วิทยานิพนธ์ (วศ.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2543

พัฒนาระบบสารละลายน้ำสองวัฏภาคที่มีองค์ประกอบของ โพลีเอททิลีนไกลคอล (PEG) กับโพแทสเซียมฟอสเฟตสำหรับการสกัดแอลคาไลน์โพรทีเอส โดยศึกษาภาวะที่เหมาะสมในการเกิดการแยกวัฏภาค และการสกัดแอลคาไลน์โพรทีเอส ด้วยระบบสารละลายน้ำสองวัฏภาคดังกล่าว ศึกษาการแยกแอลคาไลน์โพรทีเอสจาก Bacillus subtilis NS 99 ในระบบสารละลายน้ำสองวัฏภาคของ PEG ที่มีน้ำหนักโมเลกุลเท่ากับ 1000 กับโพแทสเซียมฟอสเฟต ที่อุณหภูมิห้อง (30+-2ํC) และความดันบรรยากาศ ซึ่งในวัฏภาคบนจะมี PEG อยู่ในปริมาณมาก ส่วนในวัฏภาคล่างจะมีฟอสเฟตอยู่มาก โดยศึกษาอิทธิพลจากปัจจัยต่างๆ เช่น ค่าความเป็นกรด-ด่างของระบบ (pH) ความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์และความยาวของเส้นผูก ที่มีต่อลักษณะของแผนภาพวัฏภาคและค่าสัมประสิทธิ์การแยก (K) ในช่วงความเข้มข้นเริ่มต้นของ PEG1000 เท่ากับ 5-70% (w/w), ที่ pH4 ค่าคือ 7.5, 8.5, 9.5 และ 10.5 และความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ที่ 0, 4, 7 และ 10% (w/w) พบว่า pH มีผลน้อยมากหรือไม่มีผลต่อการแยกวัฏภาค ในขณะที่การเพิ่มความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ จะไปลดความเข้มข้นของ PEG1000 และ/หรือ โพแทสเซียมฟอสเฟตที่ต้องการใช้ในการเกิดการแยกวัฏภาค ส่วนค่า K ของแอลคาไลน์โพรทีเอสพบว่าจะเพิ่มขึ้นเมื่อเพิ่ม pH แต่จะลดลงเมื่อเพิ่มความยาวของเส้นผูก และความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ ภาวะที่เหมาะสมที่สุดต่อการสกัดแอลคาไลน์โพรทีเอส ในช่วงที่ทดลองนี้คือ ระบบที่ประกอบด้วย PEG1000 18.00% (w/w) โพแทสเซียมฟอสเฟต 13.01% (w/w) และโซเดียมคลอไรด์ 0% (w/w) ที่ pH 9.5 อุณหภูมิห้อง (30+-2ํC) และความดันบรรยากาศ ซึ่งให้ค่า K เท่ากับ 20.0 และให้ค่าเปอร์เซ็นต์ผลได้เท่ากับ 95.1