ridm@nrct.go.th   ระบบคลังข้อมูลงานวิจัยไทย   รายการโปรดที่คุณเลือกไว้

การใช้เทคนิคพีซีอาร์ในการตรวจหาเชื้อไวรัสเอ็ชพีวีและเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวใน กุ้งกุลาดำ

หน่วยงาน ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย

รายละเอียด

ชื่อเรื่อง : การใช้เทคนิคพีซีอาร์ในการตรวจหาเชื้อไวรัสเอ็ชพีวีและเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวใน กุ้งกุลาดำ
นักวิจัย : กานต์ยุพา จิตติวัฒนา
คำค้น : HEPATOPANCREATIC PARVOVIRUS , WHITE-SPOT SYNDROME VIRUS , PENAEUS MONODON , ONE-TUBE NESTED PCR , MULTIPLEX PCR
หน่วยงาน : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย
ผู้ร่วมงาน : -
ปีพิมพ์ : 2542
อ้างอิง : http://www.thaithesis.org/detail.php?id=43580
ที่มา : -
ความเชี่ยวชาญ : -
ความสัมพันธ์ : -
ขอบเขตของเนื้อหา : -
บทคัดย่อ/คำอธิบาย :

เฮปาโตแพนครีเอติกพาร์โวไวรัส (เอ็ชพีวี) สามารถก่อให้เกิดโรคในกุ้ง penaeid โดย ทำให้กุ้งมีการเจริญเติบโตช้า ส่งผลให้เกิดลักษณะแคระแกร็น ในการศึกษาวิจัยครั้งนี้ได้พัฒนา วิธี one-tube nested PCR เพื่อใช้ในการตรวจหาเชื้อเอ็ชพีวีโดยทำการออกแบบไพรเมอร์ที่ จำเพาะสำหรับการตรวจหาเชื้อจากข้อมูลลำดับเบสบางส่วน ไพรเมอร์ที่ออกแบบสามารถขยาย ดีเอ็นเอขนาด 375 และ 262 คู่เบส ซึ่งมีความจำเพาะต่อเชื้อเอ็ชพีวีเท่านั้น และความไว ในการตรวจอยู่ในระดับ 0.001 เฟมโตกรัม เมื่อใช้ดีเอ็นเอบริสุทธิ์ของเชื้อเอ็ชพีวีเป็นดีเอ็นเอ ตั้งต้น เทคนิค one-tube nested PCR ที่พัฒนาขึ้นนี้สามารถใช้บ่งบอกปริมาณเชื้อเอ็ชพีวีใน ตัวอย่างได้ โดยสามารถตรวจพบผลผลิตพีซีอาร์ขนาด 375 และ 262 คู่เบส เมื่อใช้ดีเอ็นเอ ของเชื้อเอ็ชพีวี ตั้งแต่ 10 เฟมโตกรัมขึ้นไปเป็นดีเอ็นเอตั้งต้นและสามารถตรวจพบผลผลิต พีซีอาร์เฉพาะขนาด 262 คู่เบส เมื่อใช้ดีเอ็นเอตั้งต้นของเชื้อเอ็ชพีวีตั้งแต่ 0.001 เฟรม โตกรัมถึง 1 เฟมโตกรัม ในการนำเทคนิค one-tube nested PCR ไปตรวจหาเชื้อเอ็ชพีวี ในตับ เลือด ก้านตา ขาเดิน ขาว่ายน้ำ และมูลกุ้ง พบว่าส่วนที่มีการตรวจพบเชื้อมากที่สุด ได้แก่ตับและมูลกุ้ง ส่วนที่มีการตรวจพบเชื้อน้อยที่สุดคือ เลือดกุ้ง นอกจากนี้ได้ทำการพัฒนาเทคนิค multiplex PCR เพื่อใช้ในการตรวจหาเชื้อเอ็ชพีวี และไวรัสตัวแดงดวงขาวได้พร้อมกันในหลอดเดียว โดยทำการออกแบบไพรเมอร์ที่จำเพาะสำหรับ ใช้ในการเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอของเชื้อเอ็ชพีวี เพื่อใช้ควบคู่ไปกับไพรเมอร์ที่จำเพาะสำหรับ ไวรัสตัวแดงดวงขาวซึ่งได้มีผู้พัฒนาไว้แล้ว ไพรเมอร์จำเพาะสำหรับเชื้อเอ็ชพีวีให้ผลผลิต พีซีอาร์ขนาด 362 คู่เบส และไพรเมอร์ที่จำเพาะสำหรับไวรัสตัวแดงดวงขาวให้ผลผลิตขนาด 232 คู่เบน ความไวของการตรวจพบเชื้อทั้งสองอยู่ในระดับ 0.01 พิโคกรัม เมื่อใช้ดีเอ็นเอ บริสุทธิ์ของเชื้อเอ็ชพีวีหรือไวรัสตัวแดงดวงขาวเป็นดีเอ็นเอตั้งต้น การนำเทคนิค multiplex PCR ไปตรวจหาการติดเชื้อเอ็ชพีวีและไวรัสตัวแดงดวงขาวในธรรมชาติจากตับและขาว่ายน้ำของกุ้ง พบการติดเชื้อเอ็ชพีวีในเนื้อเยื่อทั้งสองจากกุ้งตัวอย่าง 10 ตัว ที่มีลักษณะการติดเชื้อเอ็ชพีวี และพบการติดเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวในขาว่ายน้ำของกุ้งตัวอย่าง 10 ตัว ที่มีการติดเชื้อไวรัสนี้ โดยธรรมชาติ ทั้งนี้สามารถตรวจพบไวรัสตัวแดงดวงขาวในตับของกุ้งตัวอย่างกลุ่มหลังได้เพียง 5 ตัวอย่างเท่านั้น จากตัวอย่างกุ้งทั้งหมด 20 ตัวอย่าง ไม่พบการติดเชื้อร่วมกันของไวรัส ทั้งสองชนิด

บรรณานุกรม :
กานต์ยุพา จิตติวัฒนา . (2542). การใช้เทคนิคพีซีอาร์ในการตรวจหาเชื้อไวรัสเอ็ชพีวีและเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวใน กุ้งกุลาดำ.
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
กานต์ยุพา จิตติวัฒนา . 2542. "การใช้เทคนิคพีซีอาร์ในการตรวจหาเชื้อไวรัสเอ็ชพีวีและเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวใน กุ้งกุลาดำ".
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย.
กานต์ยุพา จิตติวัฒนา . "การใช้เทคนิคพีซีอาร์ในการตรวจหาเชื้อไวรัสเอ็ชพีวีและเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวใน กุ้งกุลาดำ."
    กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2542. Print.
กานต์ยุพา จิตติวัฒนา . การใช้เทคนิคพีซีอาร์ในการตรวจหาเชื้อไวรัสเอ็ชพีวีและเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวใน กุ้งกุลาดำ. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2542.