การศึกษาเอนไซม์ phytase ที่ทนร้อนที่ได้มาจากแบคทีเรียเป็นที่น่าสนใจโดยเฉพาะ การนำไปใช้ประโยชน์ในอาหารสัตว์ เอนไซม์ phytase นี้เป็นเอนไซม์ที่สำคัญซึ่งเป็นเอนไซม์ ที่เพิ่มการใช้ phytin-phosphate ซึ่งปรากฏอยู่ทั่วไปในเมล็ดพืชทำให้ลด phosphate ที่ระบายออกมากับมูลสัตว์ลงสู่สิ่งแวดล้อมอีกด้วย ความทนร้อนของเอนไซม์เป็นปัจจัยที่ สำคัญมากในกระบวนการผลิตอาหารสัตว์ที่มีการใช้ความร้อนสูงโดยเฉพาะขั้นตอนการอัดอาหาร สัตว์เป็นเม็ด ในการศึกษานี้แบคทีเรียที่ชอบร้อน ~iBacillus stearothermophilus~i T2 ได้ถูกแยกขึ้นและพบว่าสามารถผลิตเอนไซม์ phytase ได้ เชื้อนี้สามารถเจริญเติบโตได้ดี ที่อุณหภูมิ 60(+,ฐ)C และที่อุณหภูมิ 37(+,ฐ)C สามารถเจริญเติบโตได้เล็กน้อย เอนไซม์ ของมันมีประสิทธิภาพสูงที่อุณหภูมิ 65(+,ฐ)C การคัดแยกและการทำให้เอนไซม์บริสุทธิ์โดยใช้ Ammonium sulfate fractionation และ Ion exchange chromatography นั้นไม่ ประสบผลสำเร็จ ซึ่งพบว่าเชื้อสร้างเอนไซม์ออกมาน้อยมากในน้ำเลี้ยงเชื้อและคาดว่าเอนไซม์ มีคุณสมบัติที่ชอบน้ำมากเหมือนเอนไซม์ phytase ทั่วๆ ไป การทำให้เอนไซม์เข้มข้นขึ้นด้วย การทำ lyophilization ไม่ได้ผลเพราะจะจับเป็นก้อนกลายเป็นโปรตีนที่ไม่สามารถละลาย กลับมาได้อีก การมีปริมาณเอนไซม์น้อยมากอาจเป็นเหตุผลหนึ่งที่ทำให้การตกตะกอน ด้วย Ammonium sulfate และการแยกด้วย Ion exchange chromatography ไม่ได้ผล วิธีหนึ่งที่นำไปสู่การศึกษาเอนไซม์ชนิดนี้คือการโคลนนิ่งเข้าไปในแบคทีเรีย ~iE. coli~i และศึกษาการแสดงออกของยีนของ chromosomal DNA ที่มียีน phytase อยู่ โดยการใช้ primer ที่ออกแบบมาจากลำดับของนิวคลีโอไทด์ที่เป็นยีน conserved ของเอนไซม์ phytase ที่บันทึกใน GenBank และไม่เหมือนกับเอนไซม์ phosphatase เมื่อทำ PCR จะได้ชิ้นส่วน ของยีน 571 คู่เบส ต่อมายีนส่วน 571 คู่เบสได้ถูกนำมาทำ PCR เพื่อติดฉลากและใช้เป็นตัว ติดตามสำหรับใช้ในการคัดเลือก genomic library โดยมีขนาดของชิ้นส่วนติดฉลากเท่ากับ 546 คู่เบส จากการคัดเลือก clone จำนวน 1,000 clones พบว่ามี 2 clones ที่เหมือนกัน จึงได้เลือก clone ชื่อ K2 ที่มี DNA ขนาด 6.5 กิโลเบสที่ให้ผลบวกชัดเจนเมื่อตรวจสอบ ด้วย colony hybridization และ Southern blot และจากการวิเคราะห์โดยการหาลำดับ DNA ของชิ้นส่วนที่ประกอบด้วยส่วนที่เหมือนกันของ DNA ที่ติดฉลากและส่วนใกล้เคียง พบว่า จากลำดับ DNA ทั้งหมด 2,450 คู่เบสจะมี ORF ที่มีขนาด 1,575 คู่เบสซึ่งได้ถูกจำแนกว่า เป็นเอนไซม์ phytase ซึ่งมี deduced amino acid 525 ตัวและมีมวลโมเลกุล 58,030 Daltons