ได้ทำการแยกแบคทีเรียทนร้อนสายพันธุ์ SK-1 ที่สามารถผลิตไคทิเนสจากดินในจังหวัดอ่างทอง SK-1 เจริญได้ที่อุณหภูมิตั้งแต่ 30 ถึง 60(+,ฐ)C (มีอุณหภูมิที่เหมาะสมเป็น 50(+,ฐ)C)เจริญได้ในอาหารที่มีค่า pH ตั้งแต่ 3 ถึง 10 (มีค่า pH ที่เหมาะสมเป็น 7.5) และเจริญได้ในอาหารที่มีเกลือโซเดียมคลอไรด์ตั้งแต่ 0 ถึง 10% (มีความเข้มข้นที่เหมาะสมเป็น 1%)เมื่ออาศัยสมบัติบางประการทางกายภาพและทางชีวเคมี เช่น การสร้างเอนโดสปอร์ การมีperitrichous figella และการเปรียบเทียบลำดับเบสใน 16S rRNA พบว่าเป็นแบคทีเรียในจีนัส ~iBacillus~i ที่มีชื่อว่า ~iBacillus licheniformis~i โดยที่แบคทีเรียนี้สามารถผลิตเอนไซม์ได้มากที่สุดในช่วง Log phase ของการเจริญเติบโตในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี 0.02% colloidal chitin ภาวะที่เหมาะสมในการผลิตเอนไซม์คือ เลี้ยงแบคทีเรียใน 0.08% CCMM, pH 7.5 ที่อุณหภูมิ 50(+,ฐ)C และผลิตเอนไซม์ได้ที่อุณหภูมิตั้งแต่ 30ถึง 50(+,ฐ)C ในเอนไซม์หยาบประกอบด้วยเอนไซม์สองชนิดคือไคทิเนส และไคโทไบเอสภาวะของการเร่งปฏิกิริยาที่เหมาะสมของเอนไซม์หยาบที่ได้จากน้ำเลี้ยงแบคทีเรียมีค่า pHและอุณหภูมิเป็น 6.0 และ 60(+,ฐ)C โดยที่เอนไซม์สามารถย่อย regenerated chitinได้ดีที่สุด การศึกษาผลิตภัณฑ์ที่ได้จากการย่อย colloidal chitin ด้วยเอนไซม์ โดย HPLCพบว่าเอนไซม์หยาบสามารถย่อย colloidal chitin ได้ N-acetylglucosamine, และN, N'-diacetyl chitobiose เป็นส่วนใหญ่ หลังจากวิเคราะห์ด้วยวิธี SDS-PAGE โดยทำการย้อมแอคติวิตีของเอนไซม์เปรียบเทียบกับแถบของโปรตีนที่ได้ พบว่ามีโปรตีนที่มีไคทิเนสแอกติวิตีอย่างน้อย 8 แถบที่มีน้ำหนักโมเลกุลตั้งแต่ 20 ถึง 72 กิโลดาลตัน เมื่อทำไคทิเนสให้บริสุทธิ์บางส่วนด้วยวิธีการดูดซับแบบจำเพาะด้วยคอลลอยดัลไคทินและคอลัมน์ DEAE และนำไปศึกษาสมบัติของไคทิเนสที่บริสุทธิ์บางส่วน พบว่าไคทิเนสที่ได้จากDEAE peak2 มีค่า pI เท่ากับ 4.62 และสามารถย้อมติดสีย้อมไคทิเนสใน SDS-PAGE ได้ทั้งหมด 3 แถบ ซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 72, 70 และ 58 กิโลดาลตัน pH และอุณหภูมิในการเร่งปฏิกิริยาคือ 5 และ 55(+,ฐ)C เอนไซม์เสถียรในช่วง pH 6-8 และที่อุณหภูมิ40-50(+,ฐ)C เอนไซม์มีค่า K(,m) และค่า V(,max) ของเอนไซม์ต่อการย่อย colloidalchitin เป็น 0.23 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร และ 7.03 ยูนิตต่อมิลลิกรัม จากการทำการโคลนแบบ Shotgun ของชิ้นโครโมโซมมอลดีเอ็นเอของ ~iB. licheniformis~iSK-1 ที่ตัดแบบไม่สมบูรณ์ด้วย ~iPSt~iI หลังทำการคัดเลือกไปแล้ว 5,000 โคโลนี ไม่พบโคลนที่ให้ผลบวกบนอาหารแข็งที่มี colloidal chitin จึงได้ทำการเปลี่ยนวิธีโคลนโดยใช้วิธีเพิ่มจำนวนชิ้นยีนไคทิเนสด้วยวิธี PCR โดยใช้ไพรเมอร์ที่เฉพาะต่อยีนไคทิเนสของแบคทีเรียในกลุ่ม ~iBacillus~i คือ BP-F และ BP-R แล้วโคลนเข้าสู่ pGEM-T easy ทำการคัดเลือกบนอาหารแข็งที่มี colloidal chitin พบโคโลนีที่ให้วงใสบนอาหารแข็งที่มีพลาสมิดที่มีชิ้นinsert ขนาด 2 กิโลเบส, pSKChi66 พลาสมิด pSKChi66 มี 1 ORF ที่มีขนาด 1,797 คู่เบสซึ่งแปลเป็นรหัสโปรตีนที่ประกอบด้วยกรดอะมิโน 598 ตัวที่มีน้ำหนักโมเลกุล 66 กิโลดาลตันและมีค่า pI เท่ากับ 5.02 ลำดับของกรดอะมิโนที่ได้มีความคล้ายคลึงกับลำดับของกรดอะมิโนของไคทิเนสจาก ~iB. subtilis~i และ ~iB. licheniformis~i 84% เอนไซม์ที่ได้จากpSKChi66 มีค่า pH และอุณหภูมิที่เหมาะสมต่อการเร่งปฏิกิริยาเป็น 5 และ 60(+,ฐ)Cโดยที่เอนไซม์สามารถย่อย colloidal chitin ได้ดีที่สุด การศึกษาผลิตภัณฑ์ของการย่อยcolloidal chitin ด้วยเอนไซม์ โดย HPLC พบว่าเอนไซม์หยาบสามารถย่อย colloidalchitin ได้ N, N'-diacetyl chitobiose เป็นส่วนใหญ่ ไคทิเนสที่ได้จาก pSKChin66สามารถย้อมติดสีย้อมไคทิเนสใน SDS-PAGE ได้ทั้งหมด 3 แถบ ซึ่งมีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ70, 65 และ 58 กิโลดาลตัน