สิ่งสกัดจากกระชายดำให้ฤทธิ์ยับยั้งเอนไซม์อะเซทิลโคลีนเอสเตอเรสที่น่าสนใจ ดังนั้นจึงได้ทำการแยกและทำให้บริสุทธิ์เพื่อหาสารออกฤทธิ์โดยใช้เทคนิคทางโครมาโทกราฟี สามารถแยกสาร ฟลาโวนได้ 3 ชนิดจากสิ่งสกัดเฮกเซน และอีก 11 ชนิดจากสิ่งสกัดไดคลอโรมีเทน วิเคราะห์และพิสูจน์สูตรโครงสร้างของสารด้วยเทคนิคทางเอ็นเอ็มอาร์และเทียบกับเอกสารอ้างอิง นอกจากนี้ยังได้สังเคราะห์ฟลาโวนที่ไม่พบในธรรมชาติอีก 5 ชนิดเพื่อใช้ในการหาความสัมพันธ์ระหว่างสูตรโครงสร้างและฤทธิ์ยับยั้งเอนไซม์อะเซทิลโคลีนเอสเตอเรส ผลการทดสอบฤทธิ์ดังกล่าวพบว่า สาร (6) คือ 5,7,4'-ไตรเมทอกซีฟลาโวน ให้ฤทธิ์สูงที่สุด (ยับยั้งได้ 56%) ที่ความเข้มข้น 1 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร มีข้อสังเกตว่าสารที่มีหมู่เมทอกซีที่ตำแหน่ง 5, 7 และ 4' โดยที่ไม่มีหมู่เมทอกซีที่ตำแหน่งที่ 3 จะมีฤทธิ์การยับยั้งที่ดี แต่ถ้ามีหมู่ไฮดรอกซีที่ตำแหน่งที่ 5 จะทำให้ฤทธิ์ลดลง ในทางกลับกัน ฟลาโวนที่มีหมู่เมทอกซีที่ตำแหน่งที่ 3' หรือ 5' จะไม่มีผลต่อฤทธิ์ดังกล่าวเลย