วัตถุประสงค์ : เพื่อศึกษารูปแบบการกระจายตัวของ HNK-1 ณ เวลาที่มีการอพยพของนิวรัลเครสเซลล์ในตัวอ่อนของหนูแรทสายพันธุ์ Sprague- Dawley เปรียบเทียบกับหนูกลายพันธุ์ในสายพันธุ์เดียวกัน คือ Rat small eye (rSey) วิธีทดลอง : ศึกษารูปแบบการกระจายตัวของ HNK-1 ในตัวอ่อนระยะ Day-10 wild type และ homozygous rSey โดยวิธีอิมมูโนฮิสโตเคมิสตรี โดยต้องทำการแยกว่าตัวอ่อนใดเป็น homozygous rSey โดยการตรวจหา Pax-6 protein โดยวิธีการอิมมูโนฮิสโตเคมิสตรีเช่นกัน ผลการทดลอง:ผลการศึกษาการกระจายตัวของ HNK-1 ในตัวอ่อนปกติพบว่า ก่อนที่นิวรัลเครสเซลล์จะเริ่มอพยพจะพบ HNK-1 กระจายตัวอยู่ทั่วไปใน mesenchyme ตามเส้นทางการอพยพ และ การกระจายตัวจะค่อยๆหายไปจาก mesenchyme บริเวณด้านข้างของตัวอ่อนซึ่งเป็นบริเวณที่มีนิวรัลเครสเซลล์เริ่มเคลื่อนตัวมาปะปนอยู่ นอกจากนี้ใน homozygous rSey พบว่า HNK-1 มีการกระจายตัวอยู่อย่างผิดปกติอยู่ตามเส้นทาง ณ เวลาของการอพยพของนิวรัลเครสเซลล์ สรุปและวิจารณ์ผลการทดลอง : จากผลการทดลองพบว่า HNK-1 มีการกระจายตัวใน mesenchyme ตามเส้นทางการอพยพของนิวรัลเครสเซลล์ ณ เวลาที่สอดคล้องกับการอพยพ ร่วมกับการกระจายตัวที่ผิดปกติใน homozygous rSey ซึ่งพบว่ายังคงมีการกระจายตัวของ HNK-1 อยู่ใน mesenchyme ตามเส้นทางการอพยพของนิวรัลเครสเซลล์ ซึ่งจากรูปแบบการกระจายตัวนี้แสดงให้เห็นว่า HNK-1 น่าจะมีบทบาทในการยับยั้งการเคลื่อนตัวของนิวรัลเครสเซลล์ ผลการทดลองนี้สอดคล้องกับผลการทดลองของกลุ่มนักวิจัยชาวญี่ปุ่นที่ศึกษาบทบาทของ HNK-1 ในจานเพาะเลี้ยง และได้รายงานว่า HNK-1 มีบทบาทในการยับยั้งการอพยพของนิวรัลเครสเซลล์ในจานเพาะเลี้ยง ข้อเสนอแนะสำหรับงานวิจัยในอนาคต : การศึกษารูปแบบการกระจายตัวของ HNK-1 ในการศึกษานี้เป็นเพียงส่วนหนึ่งของการศึกษาบทบาทของ HNK-1 ต่อการอพยพของนิวรัลเครสเซลล์ในตัวอ่อนของหนู ยังต้องทำการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อยืนยันผลการศึกษานี้ แต่เนื่องจากมีกลุ่มนักวิจัยชาวญี่ปุ่นได้ทำการศึกษาครอบคลุมส่วนที่เราควรจะศึกษาต่อไป คือ ส่วนของการศึกษาในจานเพาะเลี้ยง และยีนที่น่าจะเกี่ยวข้อง ตามที่ได้แจ้งปัญหาในรายงานความก้าวหน้าที่ผ่านมา อย่างไรก็ตามการที่เรามี colony ของ rat small eye ในประเทศไทย ทำให้เรามีตัวอย่างที่ดีในการศึกษาความผิดปกติอื่นๆ เช่น การสร้างฟัน Objective : The aim of this study is to compare the distribution patterns of HNK-1 between the SD (Sprague- Dawley) embryos and the homozygous rat small eye (rSey) at the onset of cranial crest cells migration. Methodology: Distribution patterns of HNK-1 in Day-10 wild type and homozygous rSey were studied using immunohistochemical staining with HNK-1 antibody. According to the indistinguishable phenotype of the homozygous rSey at the stage we studied, the methods to separate the homozygotes from their littermates was also performed. The method was detecting the Pax-6 protein by immunohistochemical staining with anti-Pax-6. Results : The results show that in wild type embryos, HNK-1 distributed generally in the mesenchyme along the pathway prior to the onset of cranial crest cell migration and gradually disappeared peripherally whereas the migration progressed. Moreover, the result from homozygous rSey shows that HNK-1 distributed ectopically in the mesenchyme along the migration pathway. Discussion and Conclusions: The distribution pattern of HNK-1 in Day-10 wild type is spatiotemporally coincides with the migration of cranial crest cell. HNK-1 also distributes ectopically in the mesenchyme of the migration pathway in homozygous rSey. Taken these results together, it is likely that HNK-1 act as a barrier for migration of crest cells. This finding is supported by the in vitro study that HNK-1 has inhibitory effect on migration of neural crest cell. Further study: The findings from this study that HNK-1 has inhibitory effects to neural crest cell migration should be confirmed and the gene related to the ectopically expression of HNK-1 in homozygous rSey should be investigated. Unfortunately, the works had already done and published as reported previously. However, the colony of the mutant rat small eye will be a source of valuable samples for studying other developmental abnormalities such as tooth development.