การวิเคราะห์สัดส่วนกรดไขมันที่เป็นองค์ประกอบหลักในน้ำมันปลาทูน่าที่ผ่านขั้นตอน การทำให้บริสุทธิ์มาแล้วพบว่าประกอบด้วยกรดไขมันหลัก 5 ชนิดคือ กรดไมริสติก กรดปาล์มิติก กรดสะเตรียริก Eicosapentaenoic acid (EPA) และ Docosahexaenoic acids (DHA) ที่รวมกันมากถึงร้อยละ 82.33(+,ฑ)0.41 เมื่อนำตัวอย่างน้ำมันปลาทูน่ามาเปลี่ยนให้อยู่ในรูปกรด ไขมันอิสระแล้วนำมาตรวจสอบคุณภาพเปรียบเทียบกับน้ำมันปลาทูน่าในตอนแรกพบว่า ค่า เปอร์ออกไซด์และค่าแอนนิซิดีนมีค่าไม่แตกต่างกับน้ำมันปลาในวัตถุดิบ (P>0.05) แต่มีปริมาณ กรดไขมันอิสระเพิ่มขึ้น (P(+,ฑ)0.05) จากร้อยละ 1.99(+,ฑ)0.06 เป็น 89.90(+,ฑ)1.20 ปริมาณตัวอย่าง กรดไขมันอิสระที่เหมาะสมในการแยกด้วยซิลิซิกแอซิคคอลัมน์โครมาโทกราฟี คือ ร้อยละ 3 ของ น้ำหนักเฟสอยู่กับที่ เมื่อใช้ตัวทำละลายอินทรีย์ผสมหลายกลุ่ม โดยแปรปริมาณตัวทำละลายที่ มีขั้วสูงกว่าพบว่าตัวทำละลายอินทรีย์ผสมระหว่าง diethyl ether และ hexane ให้สัดส่วน DHA สูงสุดคือร้อยละ 80.47(+,ฑ)0.92 ในลำดับการแยกที่ 4 ซึ่งเป็นการใช้ diethyl ether ร้อยละ 2 ใน hexane ด้วยเวลาที่ใช้ในการชะตัวทำละลายต่ำสุดคือ 24.28(+,ฑ)0.14 นาที คุณภาพของกรด ไขมันที่ผ่านซิลิซิกแอซิคคอลัมน์โครมาโทกราฟี พบว่ายังมีคุณภาพดีมีค่าเปอร์ออกไซด์และค่า แอนนิซิดีนไม่แตกต่างกับกรดไขมันในขั้นตอนการเตรียมกรดไขมันอิสระ (P<0.05)