมิโนต่อไป 4 รูปแบบ ได้แก่ PPL1, PPL2, PPL3 และ PPL4 มีน้ำหนักโมเลกุลที่แตกต่างกันคือ 801.5, 1137.1, 1050.0 และ 1165.9 ดาลตัน ตามลำดับ เมื่อตรวจหาน้ำหนักโมเลกุลโดย Matrix assisted laser desorption ionization time-of flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) จากน้ำหนักโมเลกุลที่ได้จึงคาดว่าสารคล้าย PP ที่แยกได้นี้เป็นเปปไทด์สายสั้นที่ประกอบด้วยกรดอะมิโนไม่เกิน 9 หน่วย คล้ายกับ PYF จากสมองของปลาหมึกกล้วย Loligo vulgaris แต่มีน้ำหนักโมเลกุลที่ต่างออกไปจึงคาดว่าสารคล้าย PP ที่ได้นี้น่าจะมีกรดอะมิโนในสายของเปปไทด์ที่แตกต่างกัน