ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การย่อยสลายน้ำมันปาล์มโอเลอีนในตัวทำละลายอินทรีย์โดยใช้เอนไซม์ไลเปสตรึงรูป

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การย่อยสลายน้ำมันปาล์มโอเลอีนในตัวทำละลายอินทรีย์โดยใช้เอนไซม์ไลเปสตรึงรูป
นักวิจัย : ฉัตรชัย สังข์ผุด
คำค้น : -
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2542
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=58361
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

การคัดเลือกเอนไซม์ไลเปสทางการค้า 5 ชนิดจาก ~iCandida rugosa~i (ไลเปส OF), ~iCandida lipolytica~i (ไลเปส L), ~iPseudomonas sp.~i (ไลเปส PS), ~iPseudomonas fluorescens~i (ไลเปส AK) และ ~iRhizopus oryzae~i (ไลเปส FAP-15) เพื่อย่อยสลายน้ำมันปาล์มโอเลอีนในตัวทำละลายอินทรีย์โดยใช้ two-phase emulsion system พบว่า ไลเปส OF มีค่ากิจกรรมจำเพาะต่อการย่อยสลายน้ำมันปาล์มสูงสุด (209.1 ยูนิตต่อมิลลิกรัม โปรตีน) โดยให้เปอร์เซนต์การย่อยสลายสูงกว่าร้อยละ 94 เมื่อตรึงไลเปส OF โดยใช้วิธีการยึด เกาะกับตัวพยุง 4 ชนิด คือ แอคคูเรล, Amberlite XAD-4, DEAE-Sephadex A50 และ polyvinylchloride (PVC) พบว่า การยึดเกาะแบบแลกเปลี่ยนประจุระหว่างเอนไซม์กับ DEAE- Sephadex A50 เกิดการจับอย่างสมบูรณ์ โดยให้ค่ากิจกรรมที่ยึดเกาะสูงสุดร้อยละ 97 แม้ว่า การยึดเกาะแบบดูดซับทางกายภาพระหว่างเอนไซม์กับแอคคูเรลเกิดการจับกันอย่างสมบูรณ์ แต่มี กิจกรรมที่ยึดเกาะเพียงร้อยละ 20.5 สำหรับการยึดเกาะบน Amberlite XAD-4 และ PVC พบว่า เอนไซม์จับกับตัวพยุงมากกว่าร้อยละ 50 แต่มีกิจกรรมที่ยึดเกาะเพียงร้อยละ 0.63 และ 0.12 ตามลำดับ ระยะเวลา อุณหภูมิ และความเข้มข้นของเอนไซม์ที่เหมาะสมต่อการตรึงบนแอคคูเรล คือ 8 ชั่วโมง 25 องศาเซลเซียส และ 0.4 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร สำหรับสภาวะที่เหมาะสมต่อ การตรึงบน DEAE-Sephadex A50 คือ 24 ชั่วโมง 4 องศาเซลเซียส และ 0.4 มิลลิกรัมต่อ มิลลิลิตร ไลเปส OF อิสระมีค่า K(,m) เท่ากับ 156 มิลลิโมลาร์ และอัตราเร็วสูงสุดของปฏิกิริยา (V(,max)) เป็น 3.3x10(4) ไมโครโมลต่อนาทีต่อกรัม เมื่อตรึงเอนไซม์ไลเปส OF บนแอคคูเรล ทำให้ค่า K(,m) เพิ่มขึ้น 5 เท่า แต่ไม่มีผลต่อ V(,max) สำหรับการตรึงเอนไซม์บน DEAE- Sephadex A50 ทำให้ค่า K(,m) เพิ่มขึ้น 2 เท่า และค่า V(,max) ลดลง 5 เท่า ไลเปส OF ตรึงรูปมีพีเอชและอุณหภูมิที่เหมาะสมต่อการทำงานเท่ากับไลเปสอิสระ (พีเอช 6.5-7.5 และ 35 องศาเซลเซียส) อย่างไรก็ตามเอนไซม์ตรึงรูปมีความคงตัวต่อพีเอชในช่วงที่กว้างและอุณหภูมิ ที่สูงกว่า จากการศึกษาสภาวะที่เหมาะสมต่อการย่อยสลายน้ำมันปาล์มโอเลอีนในตัวทำละลายอินทรีย์ โดยใช้เอนไซม์ไลเปส OF ตรึงรูป พบว่า ตัวทำละลายอินทรีย์ที่เหมาะสมคือไอโซออกเทน ความ เข้มข้นสูงสุดของน้ำมันปาล์มร้อยละ 60 อัตราส่วนที่เหมาะสมระหว่างน้ำกับสับสเตรทคือ 1 : 2 และความเข้มข้นของกลีเซอรอลที่สูง (40 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร) มีผลให้เปอร์เซนต์การย่อยสลาย ลดลงเล็กน้อย การผลิตกรดไขมันอย่างต่อเนื่องจากน้ำมันปาล์มโอเลอีนโดยเอนไซม์ไลเปส OF ตรึงรูป ในถังปฏิกรณ์แบบคอลัมน์ ((+,ฦ) 0.62x20 ซม.) โดยใช้เอนไซม์ประมาณ 1000 ยูนิต ที่ อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส พบว่า กรณีการใช้เอนไซม์ที่ถูกตรึงกับแอคคูเรลขนาดเล็กกว่า 200 ไมโครเมตร คอลัมน์เกิดการอุดตัน เมื่อผสมเอนไซม์ตรึงรูปกับแอคคูเรลขนาดที่โตกว่า (1000-1500 ไมโครเมตร) ในอัตราส่วน 2:1 ก่อนบรรจุในคอลัมน์ แล้วป้อนสับสเตรท (น้ำมันปาล์มโอเลอีนร้อยละ 60 ในไอโซออกเทน) และบัฟเฟอร์ (100 มิลลิโมลาร์ tris/ maleate buffer, พีเอช 7.0) อัตราส่วน 2:1 แยกผ่านปั๊ม 2 ตัว ด้วยอัตราการไหลรวม 0.06 มิลลิลิตรต่อนาที โดยให้มีการไหลวนของบัฟเฟอร์ที่ใช้แล้วเพื่อเพิ่มความเข้มข้นของ กลีเซอรอล พบว่าคอลัมน์ที่บรรจุด้วยไลเปส OF ที่ถูกตรึงบนแอคคูเรลมีอัตราการผลิตกรดไขมัน มากกว่า 7,800 ไมโครโมลต่อชั่วโมง ที่เวลา 300 ชั่วโมง และเอนไซม์มีค่าครึ่งชีวิตในการ ทำงาน 1000 ชั่วโมง แต่การใช้ไลเปส OF ที่ตรึงกับ DEAE-Sephadex A50 เพื่อผลิตกรดไขมัน ภายใต้สภาวะเดียวกันเป็นเวลา 100 ชั่วโมง พบว่าอัตราการผลิตกรดไขมันลดลงจาก 8,000 ไมโครโมลต่อชั่วโมงเหลือ 3,500 ไมโครโมลต่อชั่วโมง และมีค่าครึ่งชีวิตในการทำงานเพียง 66 ชั่วโมง

บรรณานุกรม :
ฉัตรชัย สังข์ผุด . (2542). การย่อยสลายน้ำมันปาล์มโอเลอีนในตัวทำละลายอินทรีย์โดยใช้เอนไซม์ไลเปสตรึงรูป.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ฉัตรชัย สังข์ผุด . 2542. "การย่อยสลายน้ำมันปาล์มโอเลอีนในตัวทำละลายอินทรีย์โดยใช้เอนไซม์ไลเปสตรึงรูป".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
ฉัตรชัย สังข์ผุด . "การย่อยสลายน้ำมันปาล์มโอเลอีนในตัวทำละลายอินทรีย์โดยใช้เอนไซม์ไลเปสตรึงรูป."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2542. Print.
ฉัตรชัย สังข์ผุด . การย่อยสลายน้ำมันปาล์มโอเลอีนในตัวทำละลายอินทรีย์โดยใช้เอนไซม์ไลเปสตรึงรูป. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2542.