| ชื่อเรื่อง | : | การสะสมไกลซีนบีเทนและการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์บีเทนอัลดีฮายด์ดีไฮโดรจีเนสจากไซยาโนแบคทีเรียสายพันธ์ทนเค็ม Aphanothece halophytica |
| นักวิจัย | : | อุทัยวรรณ คำอาบ |
| คำค้น | : | GLYCINE BETAINE , BETAINE ALDEHYDE DEHYDROGENASE |
| หน่วยงาน | : | ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย |
| ผู้ร่วมงาน | : | - |
| ปีพิมพ์ | : | 2540 |
| อ้างอิง | : | http://www.thaithesis.org/detail.php?id=1082540000553 |
| ที่มา | : | - |
| ความเชี่ยวชาญ | : | - |
| ความสัมพันธ์ | : | - |
| ขอบเขตของเนื้อหา | : | - |
| บทคัดย่อ/คำอธิบาย | : | วิธี H('l)-NMR มีความเหมาะสมสำหรับการวัดปริมาณสารประกอบไกลซีนบีเทนในไซยาโนแบคทีเรียสายพันธุ์ทนเค็มA. halophytica และพบว่า ปริมาณสารไกลซีนบีเทนในเซลล์A. halophytica ที่เลี้ยงในอาหารภาวะปกติ (0.5M NaCl)เท่ากับ 9.7 นาโนโมลต่อ 10('6) เซลล์ และเซลล์ตอบสนองต่อภาวะที่ความเข้มข้นของเกลือในอาหารเลี้ยงสูงขึ้น(2M NaCl) โดยการสะสมสารไกลซีนบีเทนเพิ่มขึ้น 8 เท่าการเตรียมเอนไซม์บีเทนอัลดีฮายด์ดีไฮโดรจีเนสจากไซยาโนแบคทีเรียสายพันธุ์ทนเค็ม A. halophytica ให้บริสุทธิ์โดยผ่านการตกตะกอนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟตที่มีความเข้มข้นอิ่มตัว 35-70 เปอร์เซนต์ และโครมาโตกราฟีแบบ ดี อี เออี-เซลลูโลส ได้เอนไซม์ที่มีแอคติวิตีจำเพาะเท่ากับ 290.8ไมโครโมลต่อนาทีต่อมิลลิกรัมโปรตีน และมีความบริสุทธิ์เพิ่มขึ้นประมาณ 18 เท่า pH และอุณหภูมิที่เหมาะสมต่อการทำงานของเอนไซม์บีเทนอัลดีฮายด์ดีไฮโดรจิเนสจาก A. halophyticaคือที่ pH 7.5 และที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส ในการศึกษาทางจลนศาสตร์ของเอนไซม์พบว่า เอนไซม์มีความจำเพาะต่อสับสเตรท บีเทนอัลดีฮายด์ และโคเอนไซม์ NAD('+) โดยมีค่าคงที่มิเคลิส (K(,m)) เท่ากับ 91 และ 71.4 ไมโครโมลาร์ตามลำดับ และมีค่าความเร็วสูงสุด เท่ากับ 175.4 ไมโครโมลต่อนาทีต่อมิลลิกรัมโปรตีน อะเซตทาลดีฮายด์ และเอทธาโนลามีนซึ่งเป็นสารที่มีโครงสร้างคล้ายสับสเตรท มีผลการยับยั้งการทำงานของเอนไซม์อย่างมาก การศึกษาผลของเกลือต่อการทำงานของเอนไซม์พบว่าที่ความเข้มข้นของเกลือ NaCl และKCl เท่ากับหรือน้อยกว่า 0.1 โมลาร์ มีผลกระตุ้นให้การทำงานของเอนไซม์ดีขึ้น เมื่อความเข้มข้นของ KCl สูงกว่า0.1 โมลาร์ การทำงานของเอนไซม์จะลดน้อยลงและจะคืนสู่ระดับปรกติ สำหรับเกลือ NaCl เมื่อความเข้มข้นสูงกว่า0.1 โมลาร์ จะยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ เกลือ CaCl(,2)และ MgCl(,2) ที่ทุกความเข้มข้นที่ทดสอบจนถึง 0.5 โมลาร์มีผลยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ DTT ซึ่งเป็นสารประกอบreducing agent ช่วยป้องกันเอนไซม์จากการถูกยับยั้งโดยp-chloromercuriphenyl sulfonic acid ซึ่งเป็นสารประกอบ sulfhydryl-reactive จากการทดลองหาน้ำหนักโมเลกุลของเอนไซม์พบว่าเอนไซม์บีเทนอัลดีฮายด์ดีไฮโดรจีเนสจาก A. halophytica มีน้ำหนักโมเลกุลเท่ากับ 120,000ดาลตัน ซึ่งประกอบด้วย 4 หน่วยย่อยที่มีน้ำหนักโมเลกุลของแต่ละหน่วยย่อยเท่ากับ 30,000 ดาลตัน การศึกษาผลของความสัมพันธ์ระหว่างความเข้มข้นของเกลือภายนอกเซลล์และแอคติวิตีจำเพาะของเอนไซม์พบว่า เมื่อความเข้มข้นของเกลือภายนอกเซลล์สูงขึ้นแอคติวิตีจำเพาะของเอนไซม์เพิ่มขึ้นซึ่งมีความเป็นไปได้ว่าเกลือจากภายนอกมีผลในการชักนำให้มีการสังเคราะห์เอนไซม์เพิ่มขึ้นซึ่งเป็นวิธีที่เซลล์ตอบสนองต่อภาวะกดดันโดยเกลือ |
| บรรณานุกรม | : |
อุทัยวรรณ คำอาบ . (2540). การสะสมไกลซีนบีเทนและการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์บีเทนอัลดีฮายด์ดีไฮโดรจีเนสจากไซยาโนแบคทีเรียสายพันธ์ทนเค็ม Aphanothece halophytica.
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. อุทัยวรรณ คำอาบ . 2540. "การสะสมไกลซีนบีเทนและการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์บีเทนอัลดีฮายด์ดีไฮโดรจีเนสจากไซยาโนแบคทีเรียสายพันธ์ทนเค็ม Aphanothece halophytica".
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย. อุทัยวรรณ คำอาบ . "การสะสมไกลซีนบีเทนและการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์บีเทนอัลดีฮายด์ดีไฮโดรจีเนสจากไซยาโนแบคทีเรียสายพันธ์ทนเค็ม Aphanothece halophytica."
กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย, 2540. Print. อุทัยวรรณ คำอาบ . การสะสมไกลซีนบีเทนและการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนของเอนไซม์บีเทนอัลดีฮายด์ดีไฮโดรจีเนสจากไซยาโนแบคทีเรียสายพันธ์ทนเค็ม Aphanothece halophytica. กรุงเทพมหานคร : ฐานข้อมูลวิทยานิพนธ์ไทย; 2540.
|
