NS2B-NS3 ซึ่งเป็นโปรตีนที่มิใช่ส่วนประกอบทางโครงสร้างของเชื้อไวรัส dengue เป็นส่วนที่จำเป็นต่อการตัดชิ้นส่วนโปรตีนตั้งต้นของเชื้อไวรัส โดยพบว่าส่วนของโปรตีน NS2B ที่จำเป็นต่อการกระตุ้นการทำงานของโปรตีเอส NS3 คือช่วงกลางของโปรตีนที่เป็น ส่วน hydrophilic ขนาดอย่างน้อย 40 กรดอะมิโน ในการศึกษานี้ได้ตรวจสอบถึงบทบาทของ กรดอะมิโนของ NS2B ที่สันนิษฐานว่ามีความสำคัญต่อการกระตุ้นการทำงานของโปรตีเอส NS3 โดยวิธี site-directed mutagenesis ในการนี้ได้สร้างโปรตีนลูกผสมที่ประกอบด้วย ส่วนที่เป็น hydrophilic ขนาด 47 กรดอะมิโนของโปรตีน NS2B เชื่อมต่อกับส่วนที่เป็น โปรตีเอสของโปรตีน NS3 โดยใช้วิธี SOE-PCR เพื่อศึกษาบทบาทและหน้าที่ของกรดอะมิโน ของ NS2B ที่คาดว่ามีความสำคัญต่อการกระตุ้นการทำงานของโปรตีเอส NS3 กรดอะมิโน ที่ตำแหน่ง 71 75 และ 79 ได้ถูกเปลี่ยนให้เป็น alanine และกรดอะมิโน serine ลำดับที่ 135 (catalytic serine) ของโปรตีเอส NS3 ได้ถูกเปลี่ยนเป็น alanine เพื่อเป็น negative control เมื่อโปรตีนลูกผสมได้โคลนเข้าสู่ พลาสมิด pTrcHisA โดยให้เชื่อมต่อกับ polyhistidine tag ซึ่งเมื่อโปรตีนได้ถูกทำให้บริสุทธิ์โดยวิธี affinity chromatography และเมื่อศึกษาปฏิกิริยาการ autocatalysis พบว่า โปรตีนกลายพันธุ์ S71A L75A I79A และ L75A/I79A แสดงการ autocatalysis เพียง 90.2% 71.6% 70.9% และ 11.4% เมื่อเทียบ กับโปรตีนต้นแบบ ในขณะที่โปรตีนกลายพันธุ์ S135A ไม่เกิดการ autocatalysis นอกจากนี้เมื่อศึกษาดูปฏิกิริยาการย่อยต่อ GRR-MCA และ RVRR-MCA ซึ่งติดฉลาก ด้วยสารเรืองแสงพบว่าปฏิกิริยาต่อการย่อยต่อ GRR-MCA ให้ค่า ~ik~i(,cat) ของ L75A และ I79A ลดลงอย่างมาก (6.9x10(-4) และ 1.9x10(-4) sec(-1)) เมื่อเทียบกับของ NS2B(H)-NS3(pro) ในขณะที่ค่า ~iK~i(,m) (176 (+,m)M สำหรับ L75A และ 155 (+,m)M สำหรับ I79A) ใกล้เคียงกับของ NS2B(H)-NS3(pro) (147 (+,m)M) และพบว่าในสภาวะ การทดลองที่ใช้นี้โปรตีน L75A/I79A ไม่แสดงปฏิกิริยาต่อ GRR-MCA แต่แสดงปฏิกิริยาต่อ RVRR-MCA ได้ ผลงานวิจัยนี้ได้แสดงให้เห็นว่ากรดอะมิโน Leu-75 และ Ile-79 ของ NS2B ซึ่งมีความอนุรักษ์ในไวรัส dengue ทั้ง 4 สายพันธุ์นั้นมีบทบาทที่สำคัญต่อการกระตุ้น การทำงานของโปรตีเอส NS3