แบคทีเรียที่สามารถผลิตโปรตีเอสที่เสถียรต่ออุณหภูมิสูงซึ่งถูกแยกจากดินบริเวณน้ำพุร้อนจากอำเภอห้วยทรายขาว จังหวัดเชียงราย ได้ถูกนำมาจำแนกสายพันธุ์โดยวิธีการทดสอบสมบัติทางชีวเคมีและการเปรียบเทียบลำดับดีเอ็นเอบริเวณ 16S rRNA gene พบว่าเป็น~iBacillus mycoides~i จากการหาภาวะที่เหมาะสมในการวัดแอคติวิตีของเอนไซม์พบว่าภาวะที่เอนไซม์มีแอคติวิตีสูงสุดคือ 37(+,ฐ)C, pH 8.0 (10mM Tris-HCl buffer)เมื่อทำการหาภาวะที่เหมาะสมในการเลี้ยงแบคทีเรียชนิดนี้ในขวดเขย่าขนาด 1 ลิตรโดยใช้ปริมาณอาหารเหลว 300 มล. เพื่อผลิตเอนไซม์พบว่าภาวะที่เหมาะสมคือ การเลี้ยงที่อุณหภูมิ 37(+,ฐ)C pH 8.0 ในอาหารสูตรเปปโตนซึ่งใช้เชื้อตั้งต้น 1.0% โดยมีทริปโตนเป็นแหล่งไนโตรเจนและมีปริมาณไนโตรเจนในอาหาร 1.4% โปรตีเอสที่เสถียรต่ออุณหภูมิสูงมีการทำงานสูงสุดที่ 60(+,ฐ)C และ pH 8.0 ใน 10 mM Tris-HCl buffer การแยกโปรตีเอสให้บริสุทธิ์ ทำได้โดยตกตะกอนโปรตีนโดยการเติมอะซีโตนลงในน้ำเลี้ยงเชื้อให้มีความเข้มข้นสุทธิ 50% หลังจากนั้นจึงนำโปรตีนที่ได้ไปผ่านการแยกโดยSephadex G-75 column chromatography ซึ่งได้ผลิตผลโปรตีเอส 0.46% และมีแอคติวิตีจำเพาะ 30.97 units/mg protein ผลการทดลองจาก SDS-PAGE และSephadex G-75 column chromatography แสดงว่าน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีเอสที่เสถียรต่ออุณหภูมิสูงเท่ากับ 27,600 Da การสูญเสียแอคติวิตีของเอนไซม์โดย PMSD และEDTA แสดงว่ากรดอะมิโนซีรีนมีความสำคัญในบริเวณเร่งของเอนไซม์และโลหะหนักมีความสำคัญต่อการทำงานของโปรตีเอส การทดสอบความจำเพาะของโปรตีนที่เสถียรต่ออุณหภูมิสูงต่อสารตั้งต้น คือ เคซีนและเอโซเคซีน พบว่าค่า Km = 125.00 mg/ml และ 26.13 mg/ml ตามลำดับและค่า V(,max)=3.8 Units/mg protein และ 17.0 Units/mg protein ตามลำดับการประยุกต์ของโปรตีเอสนี้ในการย่อยของเสียที่ได้จากโรงงานผลิตปลาทูน่ากระป๋องนั้นพบว่าโปรตีเอสสามารถย่อยของเสียทั้งสามชนิดได้ดีโดยเฉพาะอย่างยิ่ง ไส้ปลากับเลือดปลาซึ่งพบว่าปริมาณไนโตรเจนเพิ่มขึ้นสูงที่สุด 3.9%