| ชื่อเรื่อง | : | การระบุยีนของสารต้านจุลชีพและลักษณะสมบัติของแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ของกุ้งกุลาดำ ~iPenaeus monodon~i |
| นักวิจัย | : | กุลยา สมบูรณ์วิวัฒน์ |
| คำค้น | : | PENAEUS MONODON , DIFFERENTIAL DISPLAY PCR , ANTI-LIPOPOLYSACCHARIDE FACTOR , HAEOMOCYTES , PICHIA PASTORIS EXPRESSION SYSTEM |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2547 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082547000803 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | ในการวิจัยนี้ใช้เทคนิค Differential Display PCR (DD-PCR) ในการศึกษาการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของยีนในเซลล์เม็ดเลือดของกุ้งกุลาดำที่ติดเชื้อวิบริโอฮาวิอายโดยนำคู่ไพรเมอร์ oligo-dT และ arbitrary จำนวน 44 คู่ มาทำการตรวจสอบหายีนที่มีการแสดงออกแตกต่างกันระหว่างกุ้งปกติ และกุ้งที่ติดเชื้อ พบแถบของ cDNA ที่มีการแสดงออกแตกต่างกันทั้งหมด 79 แถบ ซึ่งมาจากไพรเมอร์ 33 คู่ ประกอบด้วย ยีนที่มีการแสดงออกเพิ่มขึ้นจำนวน48 แถบ และยีนที่มีการแสดงออกลดลงเมื่อติดเชื้อวิบริโอฮาวิอายจำนวน 31 แถบ นำมาเพิ่มปริมาณด้วยเทคนิคพีซีอาร์ แล้วทำการโคลน cDNA ที่ได้เข้าสู่เวคเตอร์ ซึ่งสามารถโคลนได้ 48 ชิ้นสุ่มเลือกโคลนและนำไปหาลำดับเบสบางส่วน จากการวิเคราะห์ลำดับเบสของโคลนที่ได้จากแถบเดียวกันพบว่า 21 แถบ มีลำดับเบสชนิดเดียว และอีก 27 แถบนั้นมีลำดับเบสมากกว่าหนึ่งชนิด เมื่อนำลำดับเบสจากโคลนทั้งหมด 267 โคลน ไปเปรียบเทียบกับข้อมูลใน GenBank พบ 85 โคลน (31%)ที่มีลำดับเบสคล้ายกับยีนที่มีรายงานแล้วโดยเป็นยีนที่แตกต่างกัน 24 ยีน โดยในการศึกษานี้ได้คัดเลือกยีนที่สนใจได้แก่ caspase 3B, SERPINB3, profilin, lysozyme, interferon-related developmental regulator 1, และ glucose transporter 1 มายืนยันการแสดงออกของยีนดังกล่าวด้วยเทคนิค real-time PCR ซึ่งพบว่ายีนเหล่านี้มีการแสดงออกเพิ่มขึ้นหลังจากการติดเชื้อวิบริโอฮาวิอาย ยีนของสารต้านจุลชีพแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ ชนิดที่ 3ซึ่งมีรายงานการว่าเป็นชนิดที่พบมากที่สุดในเซลล์เม็ดเลือดของกุ้งกุลาดำ เป็นยีนแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ชนิดเดียวที่พบในการศึกษานี้ จึงเป็นยีนที่น่าสนใจสำหรับการศึกษาลักษณะสมบัติ แอคติวิตี และคุณสมบัติทางชีวภาพ โดยการผลิตโปรตีนแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ ชนิดที่ 3 ในระบบยีสต์ ~iPichia pastroris~i โปรตีนที่ผ่านการทำบริสุทธิ์แล้วมีฤทธิ์ยับยั้งการเจริญของแบคทีเรียแกรมลบ แบคทีเรียแกรมบวก และเชื้อราได้ดี ซึ่งโปรตีนนี้ออกฤทธิ์โดยการฆ่าเชื้อแบคทีเรีย (bactericidal effect) ~iBacillus megaterium~i และ~iEscherichia coli~i 363 การศึกษาระดับการแสดงออกของยีนแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ชนิดที่ 3 ในช่วงเวลาต่างๆ ระหว่างที่กุ้งกุลาดำได้รับเชื้อวิบริโอฮาวิอาย ด้วยเทคนิค~iin situ~i hybridization และ real-time PCR พบว่ายีนนี้มีการแสดงออกเพิ่มขึ้นภายใน6 ชั่วโมงแรกที่ได้รับเชื้อ และพบการกระจายตัวของเซลล์เม็โเลือดที่แสดงออกยีนแอลติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ ชนิดที่ 3 อยู่ทั่วไปในส่วน cepharothorax ของกุ้งกุลาดำ ในช่วงดังกล่าว หลังจากนั้นจะมีปริมาณสูงขึ้นอีกครั้งที่เวลา 72 ชั่วโมง การศึกษาโปรตีนโดยการใช้แอนติบอดีที่จำเพาะต่อโปรตีนแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ ชนิดที่ 3 พบว่าในช่วงแรกของการตอบสนองต่อเชื้อแบคทีเรียมีการเคลื่อนที่ของเซลล์เม็ดเลือดที่ผลิตโปรตีนนี้ไปยังบริเวณที่ทำการฉีดเชื้อเข้าไปยังกุ้งกุลาดำ ข้อมูลที่ได้ในการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าสารต้านจุลชีพแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ ชนิดที่ 3 มีบทบาทสำคัญในการปกป้องกุ้งกุลาดำจากการบุกรุกของชุลชีพ |
| บรรณานุกรม | : |
กุลยา สมบูรณ์วิวัฒน์ . (2547). การระบุยีนของสารต้านจุลชีพและลักษณะสมบัติของแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ของกุ้งกุลาดำ ~iPenaeus monodon~i.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. กุลยา สมบูรณ์วิวัฒน์ . 2547. "การระบุยีนของสารต้านจุลชีพและลักษณะสมบัติของแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ของกุ้งกุลาดำ ~iPenaeus monodon~i".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. กุลยา สมบูรณ์วิวัฒน์ . "การระบุยีนของสารต้านจุลชีพและลักษณะสมบัติของแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ของกุ้งกุลาดำ ~iPenaeus monodon~i."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2547. Print. กุลยา สมบูรณ์วิวัฒน์ . การระบุยีนของสารต้านจุลชีพและลักษณะสมบัติของแอนติไลโปพอลิแซ็กคาไรด์แฟคเตอร์ของกุ้งกุลาดำ ~iPenaeus monodon~i. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2547.
|
