ธาสัสซีเมียเป็นโรคที่เกิดจากความผิดปกติของการสังเคราะห์สายโกลบิน โดยปัญหาของผู้ป่วย เกิดจากภาวะซีดซึ่งมีสาเหตุที่สำคัญสาเหตุหนึ่งมาจาก ineffective erythropoiesis หรือภาวะที่ เม็ดเลือดแดงตายไปก่อนที่จะเจริญไปเป็นตัวแก่ การวิจัยนี้ทำการศึกษาขบวนการ ineffective erythropoiesis โดยการเปรียบเทียบจำนวนเซลล์ที่มีอายุอยู่หรือ cell viability ในผู้ป่วยธาสัสซี เมียชนิด β-thalassemia/Hb E ตัดม้าม, ผู้ป่วยธาสัสซีเมียชนิด β-thalassemia/Hb E ไม่ตัด ม้ามและคนปกติที่มีสุขภาพดี รวมทั้งทำการศึกษาผลของสาร interleukin-3 และสัญญาณภาย ในเซลล์ที่ควบคุมขบวนดังกล่าวนี้อีกด้วย โดยใช้เทคนิคการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือด แดงและวิเคราะห์ปริมาณเซลล์ที่มีชีวิตอยู่และเซลล์ที่ตายแบบ apoptosis จากผลการวิจัยพบว่า เซลล์เม็ดเลือดแดงต้นกำเนิดหลังทำการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 3 และ 7 วันจากกลุ่มผู้มีสุขภาพดีมี เปอร์เซนต์เซลล์ที่มีชีวิตอยู่มีค่าสูงสุด ในขณะที่กลุ่มผู้ป่วยธาสัสซีเมีย ชนิด β-thalassemia/Hb E ตัดม้ามมีค่าต่ำที่สุด โดยกลุ่มเซลล์ที่เติมสาร interleukin-3 ในน้ำยาเลี้ยงเซลล์พบว่ามีค่าเปอร์ เซนต์ที่มีชีวิตอยู่สูงกว่ากลุ่มเซลล์ที่ไม่ได้เติมสาร interleukin-3 ในน้ำยาเลี้ยงเซลล์ การศึกษา สัญญาณภายในเซลล์ที่ควบคุมขบวนการ ineffective erythropoiesis โดยการใช้สารยับยั้งที่ จำเพาะกับสัญญาณภายในเซลล์ที่ต้องการศึกษาคือ สารยับยั้ง protein kinase C (Ro-318220), สารยับยั้ง phospholipase C (U-73122) และสารยับยั้ง JAK2 (AG-490) ใส่ลงในน้ำยาเลี้ยง เซลล์และทำการพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดเม็ดเลือดแดง จากนั้นจึงทำการวิเคราะห์เซลล์ตายแบบ apoptosis โดยวิธี flow cytometry ผลของการทดลองพบว่าเซลล์ที่ใส่สาร U-73122 มีเปอร์ เซนต์เซลล์ตายแบบ apoptosis สูงสุดทั้งในกลุ่มเซลล์เม็ดเลือดแดงต้นกำเนิดของคนปกติที่มีสุข ภาพดีและกลุ่มผู้ป่วยธาลัสซีเมีย β-thalassemia/Hb E นอกจากนี้เมื่อใส่สาร RO-318220 ในน้ำ ยาเลี้ยงเซลล์เม็ดเลือดแดงต้นกำเนิดของผู้ป่วยธาสัสซีเมีย β-thalassemia/Hb E ตัดม้ามพบว่า มีเปอร์เซนต์เซลล์ตายแบบ apoptosis สูงกว่าเซลล์จากคนปกติที่มีสุขภาพดีอย่างมีนัยสำคัญ ทางสถิติ จากผลการวิจัยครั้งนี้สามารถสรุปได้ว่าสํญญาณภายในเซลล์ชนิด phospholipase C น่าจะมีบทบาทสำคัญต่อขบวนการ ineffective erythropoiesis ในผู้ป่วยธาสัสซีเมีย β- thalassemia/Hb E ทั้งชนิดตัดม้ามและไม่ตัดม้าม นอกจากนี้ protein kinase C อาจจะมีส่วน ควบคุมขบวนการดังกล่าวนี้ในผู้ป่วยธาสัสซีเมีย β-thalassemia/Hb E ตัดม้ามอีกด้วย Thalassemia is a genetic disorder caused by abnormal globin chain synthesis. One of the major causes of anemia in thalassemic patients is ineffective erythropoiesis. To study this process, we compared the percentage of cell viability of erythroid progenitor cells between thalassemic patients; splenectomized β-thalassemia/Hb E, nonsplenectomized β-thalassemia/Hb E and healthy subjects. In addition, study the effect of interleukin-3 (IL-3) and signaling pathways in ineffective erythropoiesis by using erythroid progenitor cell culture technique and analysis of cell viability and apoptotic cells. The results of this study showed that the highest percentage of cell viability was found in healthy subject, while splenectomized β-thalassemia/Hb E showed the lowest percentage of cell viability after culturing erythroid progenitor cells for 3 and 7 days. The IL-3 added erythroid progenitor cells showed higher cell viability than IL-3 depleted cells. To study the involvement of specific signaling pathways in ineffective erythropoiesis, the protein kinase C inhibitor (Ro-318220), phospholipase C inhibitor (U- 73122) and JAK2 inhibitor (AG-490) were used in culture system and analyzed apoptotic cells by flow cytometry. The results showed that progenitor cells treated with U-73122 had the highest percentage of apoptotic cells in both healthy subjects and β- thalassemia/Hb E patients. In addition, the cells treated with Ro-318220 had significantly different of percent apoptotic cells between splenectomized β- thalassemia/Hb E and healthy subjects. It could suggest that phospholipase C might play a key role in the process of ineffective erythropoiesis in both splenectomized and nonsplenectomized β-thalassemia/Hb E. Moreover, protein kinase C might be involved in this process of splenectomized β-thalassemia/Hb E.