ผลการเพาะเชื้อแบคทีเรียจากเสมหะในผู้ป่วยโรคปอดบวมจากเสมหะที่ไม่มีคุณภาพ ไม่สามารถแยกเชื้อก่อโรคได้เพราะการปนเปื้อนของเชื้อแบคทีเรียประจำถิ่นในช่องปาก ทำให้ได้ผลการเพาะเชื้อที่ไม่ถูกต้องเกิดความสับสนแก่แพทย์และทำให้มีผลต่อการรักษา ผู้ป่วย ปัจจุบันได้มีผู้เสนอเกณฑ์ในการคัดเลือกเสมหะที่เหมาะสมสำหรับการเพาะเชื้อ แบคทีเรียเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของแบคทีเรียดังกล่าวหลายวิธี วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้เพื่อเลือกและหาวิธีที่มีการกำหนดเกณฑ์ในการ เลือกเสมหะเพื่อเพาะเชื้อแบคทีเรียที่เหมาะสมโดยศึกษาเสมหะของผู้ป่วยโรคปอดบวม จำนวน 300 ตัวอย่างนำมาย้อมสีแกรมตรวจดูเม็ดเลือดขาว (WBC) และเซลล์เยื่อบุ (SEC) โดยใช้ กล้องจุลทรรศน์กำลังขยาย 100 เท่าโดยใช้ทั้งหมด 9 วิธีในการคัดเลือกเสมหะที่เหมาะสม ในการเพาะเชื้อแบคทีเรียเสร็จ และนำเสมหะไปเพาะเชื้อแบคทีเรีย จากนั้นศึกษาวิเคราะห์ และเปรียบเทียบผลที่ได้จากทั้ง 9 วิธี ผลการศึกษาพบว่าวิธี ASM (วิธีที่ 2), Heineman and Radano, และ Van Scoy ให้ค่าประสิทธิภาพของวิธีการทดสอบที่ต่ำเพียงร้อยละ 56 - 57 ขณะที่วิธีของ ASM (วิธีที่ 1), Bartlett, Barry, Murray and Washington, Geckler, และวิธีที่ประยุกต์ขึ้น มีค่าถึง ร้อยละ 67 - 69 แต่เมื่อดูจำนวนของการพบเชื้อแบคทีเรียที่เป็นสาเหตุในการ ติดเชื้อระบบทางเดินหายใจที่เพาะได้จากตัวอย่างเสมหะที่ถูกตัดสินว่าไม่เหมาะสำหรับการ เพาะเชื้อโดยวิธีของ Murray and Washington พบจำนวนเชื้อก่อโรคสูงถึง ร้อยละ 27.5 นอกจากนี้วิธี ASM (วิธีที่ 1), และวิธีของ Bartlett, และ Barry มีขั้นตอนในการเลือก เสมหะที่ยุ่งยาก เพราะต้องอาศัยการคำนวณค่า Q score และนับจำนวนของเซลล์ SEC รวมทั้งเซลล์ WBC เป็นจำนวนมากจึงไม่เหมาะกับการนำมาใช้ในงานประจำวัน ดังนั้นวิธี ที่เหมาะสมในการเลือกเสมหะเพื่อเพาะเชื้อแบคทีเรียคือวิธีของ Geckler ซึ่งยอมรับ เมื่อเสมหะมีจำนวนของเซลล์ SEC น้อยกว่า 25 เซลล์ เมื่อดูด้วยกล้องจุลทรรศน์กำลังขยาย 100 เท่า รวมทั้งถึงวิธีที่ประยุกต์ขึ้น โดยยอมรับเสมหะที่มีเซลล์ SEC จำนวนน้อยกว่า 25 เซลล์ และมีเซลล์ WBC จำนวนมากกว่า 25 เซลล์ เมื่อดูด้วยกล้องจุลทรรศ์กำลังขยาย 100 เท่า ซึ่งเป็นวิธีที่ง่ายและสะดวกรวมทั้งได้ผลการเพาะเชื้อที่ถูกต้อง การย้อม แกรมเสมหะสามารถใช้วินิจฉัยโรคปอดบวมได้อย่างรวดเร็ว เพราะได้ผลตรงกับการเพาะเชื้อ ไม่มีความจำเป็นต้องทำ m-AFB ร่วมด้วยในงานประจำวัน ควรเลือกทำโดยดูจากการวินิจฉัย เบื้องต้น และผลการย้อมสี แกรมก่อน