งานวิจัยนี้ได้พัฒนาวิธีวิเคราะห์หาปริมาณอะม็อกซิซิลลินในเภสัชภัณฑ์ที่ง่าย รวดเร็ว มี ความไว และต้นทุนต่ำ โดยอาศัยปฏิกิริยาซึ่งเร่งด้วยเอนไซม์ 2 ปฏิกิริยา ในขั้นตอนแรก หมู่ดี-4-ไฮดรอกซีฟีนิลกลัยซีนในโครงสร้างของอะม็อกซิซิลลินถูกตัดอย่างจำเพาะออกจากโมเลกุล ของอะม็อกซิซิลลินโดยเอนไซม์เพนนิซิลลินอะซิเลส จากนั้นดี-4-ไฮดรอกซีฟีนิลกลัยซีนที่เกิดขึ้นเข้า ทำปฏิกิริยากับ 2-ออกโซกลูตาเรตโดยมีเอนไซม์ดี-ฟีนิลกลัยซีนอะมิโนทรานสเฟอเรสเป็นตัวเร่ง เกิดผลิตภัณฑ์ตัวหนึ่งได้แก่ 4-ไฮดรอกเบนซิลฟอร์เมตซึ่งสามารถดูดกลืนแสงอัลตราไวโอเลตได้สูง ดังนั้นปริมาณอะม็อกซิซิลลินจึงถูกวิเคราะห์ได้จากค่าการดูดกลืนแสงซึ่งเพิ่มขึ้น ณ ความยาวคลื่น 335 นาโนเมตร การวิจัยครั้งนี้ได้ทำการศึกษาและปรับเลือกสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการวิเคราะห์ ตลอดจนได้ทำการตรวจสอบความถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ที่พัฒนาขึ้น พบว่ากราฟมาตรฐานระหว่าง ปริมาณอะม็อกซิซิลลินเริ่มต้นที่มีอยู่ในตัวอย่างกับค่าการดูดกลืนแสงซึ่งเพิ่มขึ้นมีความสัมพันธ์ใน เชิงเส้นตรงดีมาก (r2 = 0.9998 ในช่วงความเข้มข้นของอะม็อกซิซิลลิน 0 – 100 ไมโครโมล่าร์) มีค่า ขีดจำกัดของการตรวจวัด และขีดจำกัดของวิเคราะห์หาปริมาณ เป็น 0.77 และ 2.55 ไมโครโมล่าร์ ตามลำดับ เมื่อนำวิธีนี้ไปวิเคราะห์เภสัชภัณฑ์อะม็อกซิซิลลินในรูปแบบยาแคปซูลและยาผงสำหรับ ละลายน้ำได้ยาแขวนตะกอน พบว่าวิธีวิเคราะห์มีความถูกต้องและแม่นยำดี ไม่ถูกรบกวนโดยสาร ปรุงแต่งอื่นๆ ในตำรับ รวมถึงผลิตภัณฑ์อันเกิดจากการสลายตัวของอะม็อกซิซิลลิน นอกจากนี้ เนื่องจากทุกขั้นตอนของการวิเคราะห์ปราศจากการใช้ตัวทำละลายอินทรีย์ตลอดจนสารเคมีที่เป็น อันตราย จึงนับว่าวิธีที่พัฒนาขึ้นใหม่นี้เป็นวิธีวิเคราะห์หาปริมาณอะม็อกซิซิลลินในเภสัชภัณฑ์ที่ ปลอดภัยต่อสิ่งแวดล้อมอีกด้วย A simple, fast, sensitive and inexpensive UV-spectrophotometric method for the determination of amoxicillin in pharmaceutical preparations has been developed based on two enzymatic reactions. In this method, d-4-hydroxyphenylglycine side chain of amoxicillin was selectively cleaved off by penicillin acylase. Subsequently, it was reacted with 2- oxoglutarate, by the catalysis of D-phenylglycine aminotransferase, to yield the product with high UV absorption namely 4-hydroxybenzoylformate. The amount of amoxicillin was then determined as a change in absorbance at 335 nm. In this work, the assay conditions were studied and optimized and the method was validated. The calibration curve presented an excellent linearity with r2 of 0.9998 (0 – 100 ?M amoxicillin). Detection and quantitation limits were 0.77 and 2.55 ?M, respectively. Good accuracy and precision were obtained when the method was tested with amoxicillin capsules and powder for oral suspension. No interference from common excipients in the formulations or degradation products was observed. Finally, since all procedures were performed without the use of any organic solvents or hazardous chemicals which were detrimental to the environment and had a low consumption of reagents, this proposed assay was an ideal green analytical method suitable for the quality control of amoxicillin in pharmaceuticals