ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

ระบบการถ่ายยีนที่เหมาะสมสำหรับถั่ว ~iStylosanthes hamata~i พันธุ์ Verano

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : ระบบการถ่ายยีนที่เหมาะสมสำหรับถั่ว ~iStylosanthes hamata~i พันธุ์ Verano
นักวิจัย : กิริยา สังข์ทองวิเศษ
คำค้น : -
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2546
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1162546000509
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อถั่ว ~iStylosanthes hamata~i พันธุ์ Verano โดยการชักนำให้เกิด compact callus เพื่อใช้เป็นเนื้อเยื่อสำหรับการถ่ายยีน เริ่มจากการเลี้ยงเนื้อเยื่อส่วน ใบ ใบเลี้ยง และ hypocotyl บนอาหารสูตร MS ที่เติม 2,4-D หรือ NAA ความเข้มข้น0 5 10 15 และ 20 มิลลิกรัมต่อลิตร พบว่า อาหารสูตร MS ที่เติม 2,4-D ความเข้มข้น5 มิลลิกรัมต่อลิตร เป็นสูตรอาหารที่เหมาะสมสำหรับการชักนำให้เกิด compact callusมากที่สุด โดยให้น้ำหนักสดเฉลี่ย 0.26 กรัมต่อชิ้นพืช และเนื้อเยื่อส่วนใบมีแนวโน้มในการชักนำให้เกิด compact callus ได้มากกว่าเนื้อเยื่อส่วน ใบเลี้ยง และ hypocotyl การทดลองชักนำให้เกิดยอดบนอาหารสูตร MS ที่เติม BA หรือ kientin ความเข้มข้นต่างๆ เป็นเวลา45 วัน พบว่า อาหารสูตร MS ที่เติม BA ความเข้มข้น 15 มิลลิกรัมต่อลิตร ชักนำให้เกิดยอดได้มากที่สุด โดยมีจำนวนยอดเฉลี่ย 9.0 ยอดต่อชิ้นแคลลัส และสามารถชักนำให้เกิดรากได้40 เปอร์เซ็นต์ บนอาหารสูตร MS ที่เติม IBA ความเข้มข้น 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร ทดลองถ่ายยีนเข้าสู่แคลลัสถั่ว ~iS. hamata~i 2 วิธี คือ การใช้เครื่องยิงอนุภาคชนิดPDS-1000/He เพื่อถ่าย พลาสมิด pGN ที่มียีน ~igus~i เป็นยีนรายงานผล และมียีน ~ihpt~i II เป็นยีนคัดเลือก และวิธีการใช้เชื้อ ~iAgrobacterium tumefaciens~i สายพันธุ์EHA105 ที่มีพลาสมิด pCAMBIA1301 ที่มียีน ~igus~i เป็นยีนรายงานผลและมียีน~inpt~i เป็นยีนคัดเลือก เป็นพาหะ พบว่า การถ่ายยีนโดยใช้เครื่องยิงอนุภาคนั้น การใช้แรงดันก๊าซฮีเลียมขนาด 1,100 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว ร่วมกับระยะห่างของเนื้อเยื่อเป้าหมาย6 เซนติเมตร ให้จำนวนจุดสีน้ำเงินมากที่สุด 6.4 จุดต่อแคลลัส และการถ่ายยีนโดยใช้เชื้อ ~iA. tumefaciens~i ใช้สารแขวนลอยเชื้อเจือจาง 1:50 ร่วมกับการทำบาดแผลโดยใช้คลื่นเสียงเป็นเวลา 5 วินาที แล้ว co-cultivation เป็นเวลา 2 วัน ให้จำนวนจุดสีน้ำเงิน4.0 จุดต่อแคลลัส จากนั้นยืนยันการเข้ารวมตัวของยีนที่ถ่ายเข้าไปกับจีโนมของถั่ว~iS. hamata~i โดยเทคนิค Southern PCR hybridization และ dot blot hybridizationพบว่า มีการเข้ารวมตัวของยีนรายงานผลและยีนคัดเลือกในจีโนมของถั่ว ~iS. Hamata~i

บรรณานุกรม :
กิริยา สังข์ทองวิเศษ . (2546). ระบบการถ่ายยีนที่เหมาะสมสำหรับถั่ว ~iStylosanthes hamata~i พันธุ์ Verano.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
กิริยา สังข์ทองวิเศษ . 2546. "ระบบการถ่ายยีนที่เหมาะสมสำหรับถั่ว ~iStylosanthes hamata~i พันธุ์ Verano".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
กิริยา สังข์ทองวิเศษ . "ระบบการถ่ายยีนที่เหมาะสมสำหรับถั่ว ~iStylosanthes hamata~i พันธุ์ Verano."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2546. Print.
กิริยา สังข์ทองวิเศษ . ระบบการถ่ายยีนที่เหมาะสมสำหรับถั่ว ~iStylosanthes hamata~i พันธุ์ Verano. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2546.