รากเพาะเลี้ยงของเทียนบ้านถูกสร้างขึ้นมาเพื่อใช้เป็นแบบในการศึกษาชีวสังเคราะห์ของสารในกลุ่มแนพโธคิวโนนที่เป็นอนุพันธ์ของ lawsone จากการวิเคราะห์สารในสิ่งสกัดที่ได้จากการสกัดรากเพาะเลี้ยงด้วย ethyl acetate และmethanol โดย TLC พบว่าสิ่งสกัดดังกล่าวมีสารประกอบในกลุ่มแนพโธควิโนนและคูมารินเป็นองค์ประกอบหลัก สารประกอบเหล่านี้ถูกแยกให้บริสุทธิ์และวิเคราะห์หาโครงสร้างโดยอาศัยข้อมูลทาง spectroscopy ได้เป็น lawsone,2-methoxy-1,4-naphthoquinone, methylene-3,3'-bilawsone(diphthicol), scopoletin, isofraxidin, 4,4'-biisofraxidinและ spinasterol ในบรรดาสารต่างๆ เหล่านี้พบว่าmethylene-3,3'-bilawsone (bisnaphthoquinone) และ 4,4'-biisofraxidin (biscoumarin) เป็นสารประกอบชนิดใหม่สารประกอบต่างๆ เหล่านี้สามารถแยกออกจากกันได้โดยอาศัยเทคนิคทาง HPLC ซึ่งทำให้สามารถศึกษาลักษณะทางเคมี(chemical pattern) และปริมาณของสารประกอบฑุติยภูมิที่ถูกสร้างขึ้นในรากเพาะเลี้ยงเพื่อเปรียบเทียบกับในใบและรากของต้นเทียนบ้าน นอกจากนี้ยังมีการทดลองหาความสัมพันธ์ระหว่างการเจริญเติบโตของรากเพาะเลี้ยงและการสร้างสารประกอบแต่ละชนิดด้วย โดยพบว่ารากเพาะเลี้ยงมีการสร้างสารแนพโธควิโนนสูงในช่วงท้ายของ linear phase ของgrowth cycle การศึกษาชีวสังเคราะห์ของสารกลุ่มแนพโธควิโนนโดยการป้อน [('14)C](...)-ketoglutarate ให้กับรากเพาะเลี้ยงพบว่าสารนี้ถูกนำไปใช้ในการสร้างโมเลกุลของlawsone และ 2-methoxy-1,4-naphthoquinone โดยไม่พบว่ามีสารตัวกลาง (intermediates) ที่ถูกติดฉลากด้วย ('14)Cในวิถีชีวสังเคราะห์ของสารกลุ่มนี้ ในทำนองเดียวกันการทดลองโดยใช้สิ่งสกัดโปรตีน (crude protein extract) จากรากเพาะเลี้ยงพบว่า [('14)C](...)-ketoglutarate จะถูกนำไปใช้ในการสร้างโมเลกุลของ 2-methoxy-1,4-naphthoquinoneโดยไม่มีการตรวจพบว่ามีสารตัวกลางในวิถีชีวสังเคราะห์ที่ถูกติดฉลากด้วย ('14)C เช่นกัน จากผลการทดลองนี้แสดงให้เห็นว่าเอนไซม์ต่างๆ ในวิถีชีวสังเคราะห์ของ lawsoneและ 2-methoxy-1,4-naphthoquinone ในเทียนบ้านมีการจัดตัวแบบ multienzyme complex หรือ multifunctional enzymeนอกจากนี้ยังพบว่า enzyme complex นี้จะถูกชะออกมาจากSuperose 12 gel filtration column ด้วย void volumeซึ่งเป็นการยืนยันถึงการมีน้ำโมเลกุลสูงและความซับซ้อนของเอนไซม์ การศึกษาคุณสมบัติของ Enzyme complex พบว่าเอนไซม์ดังกล่าวสารใช้ (...)-ketoglutarate และ chorismicacid เป็นสารตั้งต้นในการสร้าง 2-methoxy-1,4-naphthoquinoneได้ และต้องอาศัย coenzyme A, ATP และ Mg('2+) ในการออกฤทธิ์ของเอนไซม์ และดูเหมือนว่า lawsone-O-methyltransferaseไม่ได้เป็นส่วนประกอบของ enzyme complex นี้ นอกจากนี้ยังพบว่า methionine เป็นแหล่งของหมู่ methyl ของ 2-methoxy-1,4-naphthoquinone แต่ไม่ได้เป็นแหล่งของหมู่ methylให้กับ methylene bridge ของ methylene-3,3'-bilawsone