อนุพันธ์ของ 2,5-dimercapto-1,3,4-thiadiazole สังเคราะห์จากปฏิกิริยาการแทนที่ระหว่าง 2,5-dimercapto-1,3,4-thiadiazole กับสารเฮเทอโรไซคลิกที่มีอะตอมของคลอรีนอยู่ในโมเลกุล ภายใต้สภาวะที่มีโปแทสเซียมคาร์บอเนตหรือโลหะโซเดียม ในสารละลายเมทานอลที่อุณหภูมิห้อง ใช้วิธี Green Fluorescent Protein (GFP)-based assay ในการทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ปกติ ใช้วิธี Resazurin Microplate Assay (REMA) ในการทดสอบฤทธิ์ยับยั้งเชื่อแคนดิดาและฤทธิ์ต้านเซลล์มะเร็ง จากผลการวิจัยพบว่าสารสังเคราะห์หมายเลข 1, 4, 5, 6, 11 และ 13 มีความเป็นพิษต่อ Vero cells (African green monkey kidney) สารหมายเลข 1, 4, 5, 6, 9, 11, 13 และ 15 มีฤทธิ์ต้านเซลล์มะเร็งปอดชนิด NCI-H187 (ATCC CRL-5804) ซึ่งสารหมายเลข 13 มีฤทธิ์ต้านเซลล์มะเร็งปอดมากที่สุด โดยมีค่า IC50 = 1.77 g/ml สำหรับผลการทดสอบฤทธิ์ในการยับยั้งเชื้อ Candida albicans (ATCC 90028) พบว่าสารหมายเลข 6 และหมายเลข 15 มีฤทธิ์ที่ดีในการยับยั้งเชื้อ C. albicans ซึ่งมีค่า IC50 = 1.94 และ 19.10 g/ml ตามลำดับ ในงานวิจัยนี้ได้ทำการศึกษารูปแบบการจับกันระหว่างสารสังเคราะห์กับ cytochrome P450 14-demethylase เพื่ออธิบายความเป็นพิษต่อเซลล์ปกติ และฤทธิ์ยับยั้งเชื้อแคนดิดาของสารสังเคราะห์โดยใช้เทคนิคการ docking ซึ่งผลการศึกษาพบว่าการเกิดอันตรกิริยาระหว่างส่วนของ thiadiazole ของสารสังเคราะห์กับโมเลกุลของ heme มีความสัมพันธ์กับผลการทดสอบความเป็นพิษต่อเซลล์ปกติ และโมเลกุลที่จะมีฤทธิ์ยับยั้งเชื้อแคนดิดาจะต้องมีความยาวของโมเลกุลที่เหมาะสม ดังที่พบในโมเลกุลของสารหมายเลข 6 และหมายเลข 15 ซึ่งสารหมายเลข 15 มีความน่าสนใจในการพัฒนาต่อไปเพื่อให้เป็นสารยับยั้งเชื้อแคนดิดา เพราะมีฤทธิ์ยับยั้งเชื้อแคนดิดาและไม่มีความเป็นพิษต่อเซลล์ปกติ A series of 2,5-dimercapto-1,3,4-thiadiazole derivatives were prepared from nucleophilic substitution reaction between 2,5-dimercapto-1,3,4-thiadiazole and chloroheterocyclic compounds in methanol and in the presence of potassium carbonate or metallic sodium at room temperature. The cytotoxicity activity was determined by Green Fluorescent Protein (GFP)-based assay. Anti-candida and anticancer activities were determined by Resazurin Microplate Assay (REMA). Compounds 1, 4, 5, 6, 11 and 13 showed in vitro cytotoxicity activities against Vero cells (African green monkey kidney). Compounds 1, 4, 5, 6, 9, 11, 13 and 15 showed in vitro anticancer activity against small cell lung cancer NCI-H187 (ATCC CRL-5804). Compound 13 was the most active anticancer agent with the IC50 value of 1.77 g/ml. Compounds 6 and 15 exhibited the anti-candida activities against Candida albicans (ATCC 90028) with the IC50 values of 1.94 and 19.10 g/ml, respectively. The docking studies into the catalytic site of cytochrome P450 14-demethylase were used to identify the cytotoxicity and anti-candida activities of synthesized compounds. Docking study demonstrated that the thiadiazole-heme interactions play a key role in determining the cytotoxicity of 2,5-dimercapto-1,3,4-thiadiazole derivatives. The docking results suggested that the appropriate substitution of long chain moiety (compound 6 and 15) was important for anti-candida activities. In future study, 1-(2-(5-mercapto-1,3,4-thiadiazol-2-thio)phenyl)-3-methyl-1H-pyrazol-5(4H)-one (15) will be the lead compound to develop the low toxic azole antifungal