การศึกษาถึงผลกระทบต่อระบบประสาทส่วนกลางโคลิเนอร์จิก เมื่อได้รับนิโคติน และอะไครโลไนไตรล์เป็นระยะเวลานาน พบว่าหนูทดลองที่ถูกฉีดด้วยสารนิโคตินเข้าใต้ชั้น ผิวหนังในปริมาณ 0.1 และ 0.75 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม, 5 วันต่อสัปดาห์ เป็นเวลานาน 4 และ 8 สัปดาห์ จะเห็นการเปลี่ยนแปลงพฤติกรรมการเคลื่อนไหวที่ถูกบันทึกเป็นระยะทาง ที่หนูเคลื่อนที่เป็นเซนติเมตร, จำนวนครั้งที่หนูเคลื่อนที่ ซึ่งสามารถวัดได้ทั้งใน แนวตั้ง แนวนอนและระยะเวลาที่ใช้ และพฤติกรรมการหมุนตัว ซึ่งพบว่าการเปลี่ยนแปลง เหล่านี้จะขึ้นอยู่กับปริมาณและระยะเวลาที่หนูได้รับสารนิโคติน โดยนิโคติน 0.1 มิลลิกรัม ต่อกิโลกรัมจะกระตุ้นระบบพฤติกรรมการเคลื่อนไหวของหนูขาวและผลกระตุ้นจะสูงขึ้นเมื่อได้ รับสารเป็นระยะเวลานาน นิโคตินขนาดสูงจะเห็นผลน้อยกว่าขนาดต่ำ หนูที่ได้รับนิโคติน 0.75 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม ในครั้งแรก ๆ จะแสดงอาการทางระบบประสาทมีการเดินเซและ หางชี้ นอกจากนั้นหนูจะมีน้ำหนักตัวเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกลุ่มกลุ่ม ควบคุมหลังจากหยุดได้รับสารนิโคติน อะไครโลไนไตรล์ เป็นสารเคมีที่มีผลกระทบต่อระบบประสาทโคลิเนอร์จิก มีผลลด พฤติกรรมการเคลื่อนไหวของหนูขาวในลักษณะคล้ายกับหนูที่ได้รับไฟโซสติกมีน หนูที่ได้รับ การฉีดสารอะไครโลไนไตรล์ 25 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม เข้าใต้ผิวหนังระยะเวลา 7 วัน แล้วได้รับนิโคตินในวันที่ 7 จะมีพฤติกรรมการเคลื่อนที่ทั้งแนวตั้ง แนวนอน และการหมุน เพิ่มขึ้น นอกจากนี้ยับพบว่าหนูที่ได้รับการฉีดสารอะไครโลไนไตรล์มา 8 สัปดาห์ จะมี พฤติกรรมการเคลื่อนไหวที่สูงกว่าปกติหลังจากได้รับการฉีดอะโตรปีนเข้าใต้กล้ามเนื้อ ในวันสุดท้ายของการฉีดอะไครโลไนไตรล์ การศึกษาโดยใช้อะไครโลไนไตรล์ 1 มิลลิกรัม ต่อกิโลกรัม ฉีดเข้าใต้ชั้นผิวหนัง ไฟโซสติกมีน 0.5 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม และอะโตรปีน 10 มิลลิกรัมต่อกิโลกรัม ฉีดเข้าใต้กล้ามเนื้อของหนูที่ได้รับสารนิโคตินมาระยะเวลา 4 และ 8 สัปดาห์ เพื่อทดสอบผลกระทบต่อการเปลี่ยนแปลงหน้าที่ของระบบประสาทส่วนกลาง โคลิเนอร์จิก พบว่าหนูที่ได้รับนิโคตินในปริมาณต่ำแต่ระยะเวลานาน จะไม่มีผลต่อการเปลี่ยน แปลงระบบพฤติกรรมการเคลื่อนไหวหลังจากได้รับอะไครโลไนไตรล์และไฟโซสติกมีน แต่หนูที่ ได้รับการฉีดนิโคตินปริมาณสูงและระยะเวลานาน จะเพิ่มพฤติกรรมทางการเคลื่อนไหวทั้งระยะ ทางและจำนวนครั้งของหนูขาว ขณะที่ไม่เห็นผลการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ในหนูที่ได้รับนิโคติน ทั้งปริมาณต่ำและปริมาณสูงเมื่อให้อะโตรปีน ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นถึงการเปลี่ยนแปลงของระบบประสาทส่วนกลางโคลิเนอร์จิก ที่เกี่ยวข้องกับพฤติกรรมการเคลื่อนไหวของหนูที่ได้รับสารนิโคตินและสารอะไตรโลไนไตรล์ เป็นระยะเวลานาน การเปลี่ยนการทำงานของระบบประสาทนี้เมื่อได้รับสารนิโคตินเป็นเวลานาน ดูเหมือนจะมีความสัมพันธ์กับตัวรับนิโคตินิกมากกว่ามัสคารินิก และสามารถใช้การทดสอบ นี้เพื่อตรวจวัดการเปลี่ยนแปลงของระบบประสาทส่วนกลางนิโคตินิกและมัสคารินิกระหว่างการ สัมผัสสารเคมีในสิ่งแวดล้อมที่มีผลต่อระบบประสาทโคลิเนอร์จิก