| ชื่อเรื่อง | : | การผลิตและศึกษาคุณสมบัติของโมโนโคลนัล แอนติบอดีต่อ คอนโดรอิติน 6-ซัลเฟต |
| นักวิจัย | : | ณัฐชัย เที่ยงบูรณธรรม |
| คำค้น | : | - |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2539 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=4821 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ความผิดปกติของกระดูกอ่อนเป็นหนึ่งในหลายปัจจัยที่ ส่งผลกระทบต่อประชากรโลกและสร้างความเสียหายทางด้าน สาธารณสุข เศรษฐกิจและสังคมอย่างมาก ความผิดปกติที่พบบ่อย ได้แก่ โรครูมาตอยด์และข้อเสื่อม ซึ่งปัจจุบันยังไม่มีวิธีการที่ สะดวกและได้ผลดีในการตรวจหาความผิดปกติของสารชีวโมเลกุล ซึ่งจะพบในระยะเริ่มต้นของโรค ปัจจุบันมีการใช้เทคนิค โมโนโคลนัลแอนติบอดีอย่างแพร่หลายในการตรวจหาความผิด ปกติของโรค เนื่องจากมีข้อดีคือ สะดวก ประหยัดและความไว สูง ดังนั้น วิธีนี้จึงน่าจะเป็นทางหนึ่งที่จะใช้ตรวจหา chondroitin sulfate ซึ่งเป็นสารชีวโมเลกุลชนิดหนึ่งที่มีรายงานว่ามีการ ปลดปล่อยออกมาในซีรั่มของสัตว์ทดลองที่ถูกชักนำให้เป็นโรค ข้อเสื่อม เมื่อนำส่วนของ proteoglycan (ส่วนที่อยู่ในสภาพ จับตัวกัน A1) ที่สกัดได้จากตัวอ่อนของฉลามไปฉีดกระตุ้นหนู Balb/c และนำเซลล์ของม้ามไปทำการรวมตัวกับเซลล์ myeloma ชนิด X63-Ag8.653 เซลล์ hybridoma ที่ผลิตได้ และตรวจสอบแล้วว่าสร้างแอนติบอดีต่อ A1 มาตรวจสอบหา clones ที่ให้ผลบวกกับ chondroitin sulfate โดยนำ อาหารเลี้ยงเซลล์ (10% calf serum IMDM) ที่ผ่านการ เลี้ยงเซลล์มาทดสอบด้วยวิธี competitive ELISA พบว่า มีเพียง clone เดียวคือ WF6 ที่ให้ผลบวกต่อ chondroitin sulfate การศึกษาคุณสมบัติของแอนติบอดีที่ได้จากเซลล์ WF6 พบว่า แอนติบอดีเป็นชนิด IgM และให้ผลบวกกับ A1 ที่ได้จาก ฉลามและตัวอ่อนของฉลาม chondroitin sulfate ชนิด C และ D และ heparin และให้ผลลบกับ G1, keratan sulfate, hyaluronic acid, BSA, calf thymus DNA, dextran sulfate, pentosanpolysulfate, heparan sulfate และอนุพันธ์ของ heparin ได้ทำการพัฒนาวิธีการตรวจวัด ปริมาณ epitopes ของ WF6 ในซีรั่มโดยใช้อาหารเลี้ยง เซลล์ดังกล่าว ความไวของวิธีการตรวจวัดนี้ สามารถตรวจวัด ปริมาณ epitopes ของ WF6 (A1 equivalent) ได้ถึง ระดับ 1 นาโนกรัม (IC(,50) 0.1 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร) มีค่า coefficient of variation (CV) ของ intra- และของ inter-assay เท่ากับ 13.79% (n=20) และ 10.29% (n=20) ตามลำดับ ส่วนค่าเฉลี่ยของ recovery มีค่าเท่ากับ 97.01% (n=7) จากการศึกษาระดับ epitopes ของ WF6 ในซีรั่ม ของผู้ป่วยโรครูมาตอยด์ 19 รายและโรคข้อเสื่อม 18 ราย เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมซึ่งมีสุขภาพดีจำนวน 111 ราย พบ ว่าระดับ epitopes ของ WF6 โดยเฉลี่ยในกลุ่มควบคุม มี ค่าเท่ากับ 0.54 ฑ 0.24 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ผู้ป่วยโรค รูมาตอยด์มีค่าเท่ากับ 1.72 ฑ 1.60 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร และโรคข้อเสื่อมมีค่าเท่ากับ 1.70 ฑ 1.30 ไมโครกรัมต่อ มิลลิลิตร จากการวิเคราะห์ทางสถิติพบว่าค่าเฉลี่ยของระดับ epitopes ของ WF6 ในกลุ่มที่เป็นโรครูมาตอยด์และโรค ข้อเสื่อมเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.0001) เมื่อเทียบ กับกลุ่มควบคุม จากผลการทดลองแสดงสามารถสรุปได้ว่า epitopes ของแอนติบอดีที่ได้จากเซลล์ WF6 น่าจะอยู่ในส่วนที่เป็น glycosaminoglycans (GAGs) ซึ่งมีรูปแบบจำเพาะของ หมู่ซัลเฟต คือตำแหน่งที่ 4 ของน้ำตาลโมเลกุลแรก และ/หรือ ตำแหน่งที่ 6 ของน้ำตาลตัวที่สองของ repeating disaccharide ร่วมกับส่วนที่เป็นเปปไทด์ นอกจากนี้ยังพบว่า epitopes ดังกล่าว มีปริมาณเพิ่มขึ้นในผู้ป่วยที่เป็นโรครูมาตอยด์และข้อเสื่อม ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า epitopes ของ WF6 น่าจะใช้ เป็นตัวบ่งชี้ในการวินิจฉัยโรครูมาตอยด์และข้อเสื่อมได้ |
| บรรณานุกรม | : |
ณัฐชัย เที่ยงบูรณธรรม . (2539). การผลิตและศึกษาคุณสมบัติของโมโนโคลนัล แอนติบอดีต่อ คอนโดรอิติน 6-ซัลเฟต.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ณัฐชัย เที่ยงบูรณธรรม . 2539. "การผลิตและศึกษาคุณสมบัติของโมโนโคลนัล แอนติบอดีต่อ คอนโดรอิติน 6-ซัลเฟต".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. ณัฐชัย เที่ยงบูรณธรรม . "การผลิตและศึกษาคุณสมบัติของโมโนโคลนัล แอนติบอดีต่อ คอนโดรอิติน 6-ซัลเฟต."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2539. Print. ณัฐชัย เที่ยงบูรณธรรม . การผลิตและศึกษาคุณสมบัติของโมโนโคลนัล แอนติบอดีต่อ คอนโดรอิติน 6-ซัลเฟต. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2539.
|
