ปัจจุบัน ~iMycobacterium tuberculosis~i เป็นเชื้อสาเหตุของวัณโรคซึ่งเป็นโรค ติดต่อร้ายแรง และเป็นสาเหตุการเจ็บป่วยและการตายที่สำคัญทั่วโลก ขณะที่มีรายงาน ว่าพบเชื้อมัยโคแบคทีเรียสปีชีส์อื่นมากขึ้น จึงมีความพยายามพัฒนาวิธีการตรวจวินิจฉัย โรคที่ให้ผลดีและรวดเร็ว การตรวจหาและการแยกสปีชีส์ที่แม่นยำมีความสำคัญในการให้ การรักษาผู้ป่วยที่ถูกต้องและรวดเร็วและช่วยตัดวงจรการแพร่เชื้อไปสู่คนอื่นได้ ปัญหาการ จำแนกสปีชีส์ด้วยวิธีการเพาะเลี้ยงเชื้อและการทดสอบทางชีวเคมี คือใช้เวลานานและ มีวิธีการที่ยุ่งยาก เทคนิค PCR เป็นวิธีการหนึ่งที่ถูกนำมาใช้ในการวินิจฉัยที่ให้ผลรวดเร็ว การศึกษาครั้งนี้ได้พัฒนาวิธีการตรวจแยกสปีชีส์ของเชื้อมัยโคแบคทีเรียในสิ่งส่งตรวจ โดยเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอบริเวณ 16S - 23S rDNA spacer sequence แล้วตัด PCR products ด้วย restriction enzymes 3 ชนิดคือ ~iHae~i III, ~iBst~i X1 และ ~iMsp~i I ในการศึกษา ได้ทำการทดสอบกับเสมหะ 138 ตัวอย่าง เปรียบเทียบผลกับการเพาะเลี้ยงเชื้อ พบว่ามีความไว ในการตรวจเท่ากับ 70.3% และมีความจำเพาะเท่ากับ 98.8% สามารถแยกได้เชื้อ ~iM. Tuberculosis, M. kansasii,~i และ ~iM. avium~i เป็นจำนวน 36, 2 และ 1 ตัวอย่างตามลำดับ ในการทดสอบกับ pleural fluid 118 ตัวอย่างนอกจากจะใช้เทคนิคดังกล่าวทดสอบแล้ว ยังได้ใช้เทคนิค nested PCR ต่อ 16S rRNA ร่วมด้วย พบว่าความไวในการตรวจของทั้งสอง วิธี เท่ากับ 48.87%, 74.35% และมีความจำเพาะเท่ากับ 64.55%, 54.4% ตามลำดับ มีค่า ทำนายผลบวกเท่ากับ 40%, 71.83% และค่าทำนายผลลบเท่ากับ 60%, 81.13% ตามลำดับ จากผลการศึกษาพบว่า เทคนิค PCR - Restriction enzyme analysis สามารถใช้ตรวจหา และแยกเชื้อมัยโคแบคทีเรียในเสมหะได้ ในกรณี pleural fluid เทคนิค PCR จำเป็นต้องมีการ ปรับปรุงเพื่อลดการเพิ่มขยายยีนแบบไม่จำเพาะ ในภาพรวมในทางปฏิบัติเทคนิค PCR ควรใช้ เป็นวิธีทดสอบที่นำมาใช้ร่วมกับ conventional method และอาการทางคลินิก เพื่อ ประสิทธิภาพสูงสุดในการตรวจวินิจฉัย การจำแนกสายพันธุ์ของเชื้อวัณโรค ด้วยวิธี RFLP โดยใช้ IS~i6110~i มีประโยชน์ ในด้านระบาดวิทยาของเชื้อ ในการศึกษาครั้งนี้ได้ทดสอบกับตัวอย่าง 70 ตัวอย่าง พบว่า สามารถจำแนกเชื้อออกได้เป็น 4 กลุ่ม คือ กลุ่มที่ 1 เป็นเชื้อสายพันธุ์ที่มี IS~i6110~i เพียง 1 copy กลุ่มที่ 2 เป็นสายพันธุ์ที่มีแบบแผนทางพันธุกรรมคล้าย Beijing family กลุ่มที่ 3 เป็น Nonthaburi group และกลุ่มสุดท้ายเป็นสายพันธุ์ที่มีความหลากหลาย ของแบบแผนทางพันธุกรรม (Heterogeneous group)