| ชื่อเรื่อง | : | การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีสำหรับวินิจฉัยโรคใบหงิกของข้าว ในประเทศไทย |
| นักวิจัย | : | มยุรี ศรีลุนช่าง |
| คำค้น | : | - |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2539 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=27171 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ทำการผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อไวรัสโรคใบหงิก (Rice Ragged Stunt Virus, RRSV) โดยฉีดกระตุ้นหนูถีบจักร สายพันธุ์ Balb/C 2 วิธี คือกระตุ้นด้วยไวรัสทั้งอนุภาค (virion) และกระตุ้นเฉพาะส่วนผิว (Spike) ของไวรัสซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุล 49K และ 36K นำเซลล์ม้ามจากหนูดังกล่าวมาเชื่อมกับเซลล์มัยอีโลมา P3-X63-Ag 8.653 โดยใช้โพลีเอทธิลีนไกลคอล (PEG MW 4,000) เป็นสารเชื่อมเซลล์ พบว่าในการผลิตโดยวิธีกระตุ้นหนูด้วยไวรัสทั้ง อนุภาค ได้เซลล์ไฮบริโดมาที่ผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีที่จำเพาะต่อ ไวรัสโรคใบหงิก 7 โคลน (clone) (รหัสโคลน M2, M3, M4, M5, M6, M7 และ M8) และได้คัดเลือกมาศึกษาต่อจำนวน 3 โคลน (M5, M6, M7) โมโนโคลนอลแอนติบอดีที่ผลิตได้ในหลอดทดลองให้ค่าไตเตอร์สูง 1:800 ถึง 1:6,400 และที่เตรียมจาก ascitic fluid ให้ค่าไตเตอร์สูงถึง 1:4,194,304 (โคลน M6) เมื่อตรวจโดยวิธี Western Blot (WB) พบว่าโมโนโคลนอลแอนติบอดีจากโคลน M5 และ M7 ทำปฏิกิริยากับโปรตีนองค์ประกอบของเชื้อ RRSV ที่มีนำหนักโมเลกุล 160 K, 120K และ 49K สำหรับโมโนโคลนอลแอนติบอดีจากโคลน M6 ทำปฏิกิริยากับโปรตีนองค์ประกอบของเชื้อ RRSV ที่มีน้ำหนักโมเลกุล 160K, 120K, 49K และ 36K ในการเชื่อมเซลล์โดยใช้หนูฉีดกระตุ้นด้วยส่วนผิว (spike) ของไวรัสน้ำหนักโมเลกุล 36K ได้เซลล์ไฮบริโดมาที่ผลิตโมโนโคลนอล แอนติบอดีทั้งหมด 5 โคลน (รหัสโคลน F6-1E6-G9, F6-1E6-G12, F6-4F6-D4, F6-4F6-C10 และ F6-4F7-C4) โดยโมโนโคลนอล แอนติบอดีที่ผลิตได้ในหลอดทดลองให้ค่าไตเตอร์ สูง 1:100 ถึง 1:400 และที่เตรียมจาก ascitic fluid ให้ค่าไตเตอร์สูง 1:1000 ถึง 1:10,000 เมื่อตรวจโดยวิธี WB พบว่าโมโนโคลนอลแอนติบอดี ทำปฏิกิริยากับโปรตีนองค์ประกอบของเชื้อ RRSV ที่มีน้ำหนักโมเลกุล 36K และต่ำกว่า 36K ลงมา เมื่อตรวจสอบหา isotype ของโมโนโคลนอลแอนติบอดี ทั้งหมดที่ผลิตได้พบว่าเป็นชนิด IgM และ ได้ทดลองนำโมโนโคลนอล แอนติบอดีมาใช้ในการตรวจหาไวรัสใบหงิกในข้าวและแมลงพาหะ โดยวิธี indirect ELISA พบว่าสามารถนำโมโนโคลนอลแอนติบอดี ที่ผลิตจากโคลน M5, M6, M7, F6-4F6-D4, F6-4F6-C10 และ F6-4F7-C4 มาใช้ในการตรวจได้ โดยแอนติบอดีที่ไม่มีปฏิกิริยาข้าม (cross reaction) กับไวรัสโรคหูด (RGDV) และไวรัสโรค เขียวเตี้ย (RGSV) |
| บรรณานุกรม | : |
มยุรี ศรีลุนช่าง . (2539). การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีสำหรับวินิจฉัยโรคใบหงิกของข้าว ในประเทศไทย.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. มยุรี ศรีลุนช่าง . 2539. "การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีสำหรับวินิจฉัยโรคใบหงิกของข้าว ในประเทศไทย".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. มยุรี ศรีลุนช่าง . "การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีสำหรับวินิจฉัยโรคใบหงิกของข้าว ในประเทศไทย."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2539. Print. มยุรี ศรีลุนช่าง . การผลิตโมโนโคลนอลแอนติบอดีสำหรับวินิจฉัยโรคใบหงิกของข้าว ในประเทศไทย. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2539.
|
