| ชื่อเรื่อง | : | การสร้างโปรตีนสารพิษลูกผสมที่ออกฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำยุง โดยวิธีพันธุวิศวกรรม |
| นักวิจัย | : | ปนัดดา บุญเสริม |
| คำค้น | : | - |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2539 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=41834 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | Bacillus thuringiensis สายพันธุ์ israelensis (Bti) และ Bacillus sphaericus (Bs) เป็นแบคทีเรีย ที่ผลิตสารพิษในรูปของผลึกโปรตีนในระหว่างการสร้างสปอร์ ซึ่งมีฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำยุงได้อย่างจำเพาะเจาะจง โดยโปรตีน สารพิษของ Bs มีความจำเพาะต่อลูกน้ำยุงสายพันธุ์ Culex มากที่สุด ในขณะที่ผลึกโปรตีนสารพิษจาก Bti ประกอบด้วย โปรตีน CryIVA, CryIVB, CryIVD และ CytA ที่ออกฤทธิ์ ต่อลูกน้ำยุงสายพันธุ์ Aedes ได้ดีกว่า ดังนั้นการสร้าง โปรตีนสารพิษลูกผสม จึงเป็นทางเลือกหนึ่งที่สามารถเพิ่ม ประสิทธิภาพในการฆ่าลูกน้ำยุงได้หลายสายพันธุ์ การศึกษาวิจัยครั้งนี้ได้เชื่อมส่วนของยีนที่ควบคุม การสร้างโปรตีนสารพิษของ cryIVB-Bti เข้ากับยีนที่ควบคุม การสร้างโปรตีนสารพิษขนาด 51 และหรือ 42 กิโลดาลตัน ของ Bs โดยใช้เทคนิค SOE ซึ่งอาศัยหลักการทาง PCR ร่วม กับการใช้เอนไซม์ Vent DNA polymerase และได้ผลิตผล ตามต้องการ คือ 3.7 และ 3.3 กิโลเบส จากนั้นได้นำมา เชื่อมต่อเข้ากับพลาสมิดพาหะ(pMEx8) และใช้ชื่อพลาสมิด ลูกผสมว่า pIVB-7051 และ pIVB-7042 โดยพบว่าพลาสมิด ลูกผสมทั้ง pIVB-7042 และ pIVB-7051 สามารถแสดงออกได้ ใน E. coli ภายใต้การควบคุมของ tac promoter และให้ ผลิตผลในรูปของผลึกโปรตีน จากการตรวจสอบ Western blot พบว่าผลึกโปรตีนสารพิษจากพลาสมิดลูกผสม pIVB-7042 สามารถ ทำปฏิกิริยาอย่างจำเพาะกับแอนติบอดี้และได้รับแถบโปรตีน ขนาด 110 กิโลดาลตัน ในขณะที่พลาสมิดลูกผสม pIVB-7051 ไม่ให้ผลิตผลตามต้องการ จากการตรวจสอบคุณสมบัติในการฆ่า ลูกน้ำยุงพบว่า พลาสมิดลูกผสม pIVB-7042 ที่แสดงออกใน E. coli สามารถฆ่าลูกน้ำยุงเฉพาะสายพันธุ์ Aedes aegypti ได้ แต่ไม่สามารถฆ่าลูกน้ำยุงสายพันธุ์ Culex quinquefasciatus ในขณะที่พลาสมิดลูกผสม pIVB-7051 ที่แสดงออกใน E. coli ไม่สามารถออกฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำยุงทั้งสองสายพันธุ์ดังกล่าวได้ |
| บรรณานุกรม | : |
ปนัดดา บุญเสริม . (2539). การสร้างโปรตีนสารพิษลูกผสมที่ออกฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำยุง โดยวิธีพันธุวิศวกรรม.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ปนัดดา บุญเสริม . 2539. "การสร้างโปรตีนสารพิษลูกผสมที่ออกฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำยุง โดยวิธีพันธุวิศวกรรม".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ปนัดดา บุญเสริม . "การสร้างโปรตีนสารพิษลูกผสมที่ออกฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำยุง โดยวิธีพันธุวิศวกรรม."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2539. Print. ปนัดดา บุญเสริม . การสร้างโปรตีนสารพิษลูกผสมที่ออกฤทธิ์ฆ่าลูกน้ำยุง โดยวิธีพันธุวิศวกรรม. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2539.
|
