ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การศึกษาค้นหา EPITOPES ซึ่งจำเพาะต่อโรคโดยอาศัยห้องสมุดเปปไทด์ชนิดรวมซึ่งสร้าง ในฟาจแบคทีเรีย

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การศึกษาค้นหา EPITOPES ซึ่งจำเพาะต่อโรคโดยอาศัยห้องสมุดเปปไทด์ชนิดรวมซึ่งสร้าง ในฟาจแบคทีเรีย
นักวิจัย : วราภรณ์ เกษกาญจน์
คำค้น : PHAGE DISPLAY , DENGUE , EPITOPE
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2542
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=44204
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

ปัจจุบันเทคโนโลยีการแสดงออกของเปปไทด์บนผิวของไวรัสแบคทีเรียเป็นวิธีการที่มี ประโยชน์มาก ทำให้สามารถประยุกต์ใช้ในการสำรวจและค้นหาเปปไทด์ที่มี epitopes ที่มี ความจำเพาะต่อแอนตี้บอดี้ได้จากความหลากหลายในห้องสมุดเปปไทด์ซึ่งสร้างแสดงออกบนผิว ของไวรัสแบคทีเรีย โดยใช้หลักการของการจับกันอย่างจำเพาะระหว่างแอนติเจนและแอนตี้บอดี้ การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้เทคโนโลยีดังกล่าวในการค้นหาลักษณะของ epitopes ที่จำเพาะต่อโรค ผู้วิจัยได้แสดงให้เห็นศักยภาพและความสามารถของเทคโนโลยีนี้ในการค้นหา epitopes โดยการสำรวจห้องสมุดเปปไทด์ใน bacteriophage ด้วยโมโนโคนัลแอนตี้บอดี้ ซึ่งจำเพาะต่อเปปไทด์ซึ่งมีลำดับ CYDVPDYASL เปปไทด์ดังกล่าวเป็นแอนติเจนที่สำคัญต่อ การจับกลุ่มของเม็ดเลือดแดงในไวรัสไข้หวัดใหญ่ หลังจากผ่านขบวนการคัดแยกไวรัสแบคทีเรีย ให้บริสุทธิ์โดยวิธี biopanning เป็นจำนวนสามรอบแล้ว ผู้วิจัยได้ทำการคัดเลือก bacteriophage ซึ่งมีเปปไทด์ที่สามารถจับกับโมโนโคนัลแอนตี้บอดี้ดังกล่าว และทำการวิเคราะห์เปปไทด์ที่ได้ โดยการหาลำดับเบส ผลการวิเคราะห์โคลนซึ่งให้ผลบวกกับโมโนโคนัลแอนตี้บอดี้ด้วยการย้อมทาง อิมมิวโน (immunostaining) จำนวน 20 โคลน พบว่าโคลนเหล่านี้มีลำดับกรดอะมิโนที่มีความ คล้ายคลึงกันคือ DXPDYAS และมีความใกล้เคียงกับลำดับของเปปไทด์ที่ใช้ในการสร้างโมโนโคนัล แอนตี้บอดี้ ผู้วิจัยได้นำชุดของโมโนโคนัลแอนตี้บอดี้ต่อเชื้อไวรัสไข้เลือดออกมาทำการค้นหา epitopes โดยใช้เทคโนโลยี phage display หลังจากทำ biopanning 2 รอบเพื่อแยก bacteriophage ผู้วิจัยได้คัดเลือก bacteriophages 5 โคลนซึ่งให้ผลบวกทางอิมมิวโนต่อ โมโนโคนัลแต่ละชนิดที่นำมาศึกษา ผลการทดลองพบว่าโคลนของ bacteriophages ที่ได้จากการใช้ โมโนโคนัลแอนตี้บอดี้ชนิด 1B2 (mAb1B2) มีลำดับกรดอะมิโน SAWGTAKET และ SSWGRPRIE ซึ่งไปตรงกับลำดับกรดอะมิโนตำแหน่งที่ 924 ถึง 928 ของ polyprotein หรือกรดอะมิโน ตำแหน่งที่ 118 ถึง 122 ของ non-structural protein (NS-1) ในไวรัสไข้เลือดออก ทุกชนิด ในขณะที่ bacteriophages ที่ให้ผลบวกทางอิมมิวโนกับโมโนโคนัลแอนตี้บอดี้ชนิด 1F1 (mAb1F1) มีลำดับกรดอะมิโนแตกต่างกันทั้ง 5 ชนิด และโคชนที่ให้ผลบวกกับโมโนโคนัลแอนตี้บอดี้ ชนิด 3H5 (mAb3H5) ทั้งหมดมีลำดับกรดอะมิโน KSHLSGQEW ที่เหมือนกันหมด นอกจากนี้เมื่อ ทำการศึกษาโดยการใช้ซีรั่มจากคนไข้ซึ่งติดเชื้อไวรัสไข้เลือดออกเปรียบเทียบกับซีรั่มจากคน ปกติ สามารถแยก bacteriophages ที่ให้ผลบวกกับซีรั่มคนไข้แต่ให้ผลลบกับซีรั่มคนปกติ หลังจากทำ biopanning รอบที่ 1 และรอบที่ 3 ได้พบโคลนที่แสดงออกเปปไทด์ที่มีลำดับ กรดอะมิโน 4 แบบ คือ RRPXF ซึ่งมีความคล้ายคลึงกับกรดอะมิโนตำแหน่งที่ 10 ถึง 14 ของ แคปซิดโปรตีนของไวรัสไข้เลือดออกชนิด 1

TTLXY มีลำดับกรดอะมิโนบางส่วนคล้ายคลึงกับ กรดอะมิโนตำแหน่งที่ 915 ถึง 920 ของ polyprotein ใน NS-1 ของไวรัสไข้เลือดออกชนิด 2 (NCG) และกรดอะมิโนตำแหน่งที่ 1630 ถึง 1637 ของ polyprotein ใน NS-3 ของไวรัส ไข้เลือดออกชนิด 1 และกรดอะมิโนตำแหน่งที่ 3279 ถึง 3290 ของ polyprotein ใน NS-5 ของไวรัสไข้เลือดออกทุกชนิด

LPL*MLRPT มีความคล้ายคลึงกับกรดอะมิโนตำแหน่งที่ 496 ถึง 501 ของ polyprotein หรือกรดอะมิโนตำแหน่งที่ 216 ถึง 221 ของโปรตีนหุ้มในไวรัสไข้เลือดออก ทุกชนิด

และ YHINLMNQS มีความคล้ายคลึงกับกรดอะมิโนตำแหน่งที่ 91 ถึง 95 ของ polyprotein หรือกรดอะมิโนตำแหน่งที่ 77 ถึง 81 ของโปรเปปไทด์ในแคปซิดโปรตีนของไวรัสไข้เลือดออกชนิด 1 เปปไทด์ที่กล่าวมาทั้งหมดนี้ ส่วนมากจะสามารถทำปฏิกิริยากับซีรั่มของคนไข้ การศึกษานี้เป็น การแสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการใช้เทคโนโลยีของ phage display ในการศึกษา epitopes ของโมโนโคนัลแอนตี้บอดี้ และโพลีโคนัลแอนตี้บอดี้

บรรณานุกรม :
วราภรณ์ เกษกาญจน์ . (2542). การศึกษาค้นหา EPITOPES ซึ่งจำเพาะต่อโรคโดยอาศัยห้องสมุดเปปไทด์ชนิดรวมซึ่งสร้าง ในฟาจแบคทีเรีย.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
วราภรณ์ เกษกาญจน์ . 2542. "การศึกษาค้นหา EPITOPES ซึ่งจำเพาะต่อโรคโดยอาศัยห้องสมุดเปปไทด์ชนิดรวมซึ่งสร้าง ในฟาจแบคทีเรีย".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
วราภรณ์ เกษกาญจน์ . "การศึกษาค้นหา EPITOPES ซึ่งจำเพาะต่อโรคโดยอาศัยห้องสมุดเปปไทด์ชนิดรวมซึ่งสร้าง ในฟาจแบคทีเรีย."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2542. Print.
วราภรณ์ เกษกาญจน์ . การศึกษาค้นหา EPITOPES ซึ่งจำเพาะต่อโรคโดยอาศัยห้องสมุดเปปไทด์ชนิดรวมซึ่งสร้าง ในฟาจแบคทีเรีย. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2542.