???โมโนโคลนัล?แอนติบอดี?ถูกผลิตขึ้นโดยการนำเซลล์ ม้ามของหนู่?Balb/c ซึ่งถูกกระตุ้นให้สร้าง?แอนติบอดี ต่อแอนติเจนซึ่งได้จากการสกัดเซลล์ผิว?(surface tegumental antigens) ของพยาธิใบไม้ตับของโคและกระบือ ชนิด?Fasciola gigantica มารวมตัวกับเซลล์มะเร็ง?ในการ ศึกษาครั้งนี้?ได้คัดเลือกเซลล์ลูกผสม?3?ชนิด?ชื่อ?1C12, 2C3 และ?1H7?ไว้?และได้ทำการทดสอบความจำเพาะของโมโนโคลนัล แอนติบอดี?ต่อแอนติเจนผิวของพยาธิโดยวิธี?immunoblotting assay โดยใช้?Avidin-Biotin พบว่า?โมโนโคลนัลแอนติบอดี ทั้ง?3?ชนิด?ชนิดทำปฏิกริยาที่น้ำหนัก?66?กิโลดาลตัน และเป็นแอนติบอดี?ชนิด?lgM K-light chain ในการตรวจหาแหล่งแอนติเจนที่จำเพาะต่อ?โมโนโคลนัล แอนติบอดี?ในตัวแก่ของพยาธิ?ศึกษาโดยวิธี?immunoperoxidase assay โดยใช้?avidin-biotin?กับ?frozen section พบ แอนติเจนที่มีความจำเพาะบริเวณเยื่อหุ้มเซลล์ผิว?ของ พยาธิตัวแก่และเมื่อศึกษาโดยวิธี?Lowicry embedded section ให้ผลสนับสนุนว่า?แอนติบอดีมีปฏิกริยาต่อแอนติเจน? บริเวณเยื่อหุ้มผิว?จากการตรวจหาโปรตีนของแอนติเจนของ เซลล์ผิว?และแอนติเจนจากสารคัดหลั่งของตัวพยาธิ (ES antigens) ทำโดยวิธี?SDS-PAGE พบว่าแอนติเจนผิว ประกอบด้วยโปรตีนหลายชนิด?โดยมีน้ำหนักโมเลกุลตั้งแต่ 205?ถึง?27?กิโลดาลตัน?ในขณะที่พบโปรตีนจากสารคัดหลั่ง มีน้ำหนักโมเลกุลที่?27?กิโลดาลตันเพียงชนิดเดียว ??????การวิเคราะห์หาแอนติบอดีในกระแสเลือดของโคที่ ติดเชื้อพยาธิโดยวิธี?SDS-PAGE และวิธี enzyme-linked immunoelectrotransfer blot พบว่ามีแอนติบอดีทีน้ำหนัก โมเลกุล?97?และ?66?กิโลดาลตัน?ที่ทำปฏิกริยากับแอนติเจน ผิว?และน้ำหนักโมเลกุล?27?กิโลดาลตัน?ทำปฏิกริยากับ แอนติเจนของสารคัดหลั่ง?ผลการวิเคราะห์นี้ชี้ให้เห็นว่า แอนติเจนโมเลกุลที่น้ำหนัก?97?และ?66?กิโลดาลตัน?เป็น โมเลกุลที่เด่นของแอนติเจนผิว?ส่วนที่น้ำหนัก?27? กิโลดาลตัน?เป็นแอนติเจนโมเลกุลของแอนติเจนสารคัดหลั่ง ??????การศึกษาปฏิกริยาข้ามชนิดของ?โมโนโคนัลแอนติบอดี ต่อแอนติเจนผิวและแอนติเจนของพยาธิใบไม้ชนิดอื่น?ๆ? พบว่ามีปฏิกริยาข้ามชนิดได้ที่ความเข้มข้สของโมโนโคลนัล แอนติบอดีสูง?ในขณะที่ปฏิกริยาข้ามชนิดจะลดลงเมื่อใช้ โมโนโคลนัลแอนติบอดีต่ำ ??????การตรวจหาแอนติเจนของพยาธิ?Fasciola gigantica ในกระแสเลือดของสัตว์ทดลองได้ถูกพัฒนาขึ้นโดยใช้แอนติเจน จากเลือดกระต่ายที่จำเพาะต่อแอนติเจนผิวของพยาธิทดสอบกับ โมโนโคลนัลแอนติบอดีที่ความเข้มข้น?1:500?ผลการทดลอง พบว่า?โมโนโคลนัลแอนติบอดี?สามารถตรวจหาแอนติเจนของ พยาธิในกระแสเลือดของสัตว์ที่ติดเชื้อพยาธิได้?โดย โมโนโคลนัลแอนติบอดีชนิด 1C12?เป็นตัวที่มีผลการทดลองดี ที่สุด?และพบว่า?การตรวจหาแอนติเจนนี้?สามารถตรวจพบได้ ในระยะแรก?ๆ?ของการติดเชื้อ?โดยผลการอ่านค่าปฏิกริยา จะพบในสัปดาห์ที่?2?และ?3?หลังการติดเชื้อ?และจะลดลง ในสัปดาห์ที่?4?แต่สามารถตรวจสอบได้ตลอด?32?สัปดาห์ หลังการติดเชื้อ?เมื่อทำการศึกษาโดยใช้ตัวอย่างเลือดจาก โคที่ติดเชื้อในธรรมชาติ?จำนวน?97?ตัว?พบว่าการตรวจสอบหา แอนติเจนจากเลือดสัตว์ที่ติดเชื้อ?เมื่อใช้โมโนโคลนัล แอนติบอดี?1C12 2C3 และ 1H7?จะได้ผลการตรวจหาแอนติเจน คิดเป็นร้อยละ?100?96.9 และ?93.8 เมื่อเปรียบเทียบกับจุด ตัดที่ใช้ซีรัมของลูกโค (fetal calf serum) เป็นกลุ่ม ควบคุม?แต่ค่าจะลดลงเล็กน้อยเมื่อเปรียบเทียบกับซีรัมของ โคที่เป็นกลุ่มควบคุมในการทดลอง?(experimentally control calves)?คือคิดเป็นร้อยละ?82.5 82.5 และ?81.4 ตามลำดับ จากการทดลองนี้จะเห็นได้ว่าโมโนโคลนัลที่ผลิตขึ้น?สามารถ ตรวจหาแอนติเจนของพยาธิ?เพื่อใช้ตรวจหาโรคพยาธิใบไม้ตับ ของโค?และกระบือ?(fasciolosis)?ได้