ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การใช้ยีสต์เพื่อคัดกรองและศึกษาคุณสมบัติของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในพืชสมุนไพรไทย

หน่วยงาน สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การใช้ยีสต์เพื่อคัดกรองและศึกษาคุณสมบัติของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในพืชสมุนไพรไทย
นักวิจัย : ชุลี ยมภักดี
คำค้น : boesenbergia pandurata , Ca2+ signal , inhibitor , pinostrobin , yeast based assay
หน่วยงาน : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2553
อ้างอิง : http://elibrary.trf.or.th/project_content.asp?PJID=DBG4880005 , http://research.trf.or.th/node/1961
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

จากที่มีการพบว่าลำดับเบสระหว่างยีนในมนุษย์และยีนในยีสต์มีความเหมือนกันอยู่สูง และมีการใช้เทคนิคทางพันธุศาสตร์ของยีสต์เข้ามาช่วยในการศึกษากระบวนการในสิ่งมีชีวิตชั้นสูง ทำให้ยีสต์ S. cerevisiae เป็นจุลินทรีย์หนึ่งที่มีบทบาทในการค้นหายาใหม่ๆ วิถีการส่งสัญญาณของแคลเซียมในเซลล์มีความเกี่ยวข้องกับการควบคุมกระบวนการทางชีวภาพต่างๆมากมายในสิ่งมีชีวิตชั้นสูง ยีสต์สายพันธุ์กลายหนึ่งที่ขาดยีนZDS1 (zds1Δ) ไม่สามารถเจริญได้เมื่อถูกเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีความเข้มข้นของแคลเซียมสูง (150 มิลลิโมล่าร์) อันเป็นผลมาจากวัฎจักรการแบ่งเซลล์ได้หยุดอยู่ที่ระยะG2 จากลักษณะการเจริญที่มีเงื่อนไขดังกล่าว ทำให้ยีสต์zds1Δถูกนำมาใช้ในระบบคัดกรองสารที่มีโมเลกุลขนาดเล็กซึ่งสามารถออกฤทธิ์ยับยั้งวิถีการส่งสัญญาณของแคลเซียมที่มีผลต่อการควบคุมการแบ่งเซลล์ ในการศึกษานี้ได้ใช้ระบบคัดกรองที่ใช้ยีสต์สายพันธุ์ดังกล่าวเพื่อคัดกรองหาสารออกฤทธิ์ยับยั้งการส่งสัญญาณของแคลเซียมจากพืชสมุนไพรไทย จากการทดสอบสารสกัดอย่างหยาบจำนวน 143 ตัวอย่างพบสารสกัด 3 ตัวอย่างที่ให้ผลบวกในระบบคัดกรองดังกล่าวได้แก่สารสกัดอย่างหยาบจากฟ้าทะลายโจร (Andrographis paniculata) กระชายเหลือง (Boesenbergia pandurata)และกระชายดำ (Kaempferia parviflora) เฉพาะสารสกัดอย่างหยาบจากกระชายเหลืองได้ถูกเลือกมาศึกษาต่อ โดยสารสกัดอย่างหยาบถูกแยกเป็นส่วนย่อยและทำให้บริสุทธิ์โดยเทคนิคโครมาโตกราฟฟี่ และใช้เทคนิคโครมาโตกราฟฟี่แบบแผ่นบาง ร่วมกับระบบการทดสอบในยีสต์เพื่อติดตามฤทธิ์ สามารถแยกได้สารบริสุทธิ์ 3 ชนิดได้แก่ pinostrobin alpinetin และ pinocembrin chalcone จากการทดสอบในระบบยีสต์พบว่า pinostrobin มีฤทธิ์ทางชีวภาพแรงที่สุด เมื่อเลี้ยงเซลล์ยีสต์ zds1Δ ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี pinostrobin อยู่ก่อนที่จะนำเซลล์ดังกล่าวไปกระตุ้นวิถีการส่งสัญญาณของแคลเซียม พบว่า pinostrobin สามารถยับยั้งการหยุดการแบ่งเซลล์ที่ระยะ G2 ของเซลล์ยีสต์ zds1Δได้จากการใช้วิธีโฟลว์ไซโทเมททรี(flow cytometry) เพื่อติดตามระยะการแบ่งเซลล์ นอกจากนี้ pinostrobin ยังยับยั้งเซลล์ดังกล่าวในการเกิดรูปร่างที่ผิดปกติเมื่อแตกหน่อและการแบ่งนิวเคลียสที่ผิดปกติได้ การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าสารpinostrobin จากกระชายเหลืองมีฤทธิ์ยับยั้งวิถีการส่งสัญญาณของแคลเซียมในยีสต์ Because of the high degree of gene conservation between humans and yeast, the rapid progress in molecular biology and the powerful of classical yeast genetics render the yeast S. cerevisiae to be a fascinating organism in drug discovery. Calcium (Ca2+) signaling pathway is involved in regulation of diverse biological processes in eukaryotes. A mutant yeast strain, zds1Δ, grown in high Ca2+ containing medium exhibits a severe growth defect through the inhibition of the cell-cycle at G2 phase. Based on such phenotype observed, a novel drug screening system to detect small molecule inhibitors of Ca2+-dependent cell-cycle regulation was purposed. This study aimed to employ such yeast-based assay to screen Thai medicinal plants, a rich resource of bioactive compounds, for small molecule Ca2+ signal inhibitors. Three out of 143 crude ethanol extracts, that is Andrographis paniculata, Boesenbergia pandurata and Kaempferia parviflora, showed positive results in the screens. A crude extract of B. pandurata was fractionated and purified using column chromatographic techniques and TLC. The biological activity of each column was monitored by the yeast based assay. Three isolated compounds were purified and characterized by nuclear magnetic resonance spectroscopy as pinostrobin, alpinetin and pinocembrin chalcone. Pinostrobin shows the highest biological activity among the three. The pinostrobin-treated yeast cells could alleviate the abnormal morphology and abnormal nuclear division of the budding cells suffering from Ca2+-induced G2 phase cell-cycle arrest as confirmed by flow cytometry (FACS) profile. This study showed that pinostrobin from B. Pandurata contains inhibitory activity on the Ca2+ signal in the yeast, S. cerevisiae.

บรรณานุกรม :
ชุลี ยมภักดี . (2553). การใช้ยีสต์เพื่อคัดกรองและศึกษาคุณสมบัติของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในพืชสมุนไพรไทย.
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
ชุลี ยมภักดี . 2553. "การใช้ยีสต์เพื่อคัดกรองและศึกษาคุณสมบัติของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในพืชสมุนไพรไทย".
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย.
ชุลี ยมภักดี . "การใช้ยีสต์เพื่อคัดกรองและศึกษาคุณสมบัติของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในพืชสมุนไพรไทย."
    กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย, 2553. Print.
ชุลี ยมภักดี . การใช้ยีสต์เพื่อคัดกรองและศึกษาคุณสมบัติของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพในพืชสมุนไพรไทย. กรุงเทพมหานคร : สำนักงานกองทุนสนับสนุนการวิจัย; 2553.