เชื้อมาลาเรียในร่างกายของคนเรานั้นจะมีการแบ่งตัวและเพิ่มจำนวนอย่างรวดเร็วทั้งใน ระยะที่อาศัยอยู่ในเซลล์ตับและระยะในเซลล์เม็ดเลือดแดง ในขณะที่มีการแบ่งตัวเพื่อเพิ่มจำนวน ของเชื้อมาลาเรียนั้นต้องมี DNA replication เกิดขึ้นซึ่งต้องอาศัยการทำงาน ของ DNA helicase ดังนั้นในการศึกษาครั้งนี้ผู้วิจัยจึงมีความประสงค์ที่จะทำงานวิจัยเพื่อให้ทราบถึงความรู้พื้นฐานของ DNA helicase ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่ทำหน้าที่แยกดีเอ็นเอสายคู่(double-stranded DNA) ให้เป็นดีเอ็น เอสายเดี่ยว 2 สาย(single-stranded DNA) ถ้าเราสามารถยับยั้งการทำงานของเอนไซม์เหล่านี้ได้ก็ จะส่งผลทำให้เชื้อมาลาเรียไม่สามารถแบ่งตัวและเจริญเติบโตต่อไป โดยแยกสกัด DNA helicase จาก Plasmodium falciparum(K1 strain)จากการเลี้ยงเชื้อให้ได้ปริมาณมากและนำ nuclear extrat ผ่าน column ชนิดต่างๆและ fast protein liquid chromatography system (FPLC) และตรวจหา DNA helicase activity ซึ่งใช้ [?32P] labelled partial duplex DNA ซึ่งได้แก่ oligonucleotide ที่ anneal อยู่กับ single-stranded circular M13mp19 ซึ่งจะตรวจหา product (labelled oligonucleotide) ได้โดยใช้ 20% nondenaturing polyacrylamide gel แล้วนำไปทำ autoradiography แล้ววัดปริมาณของ DNA unwinding หลังจากที่ได้ทำการแยกสกัดเอนไซม์ DNA helicase ที่ผ่านมาพบว่ามี DNA helicase อยู่อย่างน้อย 2 ชนิดตามคุณสมบัติของทิศทางการ ทำงานของเอนไซม์ (directionality) คือ 5'-3' และ 3'-5' เอนไซม์ทั้งสองชนิดนี้มีความสามารถใน การใช้ partial duplex DNA และ fork-liked substrate ที่แตกต่างกันแต่ช้ blunt-ended substrate ไม่ได้เหมือนกัน เมื่อทดสอบกับ DNA helicase inhibitors ชนิดต่างๆพบว่า 5'-3' และ 3'-5' DNA helicses มีIC50 ของยาต่างๆคือ aclarubicin = 4x 10-6และ 9x 10-6 M daunorubicin=7.5x 10-6 และ 2x 10-6 M doxorubicin = 3.6 x 10-6 และ 8 x 10-6 M ตามลำดับ แต่ DNA binders ที่ สังเคราะห์ขึ้นมาใหม่ประมาณ 6 ชนิดไม่มีผลต่อการทำงานของเอนไซม์ของเอนไซม์ทั้งสอง (IC50 > 10-5 M) นอกจากนั้นยังพบว่ายังมี DNA helicase ใน 80% ammonium sulfate อีกหนึ่งชนิดซึ่ง ต้องทำให้บริสุทธิ์และทำการศึกษาต่อไป ส่วนของ 55% ammonium sulfate มี DNA helicases อีก อย่างน้อย 2 ชนิดดังนั้นในอนาคตควรจะมีการศึกษาและจำแนกชนิดของเอนไซม์เหล่านี้เพิ่มเติม เพื่อที่จะได้ข้อมูลที่สมบูรณ์ที่สุดเกี่ยวกับ DNA helicases ในเชื้อมาลาเรียฟัลซิปารั่ม Most of antimalarial drugs is rapidly losing their effectiveness. There is an urgent need for new antimalarial drugs so intensified investigation of potential target enzymes should be performed. Since, DNA helicases can catalyze the unwinding of double stranded DNA to provide single stranded templates for DNA replication, repair and recombination so DNA helicases may serve as possible target enzymes combating malaria. In this study, there was at least two types of DNA helicases were isolated and purified from Plasmodium falciparum namely 5'-3' and 3'-5' DNA helicases. 5'-3' DNA helicase was isolated from Plasmodium falciparum (K1 strain) then various columns were used to puriy the isolated enzymes under fast protein liquid chromatography system. DNA helicase activity was detected by measuring the unwinding of 32P-labeled partial duplex DNA. The product was separated by 20% non-denaturing gel electrophoresis and visualized by auto-radiography. 5'-3' and 3'-5' DNA helicases prefered differently in using partial dupex DNA and fork-liked DNA as substrates however both of them showed the same property of their inability to unwind blunt-ended duplex DNA. DNA helicase inhibitors such as aclarubicin, daunorubicin, and doxorubicin, were tested against P. falciparum 5’-3’ and 3'-5' DNA helicases and IC50 values were 4.0x10-6 and 9.0x10-6 for aclarubicin, 7.5x10-6 and 2x10-6 M for daunorubicin, 3.6x10-6 and 8x10-6 M for doxorubicin respectively. Both 5'-3' and 3'-5' DNA helicases were not inhibited by six synthetic DNA binder compounds at 10 -5 M. In addition, one type of DNA helicase in 80% ammonium sulfate precipitation and two more types of enzymes were found in 55% ammonium sulfate precipitation but have not yet been purified and characterized therefore purification and characterization of three unknown enzymes should be done in order to obtain new knowledge and clearly understand types and important roles of all types of DNA helicases in P. falciparum.