| ชื่อเรื่อง | : | การชักนำให้เกิดยอดหลายยอดและเทคนิคที่เหมาะสมในการทำบาดแผลเพื่อการถ่ายยีน โดยเชื้อ ~iAgrobacterium tumefaciens~i ในถั่วเขียว |
| นักวิจัย | : | ฉัตรนภา ข่มอาวุธ |
| คำค้น | : | - |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2544 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=29622 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อถั่วเขียวโดยการชักนำให้เกิดยอดหลายยอด เพื่อเป็น เนื้อเยื่อพื้นฐานสำหรับการถ่ายยีน เริ่มจากส่วน hypocotyl, epicotyl และใบจริง คู่แรกของถั่วเขียวพันธุ์ KPS 1 และ CN 36 จากต้นอ่อนที่อายุต่างกัน ที่เพาะในสภาพ ปลอดเชื้อบนอาหารสูตร MS ที่ปราศจากฮอร์โมน พบว่า ไม่สามารถชักนำให้เกิดยอดบน อาหารสูตร MS, NN, MB (อาหารที่มีเกลือจากสูตร MS และมีวิตามินจากสูตร B5), 1/2MB (อาหารสูตร MB ที่ลดองค์ประกอบธาตุอาหารลงครึ่งหนึ่ง) และ B5 ที่ไม่เติม ฮอร์โมนหรือเติมฮอร์โมนความเข้มข้นต่างๆ กัน แต่เกิดแคลลัสและราก ส่วนข้อของใบเลี้ยง ที่มีใบเลี้ยงติดอยู่ทั้งคู่ ของพันธุ์ KPS 1 และ KPS 2 จากต้นอ่อนที่อายุต่างกัน ที่เพาะเลี้ยงในสภาพปลอดเชื้อบนอาหารสูตร MS ที่เติมหรือไม่เติมฮอร์โมนความเข้มข้น ต่าง ๆ พบว่า ต้นอ่อนของพันธุ์ KPS 1 ที่เพาะบนอาหารสูตร MS ที่ปราศจากฮอร์โมนเป็น เวลา 5 วัน และพันธุ์ KPS 2 บนอาหารสูตร MS ที่เติม kinetin 2 มก./ล. เป็นเวลา 2 วัน สามารถชักนำให้เกิดยอดสูงสุดบนอาหารสูตร MB ที่เติม BA 2 มก./ล. และชักนำราก บนอาหารสูตร 1/2MB ที่ไม่เติม หรือเติม IBA 0.5 มก./ล. สำหรับส่วนของเมล็ดอ่อน จากฝักอายุ 5, 7, 9 และ 11 วัน หลังดอกบานของพันธุ์ KPS 1, KPS 2, CN 36, CN 60, UT 1 และ PSU 1 พบว่า อาหารสูตร MB ที่เติม BA 0-4 มก./ล. ร่วมกับการเติม และไม่เติม NAA 0.1 มก./ล. สามารถชักนำให้เกิดยอดหลายยอดได้ ซึ่งในแต่ละพันธุ์ จะให้จำนวนยอดแตกต่างกัน พันธุ์ KPS 1 และ CN 60 เกิดยอดได้ดีจากฝักอายุ 9 วัน หลังดอกบาน ส่วนพันธุ์ KPS 2, CN 36, UT 1 และ PSU 1 เกิดยอดได้ดีจากฝักอายุ 11 วัน หลังดอกบาน สำหรับการถ่ายยีนเข้าสู่เนื้อเยื่อถั่วเขียวส่วนยอดหลายยอด และส่วนข้อของ ใบเลี้ยงที่มีใบเลี้ยงติดอยู่เพียงใบเดียวของพันธุ์ KPS 1 โดยใช้เชื้อ ~iAgrobacterium tumefaciens~i สายพันธุ์ EHA 105 ที่มีพลาสมิด pCAMBIA 1301 เป็นพาหะเทคนิคการ ทำบาดแผลคือ กรีดด้วยใบมีด ใช้คลื่นเสียง และใช้ผง silicon carbide ร่วมกับการ vortex พบว่า มีการแสดงออกของยีนแบบชั่วคราวบริเวณใบของเนื้อเยื่อส่วนยอดหลายยอด ที่ถูกทำบาดแผลโดยใช้คลื่นเสียง และใช้ผง silicon carbide เมื่อคัดเลือกบนอาหารสูตร MB ที่เติม BA 2 มก./ล. ร่วมกับ hygromycin 25 มก./ล. และ cefotaxime 300 มก./ล. พบว่า ไม่สามารถคัดเลือกเนื้อเยื่อที่ทำบาดแผลด้วยวิธีใช้ผง silicon carbide และ ใบมีดกรีด และพบการแสดงออกของยีนตรงส่วนยอด ที่ได้จากการทำบาดแผลด้วยวิธีใช้ คลื่นเสียงเป็นเวลา 5 นาที แต่เนื้อเยื่อที่ได้มีลักษณะของไคเมอร์รา |
| บรรณานุกรม | : |
ฉัตรนภา ข่มอาวุธ . (2544). การชักนำให้เกิดยอดหลายยอดและเทคนิคที่เหมาะสมในการทำบาดแผลเพื่อการถ่ายยีน โดยเชื้อ ~iAgrobacterium tumefaciens~i ในถั่วเขียว.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ฉัตรนภา ข่มอาวุธ . 2544. "การชักนำให้เกิดยอดหลายยอดและเทคนิคที่เหมาะสมในการทำบาดแผลเพื่อการถ่ายยีน โดยเชื้อ ~iAgrobacterium tumefaciens~i ในถั่วเขียว".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ฉัตรนภา ข่มอาวุธ . "การชักนำให้เกิดยอดหลายยอดและเทคนิคที่เหมาะสมในการทำบาดแผลเพื่อการถ่ายยีน โดยเชื้อ ~iAgrobacterium tumefaciens~i ในถั่วเขียว."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2544. Print. ฉัตรนภา ข่มอาวุธ . การชักนำให้เกิดยอดหลายยอดและเทคนิคที่เหมาะสมในการทำบาดแผลเพื่อการถ่ายยีน โดยเชื้อ ~iAgrobacterium tumefaciens~i ในถั่วเขียว. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2544.
|
